优溴胺对人工诱发鸡大肠杆菌病的疗效观察
2011-06-19穆春宇于子洋王自然
穆春宇,于子洋,王自然
(山东省临沂大学生命科学学院动物医学系,山东 临沂 276005)
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验药物 优溴胺原粉(含量98%,批号20110209)由山东鲁港福友药业有限公司提供;对照药物硫酸阿米卡星(含量98%,批号20101102)、头孢噻呋钠(含量96%,批号20110113)和盐酸左旋氧氟沙星(含量98%,批号20110204)原粉均由山东省某制药有限公司提供。
1.1.2 试验试剂 营养肉汤培养基、麦康凯营养琼脂,均购自北京陆桥技术有限公司。
1.1.3 试验仪器 420-型电热恒温培养箱,SW-WJLCU-洁净工作台,YXQG02-型电热式蒸汽消毒器,电子天平,常用玻璃器皿等。
1.1.4 试验动物 480只1日龄艾维茵商品肉仔鸡,购自山东临沂康华孵化厂。
1.1.5 试验菌种 鸡大肠杆菌O78血清型,购自中国兽药监察所。
1.2 试验方法
1.2.1 试验菌液制备 将保存的强毒菌种复壮后,划线接种于麦康凯琼脂培养基培养18~24h,然后用灭菌接种环挑取单个典型菌落接种于5mL肉汤培养基中,置37℃培养18~24 h后取出,再取肉汤培养物接种肉仔鸡复壮。从死亡鸡肝脏和心血中无菌操作分离大肠杆菌并重新接种麦康凯琼脂平板培养后,再挑取典型菌落接种于营养肉汤中,37℃培养18~24 h,用菌落平板计数法测定其生长浊度,达3×108CFU·mL-1以上者作为试验菌液。
1.2.2 试验分组与接种 艾维茵商品肉仔鸡出壳后立即运回实验动物饲养室,网上常规饲养,喂不含抗菌药物的全价饲料,自由采食及饮水,并作临床观察记录。选取420羽雏鸡随机分为14组,每组30羽,称重、标记、分笼饲养,饲养至7日龄时人工感染鸡大肠杆菌,感染后观察7 d。试验鸡分组及处理情况见表1。
表1 试验鸡的给药分组及处理
1.2.3 人工诱发雏鸡感染大肠杆菌病 接种量和细菌数除健康对照组外,其他所有试验雏鸡均腹腔注射试验菌液0.5mL,约含1.5亿个菌。观察接种前后雏鸡的临床变化,主要包括精神状态、食欲和粪便等变化,并分别记录。健康对照组每只注射灭菌生理盐水0.5mL。
1.2.4 预防和治疗 按表1的试验方案进行预防和治疗用药。感染后7 d内观察鸡的临床症状变化,对死亡鸡进行病理剖检,从肝脏中分离培养细菌,以确定死因。
1.3 疗效评价指标
1.3.1 保护率 经预防用药后,试验雏鸡未出现临床感染症状,精神状态、饮食欲等均正常,即为受保护雏鸡。根据试验结束时每组受保护的鸡只数计算保护率。
1.3.2 死亡率 凡在试验期间出现鸡大肠杆菌病的典型症状并死亡,尸体剖检有典型的特征性病变,并从肝脏、心血中分离培养出大杆肠菌的,判为感染死亡。按死亡数计算各组的死亡率。
1.3.3 治愈率 凡在试验期间经治疗给药后,精神状态、食欲、粪便恢复正常,不再出现明显的感染症状均属治愈。根据治愈鸡数计算治愈率。
1.3.4 有效率 经治疗用药后,治愈或临床症状表现为病鸡精神状态好转、食欲恢复等均视为有效。根据试验结束时每组存活的鸡数计算有效率,即总有效率。
2 结果与分析
2.1 预防试验结果 由表2可知,优溴胺高、中、低剂量组,硫酸阿米卡星组,盐酸左旋氧氟沙星组和头孢噻呋钠组对雏鸡的保护效果明显,其保护率分别为93.3%、93.3%、73.3%、73.3%、63.3%、73.3%,而感染对照组的自愈率仅为10.0%,差异均极显著(P<0.01);另外,优溴胺高、中剂量组与硫酸阿米卡星组、盐酸左旋氧氟沙星组、头孢噻呋钠组、优溴胺低剂量组比较,差异显著(P<0.05);优溴胺低剂量组与硫酸阿米卡星组、盐酸左旋氧氟沙星组、头孢噻呋钠组比较,差异不显著(P>0.05)。
表2 优溴胺对人工诱发鸡大肠杆菌病的预防试验结果
2.2 治疗试验结果 4种药物对致病雏鸡的治疗均取得了较好的效果,结果见表3。优溴胺高、中、低剂量组以及硫酸阿米卡星组、盐酸左旋氧氟沙星组、头孢噻呋钠组的治愈率、有效率与健康对照组、感染对照组比较,差异均极显著(P<0.01);优溴胺高、中剂量组的治愈率和有效率与头孢噻呋钠组、硫酸阿米卡星组、盐酸左旋氧氟沙星组、优溴胺低剂量组比较,差异均显著(P<0.05),优溴胺高、中剂量组之间比较,其治愈率和有效率差异不显著(P>0.05);优溴胺低剂量组的治愈率和有效率与硫酸阿米卡星组、头孢噻呋钠组、盐酸左旋氧氟沙星组比较,差异也不显著(P>0.05)。
表3 优溴胺对人工诱发鸡大肠杆菌病的治疗试验结果
3 讨论与结论
本次预防试验中,优溴胺高、中剂量组的保护率均在93.3%以上,比硫酸阿米卡星组、盐酸左旋氧氟沙星组和头孢噻呋钠组分别提高了20%、30%、20%,差异显著(P<0.05);治疗试验中,优溴胺高、中剂量组的治愈率平均在88.4%以上,比硫酸阿米卡星组、盐酸左旋氧氟沙星组和头孢噻呋钠组分别提高了18.4%、25.1%、21.7%,差异显著(P<0.05);优溴胺高、中剂量组的有效率平均为95%,比硫酸阿米卡星组、盐酸左旋氧氟沙星组和头孢噻呋钠组分别提高了15.0%、21.7%、15.0%,差异显著(P<0.05);优溴胺高、中剂量组之间比较,其保护率和治愈率均无明显差异。试验结果表明,中剂量的优溴胺在临床上对雏鸡大肠杆菌病有较好的预防和治疗效果。
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