APP下载

高效液相色谱法测定小儿清解冲剂中连翘苷含量

2011-03-06

中国药业 2011年3期
关键词:冲剂连翘乙腈

(广东省韶关市药品检验所,广东 韶关 512028)

小儿清解冲剂是由金银花、连翘、地骨皮等8味中药制成的中药复方制剂,具有除瘟解毒、清热退烧功效,临床上用于小儿外感风热或时疫感冒引起的高烧不退、汗出热不解、烦躁口渴、咽喉肿痛、肢酸体倦。本品收载于《卫生部颁药品标准(中药成方制剂第八册)》,其质量标准中无含量测定项[1]。连翘苷为方中主药连翘的主要有效成分。为有效控制药品质量,笔者采用高效液相色谱法测定小儿清解冲剂中连翘苷含量,报道如下。

1 仪器与试药

LC-2010 CHT型高效液相色谱仪(日本岛津)。连翘苷对照品(规格为20 mg,批号为 0821-200104,中国药品生物制品检定所);小儿清解冲剂(规格为10 g/袋,批号分别为100403,100404,100405,广东青云山药业有限公司);乙腈为色谱纯,水为纯化水,其他试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:依利特 Hypersil ODS2柱 (200 mm × 4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈-水(25∶75);流速:1.0 mL/min;检测波长:278 nm;进样量:20 μL;柱温:25 ℃。

2.2 溶液制备

精密称取连翘苷对照品10.39 mg,置50 mL量瓶中,用50%甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀;精密量取5 mL,置50 mL量瓶中,加50%甲醇稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液(每1 mL含连翘苷20.78 μg)。取样品 10 g(1 袋),研细,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加人甲醇20 mL,称定质量,浸渍过夜,超声处理(功率250 W,频率40 kHz)30 min,放冷,用甲醇补足减失的质量,摇匀,滤过;精密量取续滤液5 mL,蒸至近干,加中性氧化铝0.5 g拌匀,置中性氧化铝柱(100~120目,1 g,内径 1~1.5 cm)上,用 70%乙醇 80 mL 洗脱,收集洗脱液,浓缩至干,残渣用50%甲醇溶解,转移至5 mL量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,即得供试品溶液。取本药处方中除连翘外的其他药物,按样品制备工艺制成颗粒,再按供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。

图1 高效液相色谱图

2.3 方法学考察

专属性试验:分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照品溶液各 20 μL,注入液相色谱仪测定。结果阴性对照品溶液在与连翘苷对照品主峰保留时间相同位置处无色谱峰,表明此方法具有一定的专属性。色谱见图1。

线性关系考察:取对照品溶液,分别进样 5,10,15,20,25 μL,按上述色谱条件测定连翘苷峰面积。以连翘苷进样量 X(μg)为横坐标、峰面积值Y为纵坐标作回归曲线,得回归 方 程 Y=1.928 3×106X+8.167 5 × 105,r=0.999 7(n=5)。结果表明,连翘苷进样量在 0.103 9 ~0.519 5 μg 范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验:精密吸取对照品溶液20 μL,重复进样5次。结果连翘苷峰面积的 RSD为1.0%(n=5),表明精密度良好。

重复性试验:取同一批样品5份,按供试品溶液制备方法制备溶液,精密吸取20 μL进样,连翘苷峰面积的 RSD为1.1%(n=5),表明方法重复性良好。

稳定性试验:精密吸取供试品溶液,分别在 0,2,4,6,8 h进样20 μL,测定连翘苷峰面积。结果的 RSD为1.2%(n=5),表明供试品溶液在8 h内稳定。

加样回收试验:精密称取同一批(批号为100403)已知含量(0.034 64 mg/g)的样品6份,分别精密加入对照品(样品量的80%,100%,120%),混匀,按供试品溶液制备方法制备溶液,测定含量,计算连翘苷回收率。结果见表1。

表1 连翘苷加样回收试验结果(n=6)

2.4 样品含量测定

取3批样品,依法制备供试品溶液,分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各 20 μL,测定含量。结果批号为100403,100404,100405的 3批样品中,连翘苷含量分别为 0.034 64,0.037 19,0.036 92 mg/g(n=3)。

3 讨论

取连翘苷对照品适量,用50%甲醇溶液溶解,在200~300 nm波长范围内扫描。结果连翘苷在200,228,278 nm波长处均有最大吸收,由于200 nm已接近紫外吸收区的末端,不宜采用;228 nm波长处样品主峰有拖尾现象,因此以278 nm作为检测波长。样品预处理采用中性氧化铝柱,以有效去除制剂中的干扰组分,保护色谱柱[2]。曾比较了不同比例的甲醇-水、甲醇-乙腈-水、乙腈-水作流动相,结果表明,以乙腈-水(25∶75)为流动相时,连翘苷的峰形好,保留时间适中,柱效高,分离度大,与其他干扰峰能很好地分离[3-4]。

按照2005年版《中华人民共和国药典(一部)》中连翘药材的最低含量限和小儿清解冲剂处方连翘的投料量计算,小儿清解冲剂中连翘苷的理论含量应不少于2.0 mg/袋。3批样品的测定结果表明,实测含量比理论含量低,故认为通过连翘苷含量测定来控制该药品质量具有一定的意义。

[1]WS3-B-1494-93,中华人民共和国卫生部颁药品标准(中药成方制剂第八册)[S].

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:化学工业出版社,2005:117-118.

[3]覃薛文,李志怀.RP-HPLC法测定双黄连口服液中连翘苷的含量[J].中国药师,2008,11(5):550-551.

[4]张晓燕,杨秀平,王建明.银翘伤风胶囊质量标准的研究[J].中国实验方剂学杂志,2007,13(2):6-9.

猜你喜欢

冲剂连翘乙腈
高纯乙腈提纯精制工艺节能优化方案
饮一杯尧羽连翘茶 品太行山河之精华
吹扫捕集-气相色谱-三重四极杆质谱法同时测定饮用出厂水中6种卤乙腈
关于连翘茶你知道吗
说谎的滋味很糟糕
2015版《中国药典》连翘项下连翘苷、连翘酯苷A测定方法的改进
7-ACT缩合反应中三氟化硼乙腈络合物代替液体三氟化硼乙腈的可行性分析
丁二酮肟重量法测定双乙腈二氯化中钯的含量
复方金银花冲剂中绿原酸含量的测定
雷诺冲剂治疗雷诺氏病68例