芍药苷治疗内脏敏感性肠易激综合征的研究

李瑜，彭成，朱力阳，谢晓芳

肠易激综合征（Irritable Bowel Syndrome，IBS）最早于1820年由Powell报道，属于胃肠功能紊乱性疾病，指一组包括腹痛、腹胀、排便习惯和大便性状异常，持续存在或间歇发作，而无形态学和生化异常改变的症候群，是临床上最为常见的功能性胃肠病之一。其发病机制复杂，近年来很多研究表明内脏感觉异常是其症状的主要病理生理基础，且其发病也明显受到社会心理因素的影响[1]。白芍为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的干燥根，归肝、脾二经，主要功能为养血柔肝、缓中止痛，用于头痛眩晕，胸胁疼痛，胃肠痉挛性疼痛，泻痢腹痛等。临床用于治疗IBS的常用方剂四逆散、痛泻要方、柴胡疏肝散及逍遥散等中均含此药，而芍药苷为芍药的主要有效成分之一。我们在前期研究中建立了稳定的冰醋酸所致内脏高敏感性IBS模型和芥末油所致内脏高敏感性IBS模型，在此基础上，本课题通过观察肠道敏感性和结肠电生理的变化，研究芍药苷对内脏高敏感性IBS的治疗作用。

1 材料和方法

1.1 药物

1.1.1 受试药物 芍药苷为中药白芍的有效部位提取物。芍药苷含量50.12%，批号：20090501，购自西安飞达生物技术有限公司。按提取物总量计，实验前用蒸馏水将芍药苷配成浓度为1.25%、0.6525%、0.325%的高、中、低剂量药液，备用。

1.1.2 阳性药物 曲美布丁片，天津田边制药有限公司生产，生产批号：0905005，规格：0.1g/片×20片/盒。实验时用蒸馏水配制成浓度为2%（每毫升含曲美布丁0.02 g）的药液，备用。

1.2 动物

SD大鼠，雌雄兼有，体重200±20 g，由成都中医药大学实验动物研究中心提供，许可证号：SCXK（川）2008-11，检疫后备用。

1.3 试剂

冰醋酸（成都科龙试剂公司，批号：20091008），食用芥末（大连清水食品加工厂），1.5%戊巴比妥钠。

1.4 仪器

8F导尿管（湛江市事达实业有限公司），BL-420E生理机能仪（成都泰盟科技有限公司）。

1.5 方法

SD大鼠雌雄兼有，随机分为空白组，模型组，自然恢复组，阳性组，芍药苷高、中、低剂量组，共10组。

需造模大鼠禁食24 h后，在清醒状态下用钝针头经肛门插入直肠灌注0.5%冰醋酸5 mLkg-1（或5%芥末油2 mLkg-1），灌注后使大鼠头部朝下，肛门朝上托10秒。首剂剂量浓度加倍，连续6天。从第7天开始，除空白组、模型组外，各组分别灌胃生理盐水，2%曲美布丁，芍药苷高、中、低剂量药液，10 mLkg-1。1次/天，连续3天。

末次给药/造模前禁食24 h，末次给药/造模后1h经肛门直肠扩张（CRD）后，观察动物腹部撤离反射（AWR），评价动物的内脏敏感性。肠敏感性测定结束后，立即用1.5%戊巴比妥钠40 mLkg-1腹腔注射麻醉动物，按外科常规手术行下腹正中切口，将自制针灸针银电极埋置于结肠浆膜面，距回盲部约2cm，双极的间距5 mm，用BL-420E生理记录仪同步描记胃肠电，时间常数5 s，高频滤波0.3 Hz。待波形稳定后，记录5 min内的电生理活动，计算频率、峰电位、峰峰值、峰面积。

2 结果

2.1 芍药苷对大鼠冰醋酸IBS模型的影响

2.1.1 芍药苷对冰醋酸IBS模型大鼠肠敏感性的影响

模型组大鼠腹部抬起和背部拱起的阈值明显降低，分别经阳性药曲美布丁、芍药苷中剂量治疗后腹部抬起和背部拱起的阈值明显增加，自然恢复后腹部抬起和背部拱起的阈值略有增加。结果见表1。

表1 芍药苷对冰醋酸IBS模型大鼠肠敏感性的影响（x±s）

2.1.2 芍药苷对冰醋酸IBS模型大鼠结肠肌电的影响 模型组大鼠与空白对照组比较，频率、峰电位、峰峰值、峰面积均有增加。自然恢复后峰电位、峰峰值、峰面积有一定改善，芍药苷高、中、低剂量也可改善峰电位、峰峰值、峰面积的增加，芍药苷中、低剂量还可使频率降低。但无统计差异。结果见表2。

表2 芍药苷对冰醋酸IBS模型大鼠结肠肌电的影响（x±s）

2.2 芍药苷对大鼠芥末油IBS模型的影响

2.2.1 芍药苷对芥末油IBS模型大鼠肠敏感性的影响

模型组大鼠腹部抬起和背部拱起的阈值明显降低，分别经阳性药曲美布丁、芍药苷中、低剂量治疗后腹部抬起和背部拱起的阈值明显增加，自然恢复后腹部抬起和背部拱起的阈值略有增加。结果见表3。

表3 芍药苷对芥末油IBS模型大鼠肠敏感性的影响（x±s）

2.2.2 芍药苷对芥末油IBS模型大鼠结肠肌电的影响

模型组大鼠与空白对照组比较，频率、峰电位、峰峰值、峰面积均有增加，但无统计差异。阳性药曲美布丁可显著改善峰电位及峰面积的增加，改善峰峰值。自然恢复后继及芍药苷低剂量也对峰电位、峰峰值、峰面积的增加有改善作用，但无统计差异。结果见表4。

