HPLC法测定妇炎舒丸中芍药苷含量

2011-05-21齐晓飞赵晓冬

实用药物与临床 2011年1期

齐晓飞，张伏，张璐，赵晓冬

妇炎舒丸是由甘草、赤勺、忍冬藤、大血藤、丹参等十一味药组成的复方制剂，具有清热凉血、活血止痛等功效。用于妇女盆腔炎症等引起的带下量多、腹痛等症状［1］。其中赤勺的主要有效成分为芍药苷。妇炎舒胶囊剂收载于《国家标准》外科妇科分册GWF-303，而妇炎舒丸为企业申报的改剂型的5类新药。为了控制产品质量，保证疗效，本文参考有关芍药苷的含量测定方法［2-3］，建立了妇炎舒丸中芍药苷的含量测定方法。

1 实验材料

高效液相色谱仪(岛津LC-10AD型高效液相色谱仪，威玛色谱工作站);芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号:110736-200628);妇炎舒丸(沈阳绿洲制药有限公司，批号:060701、060702、060703);乙腈为色谱纯;水为纯化水;其他试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件色谱柱:Hypersol C18(4.6 mm×250 mm，5 μm);流动相:乙腈-水(20∶80);流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;检测波长:230 nm;理论板数按栀子苷峰计算不低于3 000。

2.2 对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，置量瓶中，加稀乙醇制成每1 mL含80 μg的溶液，作为对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备取本品20丸，研细，取1.25 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇20 mL，密塞，称定重量，超声处理(功率250 W，频率30 kHz)30 min，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，离心(3 500 r/min)，上清液滤过，取续滤液，作为供试品溶液。

2.4 阴性对照溶液的制备取除赤勺以外的全部成分，按处方工艺制成溶液，再按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。由图1可见妇炎舒丸的其他组分对芍药苷的测定无干扰。

图1 妇炎舒丸HPLC色谱图

2.5 线性关系考察精密称取9.88 mg的芍药苷对照品，置25 mL量瓶中，加稀乙醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。分别精密量取0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、6.0 mL 分置10 mL 量瓶中，加稀乙醇溶液稀释至刻度。取20 μL注入液相色谱仪中，以对照品进样量(μg)为横坐标，峰面积为纵坐标，得线性回归方程:Y=66 380 X-49 491(n=7)，r=0.999 9。结果表明，芍药苷在 0.395 2～4.742 4 μg范围内线性关系良好。

2.6 方法学考察

2.6.1 精密度试验取同一供试品溶液(批号:060701)，按含量测定项下操作，重复进样6次，芍药苷峰面积的相对标准偏差为0.44%。

2.6.2 稳定性试验取同一供试品溶液(批号:060701)，分别于配置后 0、2、4、8、12、24 h，依法测定。结果表明，供试品溶液在24 h内基本稳定，测定结果均无显著变化。

2.6.3 重复性试验精密称取妇炎舒丸同一批号(批号:060701)样品6份，按上述方法进行测定，考察方法的重现性，RSD=0.77%，表明该法重现性良好。

2.6.4 回收率试验精密称取已知含量的样品(批号:060701)1.759 0、1.460 1、1.491 6、1.564 3、1.5213、1.338 5 g共 6份，分别置具塞锥行瓶中，加入芍药苷对照品溶液(浓度为0.421 2 mg/mL)5 mL，再加入稀乙醇溶液45 mL，按样品含量测定项下方法操作，测定结果平均回收率为95.6%，RSD为0.14%。见表1。