鲜药金龙胶囊抗病毒作用的研究进展

中国癌症基金会鲜药学术委员会（100039） 李建生

病毒是一类不具有细胞结构，但具有遗传、复制等生命特征的微生物。病毒具有严重的社会危害性，既可以导致流行病及艾滋病等疾病的发生，造成患者死亡，也可以成为某些肿瘤发生的诱因。因此在鲜药抗肿瘤研究过程中，笔者等逐渐将目光转向了病毒，通过对抗病毒的研究，探索现代鲜药金龙胶囊在抗肿瘤过程中的深层次作用，为鲜药的进一步研究开创新的里程。

1 金龙胶囊抗艾滋病毒（HIV）作用研究

HIV是一种变异性很强的病毒，各基因的变异程度不同，其中env基因变异率最高。HIV发生变异的主要原因包括逆转录酶无校正功能导致的随机变异；宿主的免疫选择压力；不同病毒DNA之ARV、病毒DNA与宿主DNA之间的基因重组；以及药物选择压力等，其中不规范的抗病毒治疗是导致耐药性产生的重要原因。根据2004年WHO“艾滋病临床分期及抗病毒治疗指征”提出，无症状HIV感染者不适合抗病毒疗法，且临床发现提前使用抗病毒疗法会使HIV感染者出现以下情况：①生存质量下降；②较早产生耐药，使未来抗病毒治疗的选择受到限制；③经济上无法承受；④由于HAART的副作用，使感染者间断用药，从而诱发HIV病毒变异，对最终研制疫苗不利。基于此类现象，针对于无症状期HIV感染者，目前国内外尚无公认的有效治疗措施。对尚未达到HAART疗法应用标准的广大HIV感染者，目前只能任其病情逐渐加重，致感染者CD4+细胞计数下降至可以使用HAART疗法的指标时，才能用药治疗。这种做法不利于疾病的早期控制，有悖于中医学“治未病”的学术思想。

自80年代起，我国学者即开始在坦桑尼亚、赞比亚，以及我国河南、云南等艾滋病高发区运用中医药进行探索性治疗。20多年来中医药防治艾滋病的医疗实践，特别是近3年来国家中医药管理局组织实施的“中医药治疗艾滋病试点项目”表明，中医药可以改善艾滋病患者临床症状和体征，提高患者生存质量，稳定提高患者免疫功能，减少机会性感染，不同程度地恢复劳动能力，对无症状期HIV感染者有延缓进入艾滋病期的趋势。

鲜中药制剂金龙胶囊系国家正式批准的中成药（Z10980041），它由鲜守宫、鲜金钱白花蛇和鲜蕲蛇组成。鲜守宫味咸性寒，为君药，具有通经达络、降痰解毒、破瘀散结、补肺肾益精血（阴）之功效。鲜金钱白花蛇味咸性温，为臣药，具有搜风通络、活血止痛的作用，辅助君药可加强破瘀散结、解郁通络。鲜蕲蛇味咸性温，为佐使药，其性善走窜、内走脏腑、外切皮毛，具有搜风定痛、通经达络的作用。全方配伍精当、药性平和，用二蛇之温制守宫之寒而不滞，用守宫之寒制二蛇之温而不燥，用于治疗肿瘤实证。金龙胶囊上市十余年来，大量基础和临床研究揭示：①金龙胶囊能从整体水平、细胞水平和分子水平调节机体的细胞免疫和体液免疫功能；② 金龙胶囊具有解热、镇痛作用。此外，2003年与中国中医研究院开展的20例HIV感染者临床观察的结果显示：①20 例HIV 感染者/ AIDS 患者治疗后临床症状有所改善，以乏力、腹泻者为显著；②患者的免疫功能具有一定程度的改善：小剂量组CD4+计数增加9例，减少6例；大剂量组CD4+计数增加1例，下降4 例。小剂量组：治疗前186.40±110.92/mm3，治疗后300.40±164.57/mm3,增加114.33±154.76/mm3。大剂量组：治疗前257.17 ±127.57/mm3，治疗后242.37±161.26/mm3，减少14.80 ±120.40/mm3。③金龙胶囊对病毒载量没有明显的抑制作用：小剂量组12 例增加，3 例下降；其中≥0.5log者，1例下降，7例增加。大剂量组：下降3例，增加2 例；其中≥0.5log者2 例下降，1例增加。小剂量组不如大剂量组，前者1/8下降，后者则为2/3下降，其余均为升降＜0.5log。④在治疗3个月中，未发现药物副作用，血常规及肝肾功能均正常，试验治疗过程中也未发现严重的并发症。