表4 芍药苷对芥末油IBS模型大鼠结肠肌电的影响（x±s）

3 讨论

芍药苷是芍药的主要有效成分之一，是一种单萜类糖苷化合物。近年来，国内外学者对其进行了较为深入的研究，发现其不仅具有多种生物学效应，且毒副作用较小。现代药理研究表明，芍药苷具有明显降低温浴法致小鼠镇痛[2]及蜂毒引起的疼痛[3]、改善小鼠结肠炎[4]、抗大鼠佐剂性关节炎[5]作用，另外还有保护神经[6]、保护大鼠脑缺血后脑水肿、血脑屏障及大脑局部血流量[7]、改善东莨菪碱致大鼠空间学习记忆障碍[8]、保护内皮细胞[9]、阻断大鼠心肌细胞L钙通道[10]等作用。芍药苷对IBS的治疗作用研究暂未见报道。

本研究在实验室前期研究的基础上，采用朱力阳等[11]建立的内脏高敏感性IBS疾病模型，相对于传统肠道高敏感性模型，该模型稳定、重复性好、且造模时间短，为开展中药治疗IBS的实验研究提供了重要的工具。

自1973年Ritchie等研究报道IBS病人对结肠气囊扩张的疼痛阈值比对照组低以来，内脏敏感性增高在IBS病理生理中的作用倍受重视，其肠道表现为疼痛阈值下降，即痛觉过敏，此病理特征可以在模型中得到很好体现，通过肠道给予刺激后的大鼠内脏敏感性增高，与IBS患者有很好的相似性[12]。本研究应用冰醋酸和芥末油建立的IBS内脏高敏感性模型大鼠与正常大鼠相比，对直肠扩张（CRD）的腹部撤离反射（AWR）抬腹阈值和拱背阈值都显著降低，而芍药苷中剂量能有效改善冰醋酸、芥末油两种刺激造成的肠道疼痛阈值的降低，提示在连续化学刺激后，肠道发生痛觉过敏，其机制可能是通过传入神经末梢及脊髓背角水平的致敏，引起神经可塑性的变化[13]，芍药苷通过影响脊髓背角水平来改善痛觉的过敏。

电生理实验表明，冰醋酸、芥末油模型组与空白组比较，大鼠结肠频率、峰电位、峰峰值及峰面积均有所增高，提示结肠电活动和内脏敏感性有直接关系，反复化学刺激可能使大鼠神经系统发生重塑[14]。芍药苷能改善冰醋酸、芥末油反复刺激造成的结肠频率增高，降低峰电位、峰峰值和峰面积，表明芍药苷可能通过影响胃肠神经系统而改善内脏感觉过敏。

本实验结果提示，芍药苷可治疗内脏高敏性IBS，降低内脏高敏感性，其途径可能是影响局部过敏介质的释放及脊髓背角水平，影响胃肠神经系统等而改善IBS的症状。在一定范围内发现芍药苷中剂量效果显著，但其量效关系、药效作用及机制还有待进一步探索。

[1] 彭成.中医药动物实验方法学[M].北京:人民卫生出版社,2007:49.

[2] 刘聪.芍药苷的提取及其镇痛作用研究[J].吉林农业:学术版,2011,(2):65.

[3] Yu HY,Liu MG,Liu DN,et al.Antinociceptive effects of systemic paeoniflorin on bee venom-induced various’phenotypes’ of nociception and hypersensitivity[J].Pharmacol Biochem Behav,2007,88(2):131.

[4] 周毅,王赫,李悦山,等.芍药苷增高小鼠恶唑酮结肠炎黏膜中β-防御素表达并减轻病变[J].药学学报,2010,45(1):37.

[5] 凌琳,陈镜宇,魏浩洁,等.芍药苷微乳与芍药苷对大鼠佐剂性关节炎作用的研究[J].安徽医科大学学报,2011,46(3):240.

[6] 马伟,马卫东,苗珍花,等.芍药苷神经保护作用的实验研究[J].宁夏医科大学学报,2011,33(2):132.

[7] 孙蓉,吕丽莉,郭守东,等.芍药苷对局灶性脑缺血模型及血脑屏障的影响[J].哈尔滨商业大学学报:自然科学版,2005,21(4):405.

[8] Tabata K,Matsumoto K,Watanabe H.Paeoniflorin,a major constituent of Peony root,reverses muscarinic M1-receptor antagonist-induced suppression of long-term potentiation in the rat hippocampal slice[J].Japan J Pharmacol,2000,83:25.

[9] 王辰允,洪倩,马增春,等.芍药苷对辐射内皮细胞起保护作用的机制[J].解放军药学学报,2010,(3):198.

[10] 张广钦,郝雪梅,陈世忠,等.芍药苷对大鼠心肌细胞L钙通道的阻断作用[J].中国药理学通报,2003,19(8):863.

[11] 朱力阳,彭成,谢晓芳,等.化学刺激引起的两种大鼠内脏高敏感性模型的建立[J].中国药理学通报,2010,26(2):267.

[12] Tang H M,Li D T,Huang Y H,et al.Establishment of the diarrhea - predominant IBS SD rat model and appraisal of its sensitivity [J].Chin Pharmacol Bull,2009,25 (5):693.

[13] BuenoL,Fioramonti J,DelvauxM,et al Mediators and pharmacology of visceral sensitivity: from basic to clinical investigations [J].Gastroenterology,1997,112:1714.

[14] 李兆申.肠易激综合征内脏高敏感性研究现状和展望[J].第二军医大学学报,2003,24(2):120.