急性脑梗死患者血浆超敏C－反应蛋白、一氧化氮及一氧化氮合酶水平的变化及其相关性

林孟戈， 刘 晨， 李智文 (福建医科大学医学技术与工程学院， 福州 50004;福建医科大学附属第一医院;福建医科大学附属第一医院神经内科)

急性脑梗死(acute cerebral infarction，ACI)在我国的发病率呈不断增加趋势，已成为威胁人类健康的重要疾病。脑梗死的病理基础是动脉粥样硬化，而动脉粥样硬化是一个慢性炎症过程［1］。近年来国内外研究表明，超敏C－反应蛋白(high sensitive C-reactiveprotein，hsCRP)可能是参与动脉粥样硬化形成的重要炎性因子，与急性脑梗死的发生、发展密切相关。一氧化氮(nitric oxide，NO)是体内重要的效应分子，与血管内皮功能异常及脑梗死时的神经毒性作用密切相关［2］，其水平取决于一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)的活性。本研究测定183例急性脑梗死患者血浆hsCRP、NO和NOS水平，探讨hsCRP与NO和NOS在急性脑梗死时的变化及其相关性。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选择发病24 h内急性脑梗死患者共183例为ACI组，系附属医院神经内科2008－01～2010－01住院患者，年龄41－89岁，平均年龄(60.6±10.1)岁，其中男性102例，女性81例。另选32例有脑动脉硬化、缺乏临床神经系统阳性定位体征的腔隙性脑梗死患者为阳性对照组(腔隙组)，年龄43－82 岁，平均年龄(62.0 ±10.8)岁，其中男性18例，女性14例。以上研究组均符合全国第四届脑血管病学术会议修订的诊断标准，并经头颅CT或MRI证实。入选患者排除伴有近期急性感染、创伤、手术后以及患有肝、肾或心功能衰竭、肿瘤、风湿、结核等疾病。脑梗死患者神经功能缺失程度根据美国国立卫生研究院卒中量表神经功能受损程度(NIHSS)在患者入院时进行评定。NIHSS评定＜4分为轻度神经功能障碍，4－15分为中度神经功能障碍，＞15分为重度神经功能障碍。健康对照组56例，年龄 45 －76 岁，平均年龄(59.2 ±9.19)岁，其中男性31例，女性25例，为同期附属医院健康体检合格者中随机抽取，排除标准同疾病组。各组间年龄、性别差异均无统计学意义(P＞0.05)。

1.2 方法

1.2.1 标本的采集 所有患者均于入院24 h内、健康对照组于体检日清晨空腹采集静脉血，立即分离收集血浆，－20℃低温保存，成批测定。

1.2.2 检测方法 hsCRP含量采用乳胶增强散射比浊法测定，仪器为美国德灵公司BNⅡ全自动特定蛋白分析仪，试剂盒、标准品、校正液等均由Date-Behring公司提供。NO含量采用硝酸还原酶法测定，NOS活性采用分光光度法测定，测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供，严格按说明书规定的方法进行操作。

1.3 统计学分析 应用SPSS11.5统计软件进行数据处理。计量资料采用±s表示，两组间均值比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验，相关性采用直线回归相关分析。

2 结果

2.1 三组血浆hsCRP、NO和NOS水平比较 腔梗组血浆hsCRP水平高于对照组，NO和NOS水平低于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。急性脑梗死组血浆hsCRP、NO和NOS水平均高于对照组和腔梗组，差异有统计学意义(P＜0.01，见表1)。

表1 ACI组和腔梗组与对照组血浆hsCRP、NO和NOS水平比较(±s)Tab 1The levels of plasma hsCRP，NO and NOS in ACI patients，lacunar infarction patients and controls(±s)

表1 ACI组和腔梗组与对照组血浆hsCRP、NO和NOS水平比较(±s)Tab 1The levels of plasma hsCRP，NO and NOS in ACI patients，lacunar infarction patients and controls(±s)

与对照组比较，*P＜0.05，＊＊P ＜0.01;与腔梗组比较，#P ＜0.01

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2.2 不同病情程度 ACI患者血浆 hsCRP、NO和NOS水平比较 ACI患者轻度、中度和重度神经功能缺失组与健康对照组血浆hsCRP和NOS水平差异有统计学意义(P＜0.01);中度组和重度组与对照组血浆NO水平差异有统计学意义(P＜0.01)，而轻度组与对照组血浆NO水平差异无统计学意义(P＞0.05)。急性脑梗死不同神经功能缺失程度各组之间血浆hsCRP、NO和NOS水平的差异均有统计学意义(除中度组与重度组hsCRP水平比较P＜0.05，其余各组间比较 P ＜0.01，见表2)。

表2 不同病情程度ACI患者血浆hsCRP、NO和NOS水平比较(±s)Tab 2Comparison of plasma hsCRP，NO and NOS in ACI patients with different neurological damages(±s)

表2 不同病情程度ACI患者血浆hsCRP、NO和NOS水平比较(±s)Tab 2Comparison of plasma hsCRP，NO and NOS in ACI patients with different neurological damages(±s)

