仙人救心片对充血性心力衰竭大鼠氧自由基清除作用的实验研究

刘东敏，杨培君

(1.陕西中医学院，陕西 咸阳 712000；2.陕西中医学院附属医院，陕西 咸阳 712000)

充血性心力衰竭(CHF)不是一个独立的疾病，是各种病因所致心脏病的终末阶段。近年来，CHF的发生率有所增高，可能与城市人口的老龄化、诊断率的提高、肥胖人群增多及运动减少有关，故探讨中药治疗CHF是一项有价值的工作。仙人救心片为杨培君教授经验方制剂，现就该方对CHF大鼠氧自由基清除作用的实验研究，报道如下。

1 实验材料

1.1 实验动物 健康SD大鼠45只，雌雄各半，体质量180～200 g，由西安医科大学实验动物中心提供(合格证号：08-005号)。

1.2 药物与试剂 仙人救心片：0.36 g/片(相当于含生药1.44 g)，由陕西中医学院附属医院药剂中心提供。卡托普利片：25 mg/片，上海旭东药业股份有限公司产品；注射用盐酸阿霉素：10 mg/支，浙江海正药业股份有限公司产品；生理盐水:500 mL/瓶，西安京西制药厂产品；SOD试剂盒、MDA试剂盒：南京建成生物工程研究所产品。

2 实验方法

2.1 动物分组 将45只大鼠称重、编号，随机分为5组，每组9只，即A组：空白对照组；B组：模型对照组；C组：卡托普利组；D组：仙人救心片大剂量组；E组：仙人救心片小剂量组。

2.2 造模方法[1]A组：腹腔注射生理盐水1 mL，每周1次，注射6次；B～E组:腹腔注射阿霉素2 mg/kg，用生理盐水1 mL溶解，每周1次，注射6次。第6周造模结束时动物出现不同程度的竖毛弓背，反应迟钝，呼吸心跳加快，食欲不振，大便溏泻，舌爪青紫，双后肢水肿等症状。各组开始给药。

2.3 给药方法[2]A、B组：给予生理盐水2 mL，每日1次灌胃；C 组：给予卡托普利片6.75 mg/kg，溶于2 mL生理盐水中，每日1次灌胃；D组：给予仙人救心片大剂量1.75 g/kg，溶于2 mL生理盐水中，每日1次灌胃；E组：给予仙人救心片小剂量0.58 g/kg ，溶于2 mL生理盐水中，每日1次灌胃；各组动物灌胃2周，于末次灌胃后24 h取各组动物做各项检测。

2.4 观测项目及方法

2.4.1 观察动物的一般情况 每日观察记录动物神态、食量、饮水、反应灵敏度、有无疾病发生并及时处理及存活死亡情况；每周称1次体质量。

2.4.2 血清MDA含量、SOD活性测定 各组动物眼球采血，每只3 mL，血清3 000 r/min离心10 min，取上清液用于测定MDA、SOD。MDA含量用硫代巴比妥酸比色法测定，SOD活性用黄嘌呤氧化酶法测定。具体操作按试剂盒所述方法进行。

3 结果

3.1 一般情况 实验期间，A组动物一直反应灵敏、活动灵活、毛色光亮、食欲正常，体质量逐日增长，二便正常;B～E组动物从造模第4周陆续出现倦卧、反应迟钝、活动度减少等症状；第5周时造模动物出现呼吸频率加快，精神萎靡；造模第6周上述症状明显加重，动物气喘严重、竖毛弓背、毛发不荣、进食量少、体质量增长减缓或呈负增长、双后肢水肿、大便稀溏，提示心衰模型成功。造模期间，A组动物不明原因死亡1只，造模组动物共死亡6只,解剖后可见心脏增大，肝肺充血，并见腹水数毫升，分析其原因可能为动物耐受性差，心衰程度较重所致。治疗1周后，治疗组动物上述表现显著减轻，食量增多且活跃，生长加快,治疗结束时，气喘、双后肢水肿消失，毛色渐润，反应转灵敏，二便正常。且D组状况优于C、E组。B组动物呼吸困难、四肢水肿、反应迟钝等现象更加严重。治疗结束时共存活动物38只，A、B、E组各8只，C、D组各7只。

3.2 对大鼠血清MDA含量的影响 见表1。

表1 各组动物血清MDA含量比较

3.3 对大鼠血清SOD 活性的影响 见表2。

表2 各组动物血清SOD活性比较

4 讨论

近年来对OFR与CHF的关系研究受到重视。CHF时，由于相对缺血缺氧，使OFR产生增加，而OFR产生增加又可损害心肌导致或CHF加重[3]。其主要机理是作用于心肌细胞不饱和脂肪酸发生过氧化脂质损伤，直接后果为膜损伤，使心肌细胞的完整性遭到破坏，膜的液态性、流动性及通透性异常，膜容量调节及离子转运功能障碍，膜结合酶脂质微环境发生改变，导致酶活性下降，影响心肌收缩及舒张功能。SOD是体内一种重要的OFR清除剂，其活性直接影响体内脂质过氧化的平衡，MDA为OFR攻击生物膜中多不饱和脂肪酸引发脂质过氧化而形成的脂质过氧化物之一，其含量可直接反映脂质过氧化程度和间接反映细胞损伤的程度。故测定SOD活性和MDA含量，可反映体内OFR水平，判断心脏功能程度。

CHF可归属于为中医“心悸”“水肿”“脱证”等范畴，其基本病理变化属本虚标实。本虚以心肾气(阳)虚为主，标实以瘀血水饮停聚为主，心肾气(阳)虚是本病发病之关键所在，其病位在心，涉及肺、脾、肾三脏。仙人救心片以益气活血利水为原则组方[4-5]。全方由红参、淫羊藿、川芎、葶苈子等组成。方以人参大补元气而益心肾为君药，淫羊藿补肾壮阳、益气强身助人参温补之力为臣药，川芎辛香行散，具温通血脉，活血祛瘀，行气开郁之功效；葶苈子泻肺平喘，利水消肿，同时制约人参、淫羊藿燥热，与葶苈子共为佐药。全方选药精当，配伍合理，补中有泻，标本同治，祛邪而不伤正，紧扣心衰心肾阳虚，血瘀水停之病机，共奏益心温肾，化瘀利水，标本同治之功。现代药理研究[6-7]证实：人参含有人参皂苷，人参皂苷Rg2能改善心功能不全兔血流动力学状况，具有强心作用，并有抗脂质过氧化和清除氧自由基的作用。淫羊藿主要含黄酮类、淫羊藿甙和淫羊藿次甙等成分，王英军等[8]研究表明，淫羊藿总苷对麻醉开胸犬血流动力学及心肌耗氧量的影响，淫羊藿总苷能明显增加心排出量、心肌血流量和心搏出量；淫羊藿可抑制脂质过氧化反应；可使心肌收缩力明显增强，心肌张力明显增加[9]。川芎可增加冠脉血流量，使心肌供氧量增加；川芎生物碱可提高实验动物的耐缺氧能力，同时抑制血小板聚集，而且可使聚集的血小板解聚[10]；并通过促进冠状动脉扩张而减轻心肌缺血缺氧，其机制为保护SOD活性，减少脂质过氧化物形成[11]。葶苈子具有强心、增加冠脉流量且不增加心肌耗氧量的作用;利尿作用与其加强心肌收缩力,增加肾小球滤过量有关[12]。

以上实验证实仙人救心片对CHF有明显治疗作用，其机制可能与清除氧自由基，抑制脂质过氧化反应有关。

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