阿昔洛韦缓释片在不同介质中的释放研究

周卫，谢浩，严相平，丁逸梅，2（.南京工业大学江苏省药物研究所有限公司，南京市 20009；2.南京工业大学药学院，南京市 20009）

阿昔洛韦，又名无环鸟苷（Aciclovir，简称ACV），为核苷类抗病毒药，化学名为9-（2-羟乙氧甲基）鸟嘌呤。由于ACV体内半衰期较短，为2～3 h左右，常规使用时每日需服用5次，易产生漏服现象，且因此血药浓度有较明显的峰-谷现象，临床表现为恶心、呕吐等不良反应[1]。鉴于此，为了提高该药的治疗顺应性，临床上出现了ACV缓释片，使每天多次服用缩减为每8 h服用1次，同时可降低血药浓度的波动，减少峰值时的毒副作用，增强谷值时的疗效，使药物的安全性、有效性和顺应性都有所提高[2]。

ACV的溶解具有pH依赖性[3]，在不同pH条件下，药物的溶解度及控制药物释放行为的辅料的水化、溶胀、溶蚀速度都可能不同，因此，应该对其在不同pH值条件下的释放行为进行考察，以为其建立合理可靠的体外释放方法提供依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器

ZRS-8G型智能溶出试验仪（天津市天大天发科技有限公司）；UV-2450紫外分光光度计（日本岛津公司）；ZDY-8压片机（上海远东制药机械总厂）。

1.2 试药

ACV（江苏永大药业有限公司，批号：060211，纯度：99.6%）；ACV标准品（中国药品生物制品检定所，批号：630-200001，纯度：99.9%）；ACV缓释片（南京工业大学江苏省药物研究所有限公司，批号：060403，规格：每片200 mg）；其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 测定波长的选择

取本品1片，研细，精密称取细粉适量（约相当于ACV 10 mg），置于100 mL容量瓶中，加0.1 mol·L－1的盐酸液（以下所用盐酸液均为此浓度）50 mL，超声1 min，加盐酸液稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液。精密量取续滤液适量，加盐酸液稀释制成每1 mL中含10 μg的溶液，作为供试品溶液，进行紫外扫描，结果最大吸收波长为254 nm。另取ACV标准品以盐酸液制成每1 mL约含ACV 10 μg的溶液及照处方比例制备不含主药的空白辅料溶液，依法扫描，结果在254 nm波长处空白辅料无干扰，故选择254 nm为测定波长。光谱详见图1。

2.2 标准曲线的制备

图1 紫外分光光谱图1.供试品；2.标准品；3.空白辅料Fig 1 UV spectrum1.test sample；2.reference substance；3.blank excipients

精密称取ACV标准品适量，加盐酸液溶解并稀释制成每1 mL中含ACV 198.2 μg的溶液，作为贮备液。精密量取贮备液1、2、3、4、5、6 mL，置于100 mL容量瓶中，用盐酸液稀释至刻度，摇匀，在254 nm波长处测定吸光度，以浓度（c，μg·mL－1）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标，进行线性回归。得回归方程：A＝6.00×10－3+5.58×10－2c（r＝0.9994）。另，分别以pH6.8磷酸盐缓冲液、蒸馏水替换介质盐酸液进行相同操作，结果，ACV在3种介质中的检测浓度线性范围均为1.982～11.892 μg·mL－1。

2.3 回收率试验

照处方比例制备空白辅料片，在溶出杯中精密加入标准品适量，约相当于标示量的20%、50%、120%，依法测定。结果，ACV的平均回收率为99.16%，RSD＝0.49%（n＝9），详见表1。

表1 回收率试验结果Tab 1 Results of recovery tests

2.4 溶液稳定性试验

取“2.6”项下同一份释放度测定液，分别于0、1、4、8 h测定其含量，结果RSD＝0.67%，结果表明释放度测定液在8 h内稳定。

2.5 中间精密度试验

取同一批样品，由不同试验者在不同时间分别测定含量，计算中间精密度。结果，含量的RSD＝0.48%，表明本方法中间精密度良好。

2.6 释放度测定及释放方程的拟合

按《中国药典》（2010年版）溶出度测定法（转篮法）有关规定[4]进行释放度测定。取供试品，量取经超声脱气处理的3种不同的释放介质（盐酸液、pH6.8磷酸盐缓冲液和蒸馏水）进行释放度测定。取本品，以上述3种不同释放介质900 mL为溶剂，转速为100 r·min－1，依法操作，在规定时间点0.5、1、2、3、4、5、6、8、12 h分别取溶液3 mL，滤过，并立即在操作容器中补充释放介质3 mL。分别精密量取各滤液0.5 mL，置于10 mL容量瓶中，以盐酸液稀释至刻度，摇匀。照分光光度法，在254 nm波长处测定吸光度；另取ACV标准品适量，精密称定，用盐酸液溶解并稀释制成每1 mL含10 μg的溶液，同法测定，计算出每片在不同时间的累积释放度。