抗AIDS 药物大部分是根据AIDS 发病机制，寻找切断某一环节制备而成；也有的是根据抗癌药扩大适应症而成，如叠氮胸苷（AZT）就是根据其属于抗猫白血病药发展起来的。金龙胶囊现为获得批准文号的抗癌有效中成药，扩大用于治疗AIDS，初步观察是有效的，且有一定量效关系，用小剂量能扶正，大剂量则祛邪；小剂量对提高免疫作用较好，大剂量对抑制病毒载量稍好于小剂量，但效果并不明显。目前，AIDS治疗的研究已取得很大成绩，从过去着眼于HIV病毒方面，到最近把研究重点转向免疫系统[1]。国内不少研究工作者也认为：中医的优势在整体的免疫调节。因此，中医抗AIDS/ HIV 药固然可以寻找，但是研究重点应该定位在免疫上[2]。

国内中药和免疫功能关系的研究已有相当深度，例如黄芪能诱生内生性干扰素，黄芪多糖已被证明能促进白细胞介素-2的分泌。甘草多糖可促进B细胞合成，提高血清IgM含量，诱生干扰素。甘草甜素能抑制HIV，增强免疫功能等。动物药如地龙可增强细胞免疫功能，提高T4、T8等淋巴细胞亚群；斑蟊素能抑制癌细胞蛋白质合成[3]。金龙胶囊既能提高癌症病人的免疫功能，也能提高艾滋病病人的免疫功能，且均有双向调节作用。金龙胶囊是动物性成分，无任何副作用，可能是事先经低温及现代生化技术处理之故，其治疗艾滋病的作用机理尚不明确，且例数过少，有待继续探索和积累数据。

2 抗乙肝病毒（HBV）作用研究

乙型肝炎病毒简称乙肝病毒。是一种DNA病毒，属于嗜肝DNA病毒科（hepadnavividae）。根据目前所知，HBV就只对人和猩猩有易感性，引发乙型病毒性肝炎疾病。

我国的乙肝病毒感染率约60%～70%；乙肝表面抗原携带率约占总人口的7.18%，以此计算，全国约有9300万人携带乙肝病毒，其中乙肝患者大约有3000万。乙肝病毒的活动受到机体免疫系统的控制，是一个此消彼长的过程。但病毒变异的过程是非常复杂的，总的来说，免疫系统漠视病毒的存在，保持免疫耐受状态维持免疫平衡；但免疫系统与病毒反复搏斗的过程会造成肝脏损伤。原发性肝癌是死亡率极高的恶性肿瘤之一，其病因迄今尚未完全明了。据近年研究结果显示，该病与乙肝病毒、丙肝病毒、黄曲霉素等化学及物理因素有关，HBV感染是我国原发性肝癌的重要病因[4]。我国约有1.2亿HBV携带者，其中部分发展为肝细胞癌，流行病学资料显示我国的原发性肝癌患者中89.6%～95%有HBV感染背景。中医认为HBV为湿热疫毒之邪，感受HBV之邪为本病的外在病因，据HBV的致病特点当属中医学所称“天地之杂气”，为一种疫毒之邪，具有传染性，隐伏血分，喜留于肝。研究发现，绝大部分肝癌和癌旁组织中存在HBV-DNA整合现象，其中HBV-X基因及其编码产物具有广泛的反式激活作用，促进原癌基因表达，使抑癌基因突变失活，还有上调端粒酶活性等作用，使肝细胞不能正常凋亡而癌细胞增殖[5]。我国肝细胞癌中肝硬化合并率为84.6%，HBV造成肝细胞损伤、肝脏慢性炎症，并影响多种细胞因子分泌，通过一定机制启动肝纤维化进程或促进肝细胞癌变，其病变机理与中医学之湿、毒、痰、瘀一致。

