榆柏烧烫伤喷雾剂的药效学研究＊

任淑娟，陈瑞明，柴 焱，白 璐，姜姗姗，张小丽，陈志诚

(1.陕西省人民医院，陕西 西安 710068;2.陕西省中医药研究院中药研究所，陕西 西安 710003;3.陕西中医学院，陕西 咸阳 712046)

榆柏烧烫伤喷雾剂由黄柏、榆树皮、冰片经醇浸制备而成，具有清热解毒、收敛生肌、止痛功效，用于各种原因引起的Ⅰ度和Ⅱ度烧烫伤。笔者对榆柏烧烫伤喷雾剂与其功能主治有关的药效学进行了研究，现报道如下。

1 仪器与材料

721型分光光度计(上海第三分析仪器厂);YLS-12A型鼠尾光照测痛仪(山东省医学科学院设备站)。榆柏烧烫伤喷雾剂(陕西省人民医院制剂室提供，批号为20091018，每1 mL相当于原生药0.5 g);京万红软膏(天津达仁堂京万红药业有限公司，批号为211681);阿司匹林肠溶片(陕西白鹿制药股份有限公司，批号为091125)。ICR小白鼠，雌雄各半，体重18～22 g，由西安交通大学医学院实验动物中心提供，动物许可证号为SCXK(陕)2007-001号。

2 方法与结果

2.1 镇痛作用

对乙酸所致小鼠扭体反应的影响(扭体法)[1]:取ICR小鼠，随机分为75%乙醇对照组(A组)，京万红组(B组)，受试药高、中、低剂量组(C1组、C2组、C3组，给药剂量分别为 25，12.5，6.25 mL/kg，相当于生药12.5，6.25，3.125 g/kg)，每组12只。各组均按剂量每天涂抹给药1次，连续7 d，末次给药45 min后，每只小鼠腹腔注射0.7%乙酸0.01 mL/g，5 min后开始记录10 min内小鼠扭体次数。表1结果表明，高、中剂量的榆柏烧烫伤喷雾剂有显著的镇痛作用。

对热痛刺激甩尾反应潜伏期的影响(甩尾法)[2]:取ICR小鼠，用鼠尾光照测痛仪剔除痛阈小于3 s或大于10 s者，选出合格的小鼠60只，分组、给药剂量以及给药时间同扭体法。末次给药后45 min和90 min，将小鼠尾部放入鼠尾光照测痛仪中，分别记录小鼠尾自放入仪器至甩尾的时间，作为小鼠的疼痛潜伏期。表1结果表明，榆柏烧烫伤喷雾剂具有良好的镇痛作用。

表1 不同剂量药物对乙酸所致小鼠扭体反应和热痛刺激甩尾反应潜伏期的影响(±s)

表1 不同剂量药物对乙酸所致小鼠扭体反应和热痛刺激甩尾反应潜伏期的影响(±s)

注:与 A 组比较，经 t检验，△P＜0.05，▲P＜0.01。

组别 剂量(g/kg)10 min扭体次数 甩尾反应潜伏期(s)A组(n=12)B组(n=12)C1组(n=12)C2组(n=12)C3组(n=12)90 min 3.24±0.83 5.10±0.60▲5.97±1.73▲5.71±1.28▲5.70±2.02▲25 12.5 6.25 3.125 31±8 13±8▲12±8▲12±9▲29±8▲45 min 3.54±0.78 8.19±1.80▲7.73±3.22▲7.86±3.19▲5.09±2.12△

2.2 抗炎作用

对二甲苯性小鼠耳肿胀的影响[3-4]:取ICR小鼠，分组、给药剂量以及给药时间同扭体法，阳性对照药物用阿司匹林肠溶片0.027 g/kg。末次给药 45 min后，右耳滴二甲苯 20 μL，20 min后处死动物，用7 mm打孔器在左右耳相同位置打耳片[5]，称定质量，计算肿胀度。肿胀度(mg)=右耳片重-左耳片重。结果见表2。

对乙酸提高小鼠腹腔毛细血管通透性的影响[3-4]:取ICR小鼠，分组、给药剂量以及给药时间同扭体法，阳性对照药物用京万红软膏。末次给药45 min后，尾静脉注射0.5%伊文思蓝0.01 mL/g，再立即腹腔注射0.7%乙酸0.2 mL/只，20 min后脱椎处死，打开腹腔，注入10 mL生理盐水冲洗，吸出洗涤液，3 000 r/min离心10 min，再取上清液于590 nm波长处测光密度(OD)值(OD值间接表示通透性)[6]。结果见表3。

表2 不同剂量药物对二甲苯性小鼠耳肿胀的影响(±s)

表2 不同剂量药物对二甲苯性小鼠耳肿胀的影响(±s)

注:与乙醇对照组比较，△P ＜0.05，▲P ＜0.01(表 3同)。

组别乙醇对照组(n=12)榆柏烧烫伤喷雾剂低剂量组(n=12)榆柏烧烫伤喷雾剂中剂量组(n=12)榆柏烧烫伤喷雾剂高剂量组(n=12)阿司匹林组(n=12)剂量(g/kg)3.125 6.25 12.5 0.027肿胀度(mg)37.1±9.9 34.2±15.7 26.9±9.1△16.0±6.1▲15.7±6.5▲

