针氧疗法对慢性鼻-鼻窦炎兔血清中IL-8、TNF-a的影响

吕品,李胜涛,邙玲玲,周新颖



针氧疗法对慢性鼻-鼻窦炎兔血清中IL-8、TNF-a的影响

吕品1,李胜涛2,邙玲玲3,周新颖2

(1.中国中医科学院广安门医院,北京 100029;2.成都中医药大学,四川 610075;3.天津市河东区常州医院,天津 300250)

从对慢性鼻-鼻窦炎兔血清中白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-a)影响的角度,揭示针氧疗法治疗慢性鼻-鼻窦炎的分子生物学机制。取体重1.5～3.0 kg健康新西兰大白兔45只,随机分为正常组、模型组、西药组、针刺组、针氧组,共5组,每组9只。随后建立兔慢性鼻-鼻窦炎模型。造模后第43天开始,西药组服克拉霉素片,针刺组针刺5组穴位,针氧组在针刺组基础上加氧疗。治疗2星期后,心脏取血提取血清,用ELISA法测各组新西兰兔血清中IL-8、TNF-a含量。模型组兔血清IL-8含量明显升高,与正常组相比差异有统计学意义(＜0.01)。针氧治疗后多数兔血清中IL-8含量降低,但与模型组相比差异无统计学意义(＞0.05)。模型组兔血清TNF-a含量明显升高,与正常组相比差异有统计学意义(＜0.01)。针氧治疗后兔血清TNF-a含量降低,与模型组相比差异有统计学意义(＜0.05)。针氧疗法能有效改善炎症所引起的兔全身表现,降低部分兔血清中IL-8含量,降低兔血清中TNF-a含量,从而抑制炎症的发展。

针刺;针氧疗法;鼻窦炎;酶联免疫吸附法;白细胞介素8;肿瘤坏死因子

慢性鼻-鼻窦炎是单一鼻窦或各鼻窦黏膜的慢性化脓性疾病[1],是一种常见多发性耳鼻喉科疾病。慢性鼻-鼻窦炎病程长,反复发作,难以治愈。主要局部症状为嚏喷、鼻塞、脓涕、嗅觉障碍、面部疼痛或压迫感、头痛等。本研究是通过实验观察针氧疗法对慢性鼻-鼻窦炎兔炎性细胞因子的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

健康新西兰大白兔45只,体重1.5～3.0 kg。

1.2 方法

1.2.1 实验造模

取门诊慢性鼻-鼻窦炎患者上颌窦穿刺冲洗液进行细菌培养,得到1麦氏单位的细菌悬浊液。参考林彬等[2]报道的窦口不完全堵塞加窦腔留置棉絮的造模方法,建立兔慢性鼻-鼻窦炎模型。具体造模方法如下。整个手术过程在无菌操作的前提下进行,将健康新西兰大白兔用戊巴比妥钠2 mL/kg耳缘静脉注射麻醉后,将其鼻背正中的毛剪短、刮光。常规消毒、铺巾,1%利多卡因术区浸润麻醉,沿鼻背正中线切一纵长切口,取双侧上颌窦前壁,分离皮下组织及骨膜。用上颌窦穿刺针在上颌窦前壁圆孔凹陷处钻开直径大约1.5 mm的小孔。取少量棉絮通过上颌窦前壁所钻的小孔,将其置放在窦口及窦腔中,不必完全堵塞窦口。而后用1 mL注射器抽取上述1 mL细菌悬浊液,小心缓慢通过小孔注入模型组、西药组、针刺组、针氧组兔窦腔内。碘伏消毒手术创面,将骨膜、皮肤逐层缝合。饲养42 d,建立CRS模型。

1.2.2 实验分组与治疗

将45只健康新西兰兔适应性喂养1星期后,按随机数字表法分为5组,即正常组、模型组、西药组、针刺组、针氧组,每组9只。自造模后第43天开始,西药组将备用的克拉霉素按25 mg/kg·d[3]灌服给药;针刺组将兔固定在兔架上,从面部到下肢,依次针刺双侧迎香穴、肺俞穴、脾俞穴、肾俞穴和后三里穴,留针15 min;针氧组将兔固定在兔架上,从面部到下肢,依次针刺双侧迎香穴、肺俞穴、脾俞穴、肾俞穴和后三里穴,针刺后将兔架放入密封箱后,给氧10 min。每日治疗1次,疗程共14 d。