HBV相关性肝癌的形成过程中，HBV与一些诱发因素共同作用促进了病情的进展，如饮酒、情志抑郁、治疗不当等。脾为后天之本，既受湿毒所困，又为肝木所乘，不能行其运化之职，气血生化乏源，先天之精气不得水谷之精气充养，渐成脾肾精气亏虚；肝肾乙癸同源，肾中精气不足，则水不涵木，肝失柔养，以至肝、脾、肾俱伤，脏腑功能失调。热毒伤津耗液，且痰瘀亦为正常津血凝聚而成，故正伤中每从脾气亏虚，发展为气阴两虚，终见肝肾阴精虚损。肝体阴而用阳，阴伤则虚火内旺，血脉枯燥，津血不行，癌块增大，气机阻滞，形成恶性循环，正愈伤，邪愈盛。正常肝细胞的减少、机体免疫功能的紊乱是癌细胞异常增殖造成的结果，也是进一步导致病情进展的重要原因。中医治疗原则有养肝化瘀解毒防治HBV相关性肝癌、化瘀散结以防癌块形成、养肝健脾以扶正。

已有的基础研究成果明确了HBV与肝癌的形成与发展密切相关，并揭示了部分病变机制，为制定有效的防治HBV相关性肝癌疗法奠定了基础。中医药以其多靶点、多途径作用的特点在防治HBV相关性肝癌的临床实践中显示出较大的优势，即可以改善肝功能，稳定病情，降低癌变发生率，提高生存质量与生存率。近期即将开展“金龙胶囊联合TACE治疗原发性肝癌对乙肝病毒活动状态及肝功能的影响的研究”，相信金龙胶囊会取得预期的良好效果。

3 抗人乳头瘤病毒（HPV）作用研究

HPV（The human papilloma viruses) 是一种伴随人类很久的双链DNA小病毒，到目前为止已发现约130余种不同基因类型。HPV感染主要通过“皮肤-皮肤”、“黏膜-黏膜”接触传染，性传播是其主要的传播方式。男女均可受到感染，同时成为病毒携带者、传播者、感染者，人们发现初次性生活早、性伴侣多、与高危人群性接触等感染HPV的风险大，男性使用避孕套虽不能完全避免，但可明显降低感染风险。大多数HPV感染范围比较广，可在女性的宫颈、阴道、外阴及男性的阴囊、包皮、阴茎的皮肤中检测HPV病毒。国外研究发现，最高有40%的有性生活的女性存在亚临床的HPV感染，年龄超过30岁者感染率在5%～10%。估计约50%的妇女在初次性生活后4年内发生HPV感染。母婴垂直传播不常见，但也有婴儿通过母婴传播发生呼吸道乳头状瘤病的情况。高危型HPV感染的半数生存期为8～10个月，低危型HPV感染的半数生存期约为高危性的一半，感染后对同型HPV病毒有一定的免疫力，少部分对其他类型有一定程度的免疫保护。

HPV与宫颈癌的发生密切相关，国外流行病学及临床研究发现：某些宫颈浸润癌100%可检出HPV的DNA，以HPV16、18、31、45型最常见；在高级别的癌前病变（CINⅡ-CINⅢ）HPV的DNA的检出率在70%～90%，CINⅠ中检出率在20%～50%，在非典型细胞ASCUS、AGUS的检出率接近50%。一般认为，从HPV感染到癌前病变数年甚至10年以上，但最近的研究发现，这个时间可能很短，在5年以内，通过HPV检测的筛查可能早期发现癌前病变。HPV16型危险最高，在感染后3～5年有40%的女性发现癌前病变。合并多种类型的HPV较单一类型HPV感染发生癌前病变的风险更高。

研究发现高危型HPV感染与宫颈癌前病变、宫颈浸润癌有密切关系，故预防HPV感染可能预防或减少宫颈癌的发生。采用不含病毒DNA的HPV L1的病毒样颗粒（仅有可产生抗原作用的蛋白质而没有可引起基因改变的DNA）作为疫苗，注射后人体可产生抗体，对同型的HPV病毒有免疫保护作用。但它只对未感染者有保护作用，对已感染者无明显的治疗作用。