表3 不同剂量药物对乙酸提高小鼠腹腔毛细血管通透性的影响(±s)

表3 不同剂量药物对乙酸提高小鼠腹腔毛细血管通透性的影响(±s)

组别乙醇对照组(n=12)榆柏烧烫伤喷雾剂低剂量组(n=12)榆柏烧烫伤喷雾剂中剂量组(n=12)榆柏烧烫伤喷雾剂高剂量组(n=12)京万红组(n=12)剂量(g/kg)3.125 6.25 12.5 25 OD值0.330±0.144 0.321±0.126 0.187±0.115△0.157±0.117▲0.153±0.121▲

2.3 对小鼠Ⅱ度烫伤的促愈合作用

取60只ICR小鼠，均用8%的硫化钠背部脱毛约6 cm2，腹腔注射氨基甲酸乙酯麻醉后，将小鼠仰位固定于带孔木板上(椭圆形孔2 cm×3 cm)，使去毛皮肤暴露于木板孔内，然后将木板置电热恒温水浴锅上，使裸露背部皮肤浸泡于80℃热水浴内，18 s取出，用干净纱布擦干水渍，即造成Ⅱ度烫伤模型。将60只烫伤小鼠按烫伤面积和体重分为5组，每组12只。其中空白对照组(A组)小鼠每20 g体重给予溶剂0.5 mL，榆柏烧烫伤喷雾剂低、中、高剂量组(B1组、B2组、B3组)分别给药 6.25，12.5，25 mL/kg(相当于每1 kg体重予生药3.125，6.25，12.5 g，每日1次，阳性对照组(C组)给予京万红软膏25 g/kg，均皮肤涂抹，每日1次。单笼饲养，连续给药30 d。每日记录小鼠的创面结痂、脱痂、水肿和感染等情况;第5，10，15，20，25天记录小鼠的创伤面积，以透明硫酸纸覆在创面上描出皮肤烫伤面的图形[7]，称取烫伤面图纸的质量并折合成面积，计算创面愈合率。创面愈合率=(原烫伤面积-愈合面积)/原烫伤面积×100%，烫伤小鼠愈合率=完全愈合的小鼠数/受试小鼠数×100%。末次给药后次日，脱颈椎处死小鼠，剪取烫伤部位皮肤，于10%甲醛溶液中固定，石蜡包埋切片，HE染色，显微镜下观察各组烫伤小鼠的皮肤愈合程度。组织病理学的评分标准见表4，试验结果见表5、表6。可见，榆柏烧烫伤喷雾剂具有显著提高烫伤小鼠愈合率、缩短愈合时间、提高创面愈合率、促进创面愈合的作用。

表4 组织病理学评分标准

表5 不同剂量药物对Ⅱ度烫伤小鼠愈合率、愈合时间和创面愈合率的影响

表6 不同剂量药物对小鼠烫伤创面病理切片组织病理学评分的影响(±s，分)

表6 不同剂量药物对小鼠烫伤创面病理切片组织病理学评分的影响(±s，分)

组别A组(n=10)B1组(n=10)B2组(n=11)B3组(n=11)C组(n=12)剂量(g/kg)3.125 6.25 12.5 25表皮结构1.2±0.60 1.1±0.94 0.6±0.66 0.6±0.48＊0.5±0.67＊胶原纤维束1.3±0.46 1.6±0.56 1.0±0.80 1.0±0.60＊0.6±0.80＊粒细胞浸润1.9±0.30 1.3±0.90 1.3±0.78＊1.5±0.50 1.3±0.78＊

3 讨论

榆柏烧烫伤喷雾剂为我院自制制剂，在临床应用已有20多年的历史，临床反馈疗效肯定，具有使用方便、经济实惠、质量稳定的特点，深受患者欢迎。方中黄柏清热燥湿，解毒疗疮，解除火毒，为君药;榆树皮收敛生肌，消除肿胀，促进疮疡愈合;冰片性凉，辅助黄柏泻火毒，并可生肌止痛，消除火毒引发的肿胀疼痛，与榆树皮同为辅药。三药合用，具清热、解毒、收敛、生肌、止痛功效，可消除红肿疼痛，用于Ⅱ度烧烫伤可防止感染、消除肿胀、促进溃疡面愈合。其治疗过程与中医的制痂疗法和西医的暴露疗法相似，不需包扎。药物喷射在新鲜创面后，经3～5 min可形成一层透明药膜，再重喷2～3次，增厚药膜不致破裂，可促使药痂形成并保留完整，形成的药痂能阻断污染、细菌感染和外来刺激[8]。烧伤的炎症反应早期主要表现为毛细血管扩张、通透性亢进、渗出和水肿。本研究结果表明，高、中、低剂量的榆柏烧烫伤喷雾剂均具有显著降低毛细血管通透性、减少炎症渗出、减轻水肿的作用，说明其对炎性早期的治疗作用较强;3个剂量的榆柏烧烫伤喷雾剂均能明显延长小鼠的痛反应潜伏期，镇痛作用随剂量的增加而增强，作用持久。本药效学研究结果与榆柏烧烫伤喷雾剂的功能主治相吻合，为进一步扩大该制剂的临床应用提供了药理学依据。

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