与对照组比较，*P＜0.05;与轻度组比较，#P＜0.01;与中度组比较，△P ＜0.01，△△P ＜0.05

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2.3 ACI患者血浆hsCRP、NO和NOS水平的相关性分析 急性脑梗死患者血浆hsCRP水平与NO和NOS 水平呈明显正相关(r分别为 0.848，0.833，均P＜0.01)，血浆NO水平与NOS水平呈明显正相关(r=0.889，P ＜0.01)。

3 讨论

众多研究结果表明，脑梗死的病因主要是动脉粥样硬化，炎症反应在动脉粥样硬化的发生发展、并导致急性脑梗死的各个环节中都起着不同程度的作用［3，4］。hsCRP不仅是反映机体炎症反应最灵敏的血清学指标之一，而且参与血栓形成和动脉粥样硬化的病理过程。CRP可与脂蛋白结合，通过经典途径激活补体系统，产生大量攻击复合物和终末蛋白C5b，引起血管内膜损伤;CRP通过受体介导动脉壁中脂质颗粒摄取而参与泡沫细胞形成，泡沫细胞是促发动脉粥样硬化的关键;CRP还可诱发内皮细胞分泌和表达细胞间黏附分子－1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子－1(VCAM-1)以及单核细胞趋化因子－1(MCP-1)，促进主动脉内皮细胞产生较高水平的纤溶酶原激活物抑制剂－1(PAI-1)，引起动脉内皮损伤，促进血栓形成，从而启动或加速动脉粥样硬化的发展。可以认为，CRP通过多种途径参与急性脑梗死发生和发展的病理生理过程。相关的研究结果表明hsCRP水平与急性脑梗死的发生、病情严重程度及预后等均密切相关［5，6］。本研究结果显示，腔隙性脑梗死患者血浆hsCRP水平高于健康对照组，与文献报道一致［7］，提示hsCRP与无症状脑梗死的发生有关，进一步证实了炎症过程参与了脑动脉硬化病变。ACI患者血浆hsCRP水平明显高于对照组和腔梗组，并随患者神经功能缺失严重程度而增高。ACI各组之间差异均有统计学意义，但中度组与重度组之间的差异相对较小，说明血浆hsCRP含量高低与神经功能缺失程度一致，尤其在轻度和中度缺损时变化更明显。

NO作为体内重要的信使分子，与神经冲动传导、血管平滑肌舒张等神经和心血管功能变化密切相关［8］。NO在脑梗死中的作用取决于梗死时程的进展及NOS同功酶的活性。脑梗死早期内皮型NOS(eNOS)表达产生的NO通过扩张脑血管，增加脑血流量，抑制血小板和白细胞聚集黏附等抗血栓作用起到神经保护作用;而在脑梗死中后期神经元型NOS(nNOS)和诱生型NOS(iNOS)所表达产生的NO则通过介导谷氨酸毒性、生成氧自由基、影响细胞线粒体功能、增加炎症反应、诱导细胞凋亡等途径产生神经毒性作用，参与迟发性神经元损伤。对于急性脑梗死后NO水平的变化，研究结论尚不一致［9，10］，本研究结果显示，急性脑梗死患者血浆 NO和NOS水平明显高于对照组，且随患者神经功能缺失严重程度而增高，提示脑梗死与NO产生的神经损伤作用密切相关。研究还显示腔梗组NO和NOS水平降低，可推测由于内皮源性NO水平减少，削弱了NO扩张脑血管、抗血栓等神经保护作用，促进了脑梗死的发生和发展［11］。而轻度组NO水平与对照组的差异无统计学意义，这可能是急性脑梗死发生前即已存在NO含量的降低，轻度脑梗死时表达上调的NOS以内皮型为主，合成增多的NO较少，其少量增高的NO被抵消，未能在血浆中检测出变化。严重脑梗死损伤诱导产生大量iNOS，造成NO持续、大量释放而引起血浆NO水平显著升高。

相关分析显示，ACI患者血浆hsCRP水平与NO及NOS水平呈正相关。已有的研究结果证实，局部脑缺血后2 h脑组织即可出现病理性变化，促发严重的炎性反应，直接引起炎性因子白细胞介素－6(IL-6)的释放，IL-6诱导肝脏合成CRP，导致血浆hsCRP水平升高［12］;IL-6还可促进诱导型NOS的释放，显著增高血浆 NO 的水平［13］，说明 hsCRP、NO及NOS水平的增高与炎症反应有关。至于急性脑梗死后hsCRP、NO及NOS水平变化与炎症级联反应的关系以及它们之间的相互作用，有待进一步研究。

综上所述，血浆hsCRP、NO及NOS水平与急性脑梗死的发生发展有关，可作为了解急性脑梗死病情和预后判断的指标。hsCRP在急性脑梗死轻度、中度损伤时即出现显著增高，NO主要在中度和重度脑功能缺损时显著增高。因此，联合检测血浆hsCRP、NO和NOS水平能更全面反映急性脑梗死患者神经功能缺失程度，对判断脑梗死的发生及发展、指导临床治疗具有重要意义。

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