另，前期以盐酸液为释放介质、后期以pH6.8磷酸盐缓冲液为释放介质组成替换介质，考察ACV缓释片在其中的体外释放过程。取本品，以盐酸溶液（9→1000 mL）900 mL为溶剂，转速为100 r·min－1，依法操作；2 h后，立即将转篮升出液面，随即将转篮浸入预热至（37±0.5）℃的磷酸盐缓冲液（pH6.8）900 mL释放介质中，转速不变，继续依法操作，计算出每片在不同时间的累积释放度。以累积释放度为纵坐标，时间为横坐标，绘制释放曲线，见图2。

图2 ACV缓释片在不同介质中的释放曲线Fig 2 Drug release curves of Aciclovir sustained-release tablets in different media

由图2可见，ACV缓释片在盐酸液中的释放速度最快，但12 h时4种介质中ACV皆释放完全。另，在替换介质中，ACV缓释片前2 h在盐酸液中释放约50%，可以较快地达到起效浓度，进入肠道后相对于胃中释放速率减慢，但在12 h时也几乎达到了完全释放。

根据累积释放度和时间数据，选用不同的方程对释放行为进行拟合，结果见表2。

表2 ACV缓释片在不同介质中的释放方程的拟合Tab 2 Fitting results for drug release equation of Aciclovir sustained-release tablets in different media

由表2可见，在4种释放介质中，ACV缓释片的释放动力学特征均以Higuchi方程及Peppas方程拟合较好[5]。Peppas方程（lnQ＝nlnt+k）常用来表征缓释片的释放机制，方程中的n为释放参数，其大小表征释放机制。对于圆柱形制剂（如片剂）而言，当n＜0.45时，该片剂中的药物释放为Fickian扩散；当0.45＜n＜0.89时，药物释放为混合型，即药物扩散和骨架溶蚀协同作用；当n＞0.89时，药物释放为骨架溶蚀机制。本品在不同介质中释放曲线经Peppas方程拟合n均＜0.45，说明ACV缓释片主要为扩散释药机制[6]。

3 讨论

经比较ACV缓释片在盐酸液、pH6.8磷酸盐缓冲液和蒸馏水中的释放行为，可以看出其在盐酸中的释放速度最快，与在pH6.8磷酸盐缓冲液中释放速度相差较大。由于人胃的排空速率一般为0.5～2 h，该缓释片有相当长时间是在肠道中释放，因此为了结合人体正常生理情况，采用了前期以人工胃液（盐酸）为释放介质、后期以人工肠液（磷酸盐缓冲液（pH6.8））为释放介质的方式（模拟人体胃肠道的转运及pH变化）考察其体外释放过程。结果，ACV缓释片在前2 h可以较快地达到起效浓度，进入肠道后相对于胃中释放速率减慢，但在12 h时也达到了完全释放。

ACV缓释片的国家标准[7]规定的释放度测定方法为：取各规定时间点的样品0.5 mL置于10 mL容量瓶中，加入磷酸盐缓冲液（pH6.8）2 mL，以水稀释至刻度，摇匀，在252 nm波长处测定吸光度，按阿昔洛韦分子式C8H11N5O3的吸收系数（）为622进行计算。经笔者研究发现，上述测定方法结果不准确：2 mL的磷酸盐缓冲液（pH6.8）的缓冲容量不够，不足以缓冲0.5 mL的盐酸，因此最终溶液的pH值偏酸，经测定最终样品pH为3.5。举例如下：称取ACV标准品19.82 mg至100 mL容量瓶中，加盐酸液溶解并稀释至刻度；取该溶液0.5 mL，置于10 mL容量瓶中，加入磷酸盐缓冲液（pH6.8）2 mL，以水稀释至刻度，摇匀，在252 nm波长处测定，吸光度为0.581，而如按照吸收系数计算吸光度应为0.616，可见若按照吸收系数法计算结果会偏低。因此笔者参照《中国药典》（2010年版）的ACV片溶出度测定的方法[4]，采用对照品法测定，样品以盐酸液稀释。

综上所述，阿昔洛韦缓释片在不同介质中均具有缓释性，释放机制主要为扩散释药。

[1]林山鹰，李 东.阿昔洛韦——一种广谱高效的抗病毒药[J].深圳医学信息，1994，6：11.

[2]吕竹芬，欧有权.阿昔洛韦缓释片的制备及体外释药的研究[J].广东药学院学报，2002，18（4）：263.

[3]丁 立，赵 骏，张钧寿.阿昔洛韦处方前研究[J].山东医药工业，1997，16（6）：1.

[4]国家药典委员会编.中华人民共和国药典（二部）[S].2010年版.北京：中国医药科技出版社，2010：391、附录85.

[5]陆 彬.药物新剂型与新技术[M].第1版.北京：人民卫生出版社，1998：311-314.

[6]陈日来，李玉珍，李 东，等.法莫替丁生物黏附缓释片释放机制研究[J].中国药业，2008，17（13）：11.

[7]WS1-（X-304）-2003Z，阿昔洛韦缓释片[S].2004.