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乙肝ELISA检测中HBeAg和抗-HBe双阳性原因分析

2011-03-31张建强

当代临床医刊 2011年6期
关键词:双阳血块初筛

张建强

(江苏省金坛市中医医院检验科 213200)

乙型肝炎病毒HBeAg阳性,表明病毒复制活跃、 传染性强,与HBsAg同时阳性发生肝癌的危险系数增加60倍,抗-HBe阳性说明病毒复制减少,传染性弱。近年来,普遍使用ELISA一步法,在工作中遇到HBeAg和抗-HBe双阳性的少见模式,为了分析这一现象,笔者进行了研究,现报告如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 本院门诊和住院患者887例,其中36例初筛模式为 HBsAg、HBeAg、抗 -HBe、抗 -HBc4项阳性。

1.2 试剂和仪器(1)HBeAg和抗-HBe为中山达安生物技术有限公司产品,批号分别为:20100316、20100516,HBeAg 样品吸光度值/临界值(S/N)≥2.1判阳性,抗-HBe以抑制率>50%判阳性。

1.3 方法(1)初筛:一步法,严格按说明书操作,每加5份血消加入酶标抗体。分别检测HBeAg、抗-HBe。(2)复核:溶血标本重抽血,脂法患者禁脂3天后抽血;血块收缩不良,分离不完全标本,经3000r/minl0~15min的离心。

2 结果

初筛36份HBeAg和抗-HBe双阳血清。经复核:8份 HBeAg阴性,抗 -HBe仍阳性,20份HBe阴性,HBeAg仍阳性,8份 HBeAg和 HBeAg仍为双阳。

3 讨论

有学者提出 HBeAg和抗 -HBe双阳是HBeAg向抗HBe转化的过渡阶段[1]。本次试验与以上理论不完全相符,双阳性结果是假阳性所致,可能的原因为:溶血标本释放大量过氧化物酶活性的血红蛋白,产生干扰。血块收缩不良,分离不彻底,血清中混有过氧化物酶成分,对HBeAg产生正干扰[2]。脂浊致抗-HBe干扰主要考虑乳糜微粒引起,它造成血清黏度增大的运动速度减慢或产生屏蔽效应,抗原抗体结合几率下降,最终显色降低,产生假阳性。一步法对抗-HBe易产生前带现象,若血清中有大量HBeAg,使固相HBeAb-HBeAg-HBeAh-HRP生成减少,显色下降产生假阳性。一步法若加入血清放置时间过长,再加酶标抗体也会产生抗-HBe假阳性[3]。另仍然有8份标本为双阳性,推测可能是由于方法方面的因素导致,由于条件所限未能进一步确证。

综上所述,HBeAg和抗一HBe双阳多为操作不规范和标本影响因素造成。工作中严格按照SOP操作,对于溶血,脂血等不合格标本应予退回或重新抽血复查。

[1]朱忠勇.实用医学检验学.北京:人民军医出版社,1992,900 -901.

[2]赵友云,刘光中,马煜南.酶免疫检测HBeAg假阳性原因分析.临床检验杂忐,2000,18:263.

[3]腾龙,陈钢,洪加林.酶免疫竞争一步法检测乙型肝炎病毒抗-HBe影响因素探讨.中华医学检验杂志,2003,26:111.

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