老年2型糖尿病患者中同型半胱氨酸与炎症相关细胞因子的检测

朱建一 吕志刚 史恒川

心脑血管、外周血管疾病以及糖尿病微血管并发症是2型糖尿病(T2DM)患者死亡和残疾的最常见原因［1］。目前人们认为T2DM存在着细胞因子介导的炎症反应，炎症在T2DM的发病机制中起媒介作用［2］。有研究发现同型半胱氨酸(Hcy)可以引起炎症和动脉硬化反应，是各种动脉粥样硬化性疾病的独立危险因素［3］。本研究测定了肾功能正常的老年T2DM大血管病变患者血清总同型半胱氨酸(tHcy)与不同类型的炎症相关细胞因子，探讨炎症对T2DM大血管病变的作用以及tHcy对该过程的影响。

1 资料与方法

1.1 研究对象 所有对象均选自江苏省省级机关医院2008年8月至2009年3月住院及门诊患者。135例T2DM患者中男79例，女56例，年龄61～75岁，平均(64.9±4.1)岁。所有患者均排除1型DM、严重肝脏疾病、合并胃肠道、肝、神经系统、血液系统等严重的全身性疾病，且最近6月内未服用过B族维生素和叶酸。大血管病变判断标准［4］:(1)有明确的冠心病或高血压病史或脑梗死病史;(2)有血管疾病导致的相应体征，如间歇性跛行和(或)外周血管搏动消失等;(3)外周血管多普勒检查显示动脉粥样硬化斑块或血栓形成。具体分组如下:T2DM无血管并发症组(NDC组)71例，男42例，女29例，年龄61～74岁，平均(65±3.9)岁;T2DM合并大血管病变组(DC组)64例，男37例，女27例，年龄60～75岁，平均(65±4.3)岁;正常对照组(CTR组)32例均为正常体检人群，年龄60～68岁，平均(64±4.8)岁。

1.2 检测方法 所有检测对象均在禁食8～12 h后，坐位清晨空腹取静脉血5 ml，分离血清后－20℃保存备用;采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)法测定Hcy(试剂为美国BPB公司产品，已提供标准物和质控物，灵敏度0.2 μmol/L)，参考范围5～15 μmol/L;采用ELISA法测定炎症相关细胞因子白细胞介素 2(IL-2)、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-18和γ-干扰素(INF-γ)。所有试剂均购自深圳晶美生物有限公司，均严格按试剂盒使用说明书进行操作，质控物测定结果误差在允许范围之内。

1.3 统计学处理 使用统计软件SPSS 13.0对数据进行统计分析。数据以±s表示，组间差异比较采用t检验，多组组间均数比较用方差分析和q检验，组间率的比较应用卡方检验，P＜0.05为差异有统计学意义。相关资料采用相关分析法计算相关系数，并进行多元logistic回归分析。

2 结果

2.1 各组测定各项指标 与CTR组比较，T2DM患者血清 tHcy、IL-2、IL-6 、IL-8 、IL-18、和 INF-γ 显著升高，IL-10显著降低(P ＜0.05)。DC 组 tHcy、IL-6、IL-8、IL-18和INF-γ显著高于NDC组(P＜0.05)。见表1。

表1 各组标本测定结果(±s)

表1 各组标本测定结果(±s)

注:与CTR组比较，*P＜0.05;与NDC组比较，△P＜0.05

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2.2 T2DM患者中正常tHcy组与高tHcy组的细胞因子水平 以15 μmol/L为分界点，将患者分为高tHcy组和正常tHcy组。结果如表2所示，2组年龄、性别、IL-2、IL-10、INF-γ 均无显著差异(P ＞ 0.05)，而 2 组间IL-6、IL-8、IL-18存在显著差异(P＜0.05)。卡方检验显示，2组T2DM患者合并大血管病变比例也有统计学显著差异(P＜0.05)。见表2。

表2 DM患者中血清正常tHcy组和高tHcy组间各指标的比较±s)

表2 DM患者中血清正常tHcy组和高tHcy组间各指标的比较±s)

注:与正常tHcy组比较，*P＜0.05

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2.3 T2DM患者中细胞因子与血清tHcy相关性分析

多元线性分析结果显示IL-6、IL-8、IL-18与tHcy呈正相关(r=0.33、0.49 、0.27，P ＜0.01、0.01、0.05)，IL-2、IL-10、INF-γ 与 tHcy之间无明显相关性。

3 讨论

目前普遍认为动脉粥样硬化是一种特殊的慢性炎症过程，糖尿病同样存在炎症反应的激活现象［5］。临床研究和流行病学调查显示，血浆tHcy水平与动脉粥样硬化性心脑大血管疾病之间存在着较强的相关性，为动脉粥样硬化的独立危险因素［6］。我们先前的研究也表明，tHcy水平高的T2DM患者合并大血管病变比例显著大于tHcy水平正常的T2DM患者［7］。

本研究表明合并大血管病变的T2DM患者血清IL-6、IL-8、IL-18与tHcy较正常对照组及无大血管病变的T2DM患者均增高，提示IL-6、IL-8、IL-18和tHcy与T2DM大血管并发症相关。既往体外试验显示内皮细胞或平滑肌细胞的IL-8受体介导了IL-18的信息传导并通过释放IL-6及IL-8诱导动脉粥样硬化的生成。

因此，血浆IL-18增高可能促进T2DM患者的动脉粥样硬化的发生。T2DM患者血浆IL-18水平显著增高，但增高的机制还不明确。目前还没有实验证实IL-18与Hcy的因果关系，推测可能是高浓度的Hcy刺激了单核巨噬细胞释放IL-18增多。

Hcy促进IL-6释放的同时也能明显增加IL-6 mRNA的表达，增加DNA转录而导致翻译的蛋白质增加，在转录水平调控IL-6的产生;高浓度的Hcy在损伤血管内皮细胞的同时也刺激其释放IL-8，而IL-8作为一种细胞炎性因子，在动脉粥样硬化中发挥重要作用，该结果有利于支持动脉粥样硬化是一个炎性过程的学说［8-10］。

综上所述，Hcy和炎症相关细胞因子的检测有可能对T2DM患者的血管病变起辅助诊断作用，有利于提高患者的生活质量。

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［4］谷伟军，陆菊明，杨国庆，等.同型半胱氨酸硫内酯与2型糖尿病大血管病变的相关性研究［J］.中国实用内科杂志，2007，27(17):1356-1359.

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［7］朱建一，吕志刚，史恒川.同型半胱氨酸对老年2型糖尿病患者大血管病变的影响［J］.实用老年医学，2010，24(2):135-137.

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［10］南静，邓华聪.白细胞介素8在糖尿病大血管病变发生发展中的作用［J］.中国动脉硬化杂志，2008，93(8):656-658.