不同方法及溶剂对黄连小檗碱的提取效果比较

席国萍，宋国斌

（山西大同大学 医学院，山西 大同 037009）

黄连为毛莨科植物黄连的干燥根茎，《神农本草经》列为上品[1]。黄连中的有效成分主要为多种生物碱，如小檗碱、黄连碱、棕榈碱、药根碱、表小檗碱、非洲防己碱、小檗亭碱和木兰花碱等，其中以小檗碱含量最高，约为3%～9%[2]。研究表明，黄连素具有显著的抗心力衰竭、抗心律失常、降低胆固醇、抑制血管平滑肌增殖、改善胰岛素抵抗、抗血小板、抗炎等作用[3]。现有的小檗碱提取方法主要有：稀硫酸法、石灰乳法、有机溶剂法、液膜法、水提取法等[4]。本文通过比较不同方法及溶剂对黄连小檗碱的提取效果，为黄连资源开发利用提供参考。

1 实验部分

1.1 药品与器材

黄连购于贵阳市花溪区中西药结合第四药店，经鉴定为毛茛科植物黄连；盐酸小檗碱（标准品中国药检所）。

FA1004电子天平（青岛扬中仪器有限公司）；UNICOUV-2000型紫外-可见分光光度计（上海肯强仪器有限公司）；RE-200型旋转蒸发仪（上海科兴仪器有限公司）；KS康氏振荡器（上海圣科仪器设备有限公司）。

1.2 黄连的前处理

将黄连放入50℃烘箱中烘烤变脆，粉碎，放入冰箱保存。

1.3 黄连总小檗碱提取液及不同方法提取液制备

1.3.1 黄连总小檗碱提取液的制备 称取5g黄连，以乙醇为溶剂，提取温度为60℃，索氏提取器提取至提取液无色，浓缩至干，用60%乙醇溶解定容至50mL，待测。

1.3.2 不同方法黄连小檗碱提取液的制备

1.3.2.1 回流提取法 称取3份黄连，每份5g，在60℃下，分别以5倍体积（W/V）乙醇、丙酮、水溶液，回流提取3次，每次1h；分别合并不同溶剂提取液，用旋转蒸发仪在60℃减压浓缩至干，用60%乙醇溶解定容至50mL，待测。

1.3.2.2 振荡提取法 称取3份黄连，每份5g，分别以5倍体积（W/V）乙醇、丙酮、水溶液，室温下振荡提取3次，每次1h；分别合并不同溶剂提取液，用旋转蒸发仪在60℃减压浓缩至干，用60%乙醇溶解定容至50mL，待测。

1.3.2.3 浸提法 称取3份黄连，每份5g，在60℃下，分别以5倍体积（W/V）乙醇、丙酮、水溶液，提取3次，每次1h；分别合并不同溶剂提取液，用旋转蒸发仪在60℃减压浓缩至干，用60%乙醇溶解定容至50mL，待测。

1.4 黄连小檗碱测定方法

1.4.1 标准曲线的制作 以盐酸小檗碱为标准品，无水乙醇为溶剂，准确配制浓度为 3、6、9、12、15、18μg·mL-1盐酸小檗碱标准溶液，于345nm处测定吸光度，由最小二乘法得浓度与吸光度标准曲线方程，并根据此方程计算黄连小檗碱含量[5]。

1.4.2 黄连总小檗碱测定 准确量取1mL黄连总小檗碱提取液，于345nm处测定吸光度，通过标准曲线方程计算小檗碱浓度及小檗碱总含量。

1.4.3 不同方法黄连提取液中小檗碱含量测定 准确量取1mL提取液，于345nm处测定吸光度，通过标准曲线方程，由对应的吸光度计算小檗碱浓度及小檗碱含量。

1.5 黄连小檗碱提取率的计算

1.6 提取率重复性实验

根据1.5结果，选择提取效果最好的方法及溶剂进行重复性实验，检测提取效果的稳定性。

2 结果与讨论

2.1 标准曲线方程

根据1.4.1结果，用最小二乘法作线性回归，得盐酸小檗碱浓度C（μg·mL-1）与吸光度A的关系：A=0.05492C-0.03143，R=0.9997

2.2 黄连总小檗碱含量

按1.4.2方法，黄连总小檗碱含量经测定为102.36mg·-1g，根据此结果计算不同提取液中小檗碱的提取率。

2.3 不同溶剂和方法下黄连小檗碱的提取率

按1.4.3方法，测定不同提取液中黄连小檗碱的含量，按1.5方法计算小檗碱提取率，结果见表1。

表1 不同方法和溶剂对黄连小檗碱的提取率Tab.1 Extraction rates of berberine in rhizoma of Coptis chinensis Franch by different ways and solvents

由表1可以看出，回流提取和乙醇分别在所考察方法及溶剂中提取效果最好，采用回流提取法，乙醇作为提取溶剂，黄连小檗碱的提取率达81%以上。

2.4 提取率重复性实验

采用1.3.2.1方法，乙醇作为提取溶剂，做3次平行实验，计算每次黄连小檗碱的提取率，考察提取效果的稳定性，实验结果见表2。

表2 提取率重复性实验结果Tab.2 Repetitivenessexperimentresultsontheextractionrate

由表2可以看出，回流提取作为提取方法，乙醇为溶剂，提取效果重复性良好。

3 结论

本文分析比较了不同方法及溶剂对黄连小檗碱的提取效果，实验结果表明：采用回流提取法，乙醇作为提取溶液，黄连小檗碱提取率和重复性良好。

［1］岑志芳,何作民.渗漉法提取黄连中小檗碱的工艺研究［J］.佛山科学技术学院学报（自然科学版），2009,27（4）:79-81.

［2］王传芬.黄连中小檗碱的提取工艺［J］.华西药学杂志，2007,22（4）:476-477.

［3］王志华,陈碧,陈新玉.黄连提取方法的试验研究［J］.实用药物与临床，2008,11（3）:191-192.

［4］黄志强,周民杰.黄连中小檗碱的超声波提取工艺［J］.化学工程师,2006,（8）:54-56.

［5］孙波,张永光.正交法优选黄连中盐酸小檗碱的提取工艺［J］.海峡药学,1999,11（2）:100-101.