目前国外有两种HPV疫苗，一种为默克公司的“Gardasil”，它是对HPV16、18、6、11型有效的四价疫苗；另一种为葛兰素史克公司的“Cervarix”，它是HPV16、18型二价疫苗。免疫对象在国外一般选择9～14岁尚未有初次性生活的女孩。国内正在进行相关的研究，还未正式进入临床。另外，对已感染HPV的患者，使用干扰素、白介素进行抗病毒治疗，部分人HPV检测可转为阴性，但目前关于中药干预治疗HPV感染宫颈癌的研究报道较少。

为了探讨金龙胶囊与HPV相关宫颈癌之间的关系，笔者进行了中药金龙胶囊对HPV相关宫颈癌的治疗作用及机理的初步探讨，以转染HPV16E6/E7基因形成的肿瘤细胞为模型，探讨了金龙胶囊对HPV相关宫颈癌的治疗作用，以提供新的实验依据。结果显示，金龙胶囊对表达HPV16E6/E7的癌细胞体内生长具有明显的抑制作用，并可上调肿瘤组织中浸润淋巴细胞表达r-IFN，下调肿瘤组织中VEGF表达水平。

4 抗急性呼吸窘迫综合征（SARS）作用研究

SARS的临床治疗主要是依照卫生部颁布的《传染性非典型肺炎治疗方案》，即抗病毒、激素、抗生素、免疫调节或支持治疗为主的标准救治方案。金龙胶囊由鲜活动物经特殊方法提取制成，是北京建生药业有限公司生产的我国第一个正式批准使用的鲜活动物制剂(国药准字Z10980041)，具有中医整体调节、扶正荡邪及中药“生者尤良”的优点[6]。金龙胶囊以守宫、白花蛇等为原料，经超低温破碎及冻融处理，使细胞内各种有效成分充分释放，并在低温下迅速进行生化技术处理而制成。其功效为补益气血，破瘀散结，解毒通络。

金龙胶囊临床上广泛用于肺癌、乳腺癌、肝癌、宫颈癌等的治疗，具有调节免疫力、改善患者生存质量、延长生存期的作用。林显敢等[7]通过观察金龙胶囊辅助化疗对晚期非小细胞肺癌患者的CD4+/CD8+细胞活性的影响，证明金龙胶囊能增强晚期非小细胞肺癌患者的CD4+细胞免疫水平。上海中医药大学曙光医院、中日友好医院、中国医学科学院肿瘤医院、中国中医研究院广安门医院联合对300 例原发性肝癌患者进行了双盲、随机对照试验，结果证实金龙胶囊能升高患者CD4+T细胞数量，并降低CD8+T细胞数量。而SARS的免疫学特点主要是CD8+T细胞水平下降，重症SARS患者的T淋巴细胞中，CD4+T细胞、CD8+T细胞都明显降低[8]。治愈的SARS患者与死亡患者的CD4+T细胞、CD8+T细胞计数也有显著差异。

本研究将金龙胶囊用于32例SARS患者的辅助治疗取得了较好的疗效。实验结果证明，金龙胶囊能明显提高SARS患者的CD8+T细胞水平，且与对照组比较显示出较好的临床疗效，提示金龙胶囊对SARS患者的免疫系统有调节作用，能够保护或重建SARS患者的免疫系统。结果还提示，金龙胶囊可使Ts细胞上调，抑制过激免疫变态反应，促进病变恢复。从恶性肿瘤及艾滋病的临床研究中可以观察到，金龙胶囊使Th细胞上调，Ts细胞下调，提高患者抗癌免疫力。由此可见，金龙胶囊具有双向免疫调节作用，其调节作用在不同免疫病理状态下发生相应的调节效应，而决定性因素取决于机体内在因素，从而最终使机体恢复Th/Ts系统平衡。

5 展望

综上所述，金龙胶囊不仅具有良好的抗癌作用，而且通过相应机理和临床观察的初步探索，发现其对病毒也具有一定的抑制作用。金龙胶囊的抗病毒作用可能机制是金龙胶囊的整体免疫调节作用。金龙胶囊抗病毒作用为从免疫角度研究和寻找抗病毒中药，中药抗病毒及由病毒引发的癌症研究开拓了思路。中药毒副作用小，不易引起耐药性，且具有多靶点、整体调节的作用，是抗病毒制剂研发的巨大优势。目前病毒种类越来越多，变异越来越快，抗病毒中药的研究具有广阔的前景，而金龙胶囊的抗病毒研究将会为该类探索奠定坚实的基础。