肉鸭感染新城疫病毒的诊断

姜文萍

（山东省昌邑市都昌畜牧兽医管理站，昌邑 261300）

2011年2 月份潍坊某肉鸭场30日龄的肉鸭出现精神沉郁，排出白色或黄色水样稀粪、头颈扭转、角弓反张、斜颈、左右摇摆、站立不稳、瘫痪等症状。死亡率达到10%。

笔者采用血凝和血凝抑制的方法鉴定该病毒为新城疫病毒。

1 材料与方法

1.1 材料

试验用SPF鸡胚、鸭胚均购于山东省农科院家禽研究所；H7亚型、H5亚型、H9亚型标准阳性血清、ND、EDS-76血清均购自哈尔滨兽医研究所。

1%红细胞。

1.2 方法

（1）由鸡心脏或翅静脉采血，放入加有抗凝剂的离心管内（按抗凝剂∶全血为1∶2的比例），迅速混匀。在离心机中以3000 r/min离心5 min，用吸管吸去上清液和红细胞上层的白细胞薄膜，将沉淀的红细胞加生理盐水，慢慢混合均匀，再在离心机中3 000 r/min离心5 min，弃去上清液，再加生理盐水混匀，如此反复离心4～5次，最后1次离心后的红细胞，弃去上清液，即为红细胞泥。放入4℃冰箱中可保存2～3 d。使用时用1ml吸管吸取0.1ml红细胞泥，然后加入9.9ml的生理盐水，此即1%红细胞悬液。现用现配。

（2）无菌采集疑病死鸭的肺脏、气管等组织，研碎后用pH7.4的PBS按1∶4的比例制成悬液；反复冻融3次，3 000 r/min离心30 min，取上清；加入5 000 U/ml青霉素和0.5 mg/ml链霉素，4 ℃过夜，无菌检验合格后保存备用。

（3）将上述制备的病毒液以0.2ml/胚的剂量，尿囊腔接种9～11日龄SPF鸡胚；弃24h内死胚，36h后收集尿囊液备用。

（4）将收集鸡胚尿囊液与1%的红细胞进行血凝试验。

（5）将收集的鸡胚尿囊液与H7亚型、H5亚型、H9亚型标准阳性血清、ND、EDS-76血清进行血凝抑制

（6）采健康公鸡的血液作血琼脂培养基，从病鸭肝脏中分离致病菌接种于血琼脂培养基上，37 ℃温箱中培养。

2 结果

（1）将上述病料处理后所得病毒做健康公鸡红细胞凝集试验，结果显示该病毒具有血凝性。可以怀疑鸭群患新城疫、禽流感或EDS-76。

（2）收集的尿囊液能凝集鸡的红细胞，并能被ND抗血清所抑制，不能被禽流感病毒H7亚型、H5亚型、H9亚型的标准血清和EDS-76血清抑制，证明了该病毒为新城疫病毒，而不是禽流感病毒或EDS-76。即该鸭群感染了新城疫病毒。

（3）细菌检测结果，血琼脂培养基上无细菌生长，说明该鸭群还没有继发感染细菌性疾病。

综上所述，该鸭群爆发了新城疫。鸭新城疫对于鸡新城疫来说没有养殖户的足够重视，但给养殖业带来的巨大经济损失是不容忽视的。因此，兽医工作者应对这些方面进行更详细、更深入的研究，可提供有效的控制、预防、治疗此疾病的依据和方法。