1.2.3 取材

治疗结束后,心脏取血装入离心管内,3000×离心15 min后用移液器取出上清液,获取血清,－20℃冰箱保存。

1.2.4 检测指标与方法

酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-a)浓度。

1.3 统计学方法

运用SPSS13.0统计软件进行数据处理,各组数据均以均数±标准差表示,等级资料采用两个组别的非参数检验。

2 结果

2.1 一般情况观察

适应性喂养至造模前,各组新西兰兔体重均自然增加,行动敏捷,进食正常,皮毛密集而有光泽,鼻、唇部湿润清洁,眼睛明亮,大便正常,无死亡。

造模2 d后,模型组、西药组、针刺组、针氧组兔陆续普遍出现精神差,活动减少,进食及饮水量有所下降。在造模第5天,各治疗组和模型组兔进食及饮水量明显下降,倦怠懒动,大便溏稀、皮毛光泽度差。西药组和针刺组经治疗后,精神转佳,活动较治疗前多,进食及饮水量稍有增加。针氧组经治疗后,精神转佳,活动如常,进食及饮水量显著增加,皮毛恢复光泽。

2.2 主要症状体征观察

造模前,各组兔无鼻塞、脓涕症状,个别兔偶尔打喷嚏,属正常生理反应。造模后至治疗前,各组兔(除正常组)鼻塞、喷嚏、脓涕症状明显。治疗后,西药组和针氧组兔鼻塞、喷嚏、脓涕症状消失。针刺组喷嚏症状消失,鼻塞症状减轻,脓涕量较治疗前有所减少,但仍然不断流出。正常组兔,始终无鼻塞、喷嚏、脓涕症状。模型组从造模成功至处死时,鼻塞、喷嚏、脓涕症状明显。

2.3 血清中IL-8含量的测定

模型组兔血清IL-8含量明显升高,与正常组相比差异有统计学意义(＜0.01)。西药治疗后兔血清中IL-8含量明显降低,与模型组相比差异有统计学意义(＜0.05)。针刺治疗后个别兔血清中IL-8含量降低,与模型组相比差异无统计学意义(＞0.05)。针氧治疗后多数兔血清中IL-8含量降低(只有1例含量增高,比模型组高出很多,分析原因可能是因为采集血液时被感染),但与模型组相比差异无统计学意义(＞0.05)。详见表1。

表1 各组兔血清IL-8含量比较 (±s)

注:与正常组比较1)＜0.01;与模型组比较2)＜0.05

2.4 血清中TNF-a含量的测定

模型组兔血清TNF-a含量明显升高,与正常组相比差异有统计学意义(＜0.01)。西药治疗后兔血清TNF-a含量下降,与模型组相比差异有统计学意义(＜0.01)。针刺治疗后兔血清TNF-a含量略有所下降,与模型组相比差异无统计学意义(＞0.05)。针氧治疗后兔血清TNF-a含量下降,与模型组相比差异有统计学意义(＜0.05)。详见表2。

表2 各组兔血清TNF-a含量 (±s)

注:与正常组比较1)＜0.01;与模型组比较2)＜0.05,3)＜0.01

3 讨论

3.1 慢性鼻-鼻窦炎的治疗方法

目前慢性鼻-鼻窦炎的治疗,西医以鼻内窥镜手术和西药为主,中医以内服中药为主及中药外敷、针灸、氧疗等方法。西医治疗方法存在着一些不足,如细菌耐药性增强会使抗生素疗效降低,局部长期应用血管收缩剂可导致药物性鼻炎,手术治疗会产生手术诸多后遗症等。中药治疗慢性鼻窦炎效果较好,但对于不适宜服用中药的患者,治疗慢性鼻窦炎就缺少良效方法。面对这些问题,迫切需要寻求一种疗效确切、稳定、副反应少的新治疗方法。针氧疗法治疗慢性鼻-鼻窦炎缺乏相关报道和规范化的研究,也缺乏随机对照的综合研究。如何运用针氧疗法治疗慢性鼻-鼻窦炎对于临床治疗来说是一个值得关注的问题。

3.2 选穴依据

鼻渊者与肺、脾、肾有密切的联系,其证有虚、实之分。实者以脾胃湿热及外感风热为多见;虚者以肺气虚寒、脾气虚弱、肾气不足为多见。因此拟定针氧治疗慢性鼻-鼻窦炎治疗原则为疏风清热,宣肺降浊,健脾益气,扶正祛邪。文献研究表明[4],临床选穴也有一定规律可循。根据对兔的可操作性选取迎香穴、肺俞穴、脾俞穴、肾俞穴和足三里穴。肺俞穴、脾俞穴、肾俞穴均为背俞穴,是脏腑经气到达体表的重要位置,背部有大团的免疫细胞平时处于休眠状态,调整背俞穴激活了免疫细胞,提高了免疫力,有效地增强抵抗疾病的能力。

