肿瘤标记物在针吸细胞学诊断转移癌分型中探讨

李 升,周丽艳,曲灿华

(佳木斯大学附属第一医院,黑龙江佳木斯 154003)

针吸细胞学诊断恶性肿瘤已得到广大医务工作者的认可,以其操作简单,快速,准确被广泛应用于临床,但是针吸细胞学在诊断恶性肿瘤的分型上有时于组织学分型有较大差异,本文用针吸细胞学诊断恶性肿瘤 45例,采用肿瘤标记物低分子角质蛋白,高分子角质蛋白,C E A、C A 125,C A199等进行免疫组化染色和组织病理学对比,认为针吸细胞学诊断恶性肿瘤,对于肿瘤分型不能明确者进行免疫组化,可以正确的确定肿瘤类型,有利于患者规范化治疗,并深受临床医生和患者的欢迎。具体报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

我们于 2008—01～2010—10间对来我院进行细胞学检查诊断为转移癌患者 45例,男 28例,女 17例,年龄 36～88岁,平均 64岁。

1.2 针吸方法

常取坐位,充分暴露肿物部位,用手触摸到肿块,常规碘酒,酒精消毒后,带手套,左手固定肿物,右手持注射器(常规用 10mL注射器、8号针头)刺入肿块,凭负压反复抽吸 2～3次,吸出少量组织涂片 2张,一张涂在多聚赖氨酸处理过的玻片上,待 95%酒精固定后行免疫组化染色。另一张涂于普通玻片上,瑞吉染色 15min后镜检。

1.3 恶性肿瘤的诊断依据及诊断标准

依马正中、刘淑范、阚秀编著《诊断细胞病理学》[1]及舒仪经、阚秀编著《细针吸取细胞病理学》[2]为依据。

1.4 试剂

来自Doko公司产品。

1.5 免疫组化染色

①涂片制备②TBS缓冲液(0.05m o l/L,pH7.6,)洗涤,5min×3次。③第一抗体,4℃冰箱过夜。④TBS液洗涤,5min×3次。⑤第二抗体,37℃,30min。⑥TBS(同上)液洗涤,5min×3次。 ⑦S—P复合物,37℃ ,30min。 ⑧TBS液洗涤,5min×3次。⑨D A B显色。 10流水洗涤,3min。 11苏木素复染,酒精脱水,二甲苯透明、中性树胶封固。结果判断:细胞核、细胞浆或细胞膜出现棕黄色颗粒为阳性(+),深棕色颗粒为强阳性(++),未显色者为阴性(一)。

2 结果

针吸细胞学检查诊断恶性肿瘤不能明确分型病例 45例,经免疫组化标记后均明确诊断,并与手术切除标本常规病理诊断相吻合。14例表达高分子角质蛋白,提示鳞癌,26例表达低分子角质蛋白C E A,提示腺癌,4例表达 C A 125及低分子角质蛋白,提示腺癌,1例表达表达 S一 100和HMB 45提示恶性黑色素瘤所有提示结果均与常规病理诊断结果相符。

3 讨论

恶性肿瘤病人症状隐匿,往往以转移性的无痛性肿物出现,临床上通常以细针针吸细胞学检查来进行诊断,诊断为转移癌,患者已失去手术机会,只能采取综合性治疗为治疗手段,因针对治疗需要明确转移癌的类型,是鳞癌,还是腺癌,还是其他未分化癌。而细胞学检查通常以单个细胞形态的异型性来进行诊断,缺乏组织学特点,对于分化差的肿瘤细胞难于做出正确分型。况且有些患者的标本唯一是细胞学标本,客观上要求细胞学给予正确分型,才能便于患者的正确治疗,我们在应用细针穿刺细胞学诊断为转移癌的基础上,用免疫组化标记肿瘤细胞对某种标记物表达情况来确定其分型,无疑对临床规范化治疗具有重大意义。也祢补了不用组织病理学、而用细胞学标本代替组织病理学标本行免疫组化染色。本文采用的病例均是在针吸细胞学明确诊断为恶性肿瘤基础之上再进行免疫组化染色,并通过肿瘤细胞形态学特征观察、分析确定采用相应肿瘤标记物。本文中有一病例细胞形态散在,胞浆丰富,核仁不甚明显,形似腺癌,做免疫组化却不表达低分子角质蛋白、C E A、C A199,而表达 S一 100和HM B45,提示黑色素瘤,这种肿瘤细胞无黑色素颗粒,容易给诊断引进误区,在实际工作中应引起注意。用细针针吸细胞学标本做免疫组化染色避免了患者局部做手术取病理,损伤小,无痛苦,操作简单,迅速;尤其在取不到组织病理情况下可使用。

[1]马正中,阚秀,刘树范.诊断细胞病理学[M].郑州:河南科学出版社,1998,499-501

[2]舒仪经,阚秀.细针吸取细胞病理学[M].北京:人民卫生出版社,2000,150

[3]免疫组化技术在病理鉴别中应用[J].河南大学学报,2003,22(3):45