根据经络所过,主治所及的原理,近取鼻旁阳明大肠经末穴迎香两穴,疏风清肺热而通鼻窍。通过泻法可使毛细血管收缩,鼻孔缩小,鼻痒、喷嚏、鼻分泌物减少,从而改善过敏性鼻炎症状及体征[5]。现代研究显示,针刺治疗可改善局部血液循环,加速炎性产物的吸收和排泄,起到消炎退肿的作用[6,7]。肺俞属膀胱经腧穴,位于背部,具有疏风泻热,宣肺解表,肃肺降浊作用。肺脏的湿热之气外传于膀胱经,肺俞穴有散发肺脏之热作用。针灸背部的肺俞穴,通过其经络系统,可调节肺脏功能,调和气血阴阳,损有余而补不足,使人体气血维持动态的平衡。脾俞具有健脾利湿、调整消化道的功能。电针百会、脾俞穴[8],针后30 min、60 min、90 min时白细胞总数显著升高。白细胞具有吞噬、杀伤细菌及异物和免疫功能。电针机体后,通过经络、神经-体液系统等的调节,使白细胞总数升高,增强机体的防御能力和抗病能力,起到扶正祛邪的作用。肾具有受藏肺所吸入之清气的功能。肾受藏清气的功能,是肾气的固摄作用之一。肾俞穴具有补益肾气的作用,使之固摄作用得以发挥。肾俞穴是经脉气血流注多的地方,具有补益气血之功效。足三里为足阳明胃经合穴,胃经起于鼻旁,具有调理脾胃,补益气血,疏风化湿,扶正祛邪之功效。足三里穴是阳明经穴,根据阳明经多气多血的中医理论选穴,足三里能健脾,消除腹胀,助消化[9]。现代医学证明刺激足三里能够调整全身功能,提高机体免疫力[10]。

3.3 针氧疗法原理

氧是新陈代谢的关键物质,是生命活动的第一要素。缺氧引起疾病及病变导致缺氧的情况很多,因此氧疗在各种疾病的治疗、预防和康复中得到广泛的应用。常压吸氧后血氧分压可提高50%,氧向组织的弥散距离迅速增加,血液黏度降低,微循环改善,血管收缩,减轻组织水肿,吞噬细胞功能加强,有利于坏死组织的修复和清除,加快侧支循环的建立,清除无氧代谢的酸性产物,并有免疫调节作用。针刺通过刺激穴位,改善局部血液循环,调节局部免疫功能,促进炎症恢复,对炎症的渗出、变质、增生病理变化过程均有调整作用,既能促进炎症的防卫反应,又能抑制损伤反应。

关于针刺配合吸氧的作用机理目前尚无明确实验研究证实,但研究表明氧气除可以满足机体各器官新陈代谢时对氧气的需要外,还可增加有氧代谢以达到改善各脏器功能的作用。长期鼻塞会引起大脑及全身各组织的缺氧,在针刺的同时吸入氧气可迅速改善患者脑细胞缺氧现象,氧气被吸入终末支气管和肺泡,能迅速进入血液循环,改善血液黏稠度,提高动脉血氧含量及饱和度,促进代谢。采取针刺配合氧疗的治疗方法,针刺不仅能疏通经络,畅调气血,同时对氧起到引经定位,直达病所的作用。针氧疗法既能促进炎症灶的愈合,又能控制组织的增生性病变的发展,改善兔整体机能,从而使慢性鼻-鼻窦炎兔机体逐步恢复正常。

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Effect of Acupuncture plus Oxygen Therapy on Serum IL-9 and TNF-ain Chronic Rhinosinusitis Rabbits

1,-2,-3,-2.

1.’,100029,; 2.,610075,; 3.,300250,

To explore the molecular biological mechanism of combined acupuncture and oxygen therapy in treating chronic rhinosinusitis by studying the serum IL-8 and TNF-ain chronic rhinosinusitis rabbits.Forty-five healthy New Zealand white rabbits (weight 1.5～3.0 kg) were randomly divided into five groups, a normal group, a model group, a western medication group, an acupuncture group, and an acupuncture-oxygen group, with 9 in each group. On the 43rd day after the chronic rhinosinusitis rabbit models were successfully developed, the Western medication group started to take Clarithromycin tablets, the acupuncture group received acupuncture treatment with 5 groups of acupoints, and the acupuncture-oxygen group received additional oxygen therapy plus acupuncture. Blood was drawn via intracardiac puncture for extracting blood serum after 2-week treatment, and ELISA was used for determining the contents of serum IL-8 and TNF-a.Compared with the normal group, the content of serum IL-8 was significantly higher in the model group (＜0.01). Reduction of serum IL-8 content was detected in majority of rabbits in the acupuncture-oxygen group, but without significant difference compared with the model group (＞0.05). Compared with the normal group, the content of serum TNF-awas significantly higher in the model group (＜0.01). Compared with the model group, the content of serum TNF-awas significantly lower in the acupuncture-oxygen group (＜0.05).Combined acupuncture and oxygen therapy can effectively improve the general symptoms in rabbits induced by inflammation, and reduce the content of rabbit serum IL-8 to some extent, and definitely reduce the content of rabbit serum TNF-a, inhibiting the development of inflammation.

Acupuncture; Acupuncture-oxygen therapy; Sinusitis; Enzyme-linked immunosorbent assay; IL-8; TNF-a

1005-0957(2011)08-0574-03

R2-03

A

10.3969/j.issn.1005-0957.2011.08.574

2011-05-20

吕品(1983 - ),女,硕士