猪繁殖与呼吸综合症的中草药防治
2011-02-12沈明华顾文松莫丽娟
任 凯 沈明华 顾文松 莫丽娟
(1.扬中市动物疫病预防控制中心,扬中 212200;
2.镇江天和生物技术有限公司,扬中 212214;
3.扬中市三茅镇畜牧兽医站,扬中 212200)
猪繁殖与呼吸综合症,俗称蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)引起的一种以猪流行性流产和呼吸症状为主的病毒性疾病。该病最早在1987年发现于美国。1996年,郭宝清在中国首次分离到该病毒,目前该病在我国广泛存在。2006年春季至今,该病在我国不同地区反复流行,并引起猪只大量死亡。该病既能垂直传染,又能水平传播。主要损伤巨噬细胞、降低机体免疫力、引起继发感染。仔猪发病后主要表现耳廓发绀、呼吸道症状、厌食、发热,怀孕母猪流产、死胎和木乃伊。
目前,防制该病主要以预防为主,由于疫苗免疫原性弱、PRRSV传播迅速、流行广泛和其毒株的变异能力强等特点,临床未能有效控制该病的传播和流行,对养猪业危害极大。该病尚无有效治疗措施,给PRRS的综合防制带来很大难度。中草药具有广谱抗病毒、增强免疫等作用,对疫病预防和治疗有突出作用。本文就近些年关于中草药防治猪繁殖与呼吸综合症进展介绍。
张道广等研究表明,黄芩多糖可以在细胞水平上在体外抑制病毒(PRRSV)增殖。王学兵等报道,板蓝根多糖、绿原酸在体外可以抑制PRRSV增殖,在安全浓度范围内,板蓝根多糖体外对PRRSV具有较好的阻断和抑制作用,其最小阻断浓度为2.094μg/ml,最小抑制浓度为8.375μg/ml。绿原酸对PRRSV具有显著的体外抑制作用和阻断作用,其对PRRSV的最小抑制浓度为0.391μg/ml,最小阻断浓度为0.0977μg/ml。
王爱萍等选取黄芪多糖作为抗病毒药物,利用MTT法与细胞病变(CPE)抑制试验,通过PRRSV感染Marc-145细胞、病毒在细胞中复制、药物直接和病毒作用3个环节,对药物的作用效果进行评价。黄芪多糖体外对PRRSV在细胞水平上可以抑制病病毒增殖,具有明显的阻断作用,为防控PRRS提供了理论依据。胡梅等利用Marc-145细胞体外培养系统,通过观察细胞病变效应(CPE)来评价板蓝根、黄芪等中草药活性提取物成分体外抑制PRRSV对细胞的感染作用,并通过改变加药方式(先加药物后接种病毒、先接种病毒后加药物、病毒和药物感作后同时加入),结果表明,在安全浓度范围内,板蓝根水提物体外对PRRSV具有显著的直接杀灭作用;连翘、黄芪水提物和黄芪多糖体外对PRRSV均具有明显的阻断和抑制作用,为筛选抗PRRSV中草药制剂提供了理论依据。
王学斌等将黄芪、板蓝根及2者联合使用在Marc-145的单层细胞上对PRRSV增殖的抑制作用进行了研究。结果表明,板蓝根能够显著抑制PRRSV体外增殖,对PRRSV的最小直接杀灭浓度为0.195 mg/ml,最小阻断浓度为0.097 mg/ml;黄芪对PRRSV增殖的抑制作用较弱。板蓝根、黄芪联合使用时对PRRSV的抑制作用显著增强,板蓝根对PRRSV的最小直接杀灭浓度降为0.097 mg/ml,最小阻断浓度降为0.049 mg/ml。
顾文松等采用由虎杖、女贞子、杠板归等组成复方中草药,经临床验证对PRRSV等引起的疾病有效。水浸,旋转蒸发干燥得到提取物,测定细胞安全浓度范围内中草药复方提取物对细胞抗PRRSV感染能力的影响。结果表明,在不同加药方式下(加药方式分为先加药后加病毒、先加病毒后加药、同时加药和病毒加入到细胞培养液),复方中草药提取物对PRRSV有明显的抑制作用。
蒲秀英等报道,金丝桃素具有多环节体外抗PRRSV效应;不同浓度的金丝桃素表现出不同的抗PRRSV活性,并呈现剂量依赖关系。
李丹等报道,采用细胞培养的方法测定了黄芪、板蓝根、甘草、山楂、鱼腥草、青蒿6种中草药在细胞安全浓度范围内抵抗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染细胞的作用。试验结果表明,先加药物后加病毒时,6种中草药的保护作用均显著;先加病毒后加药物时,鱼腥草的作用比较稳定,而板蓝根在3.125 mg/ml、1.562 mg/ml保护率较高;药物与病毒孵育后加药,板蓝根在3.125 mg/ml、1.562 mg/ml的作用比较明显。
韦英益等通过观察细胞病变(CPE)效应来评价不同浓度硫酸化茯苓多糖和不同作用方式对PRRSV感染Marc-145细胞的影响。结果显示硫酸化茯苓多糖体外对PRRSV感染细胞的阻断感染作用呈一定的浓度和时间依赖性。感染剂量为104TCID50PRRSV后加入不同浓度硫酸化茯苓多糖,也能有效抑制病毒在细胞上的感染与增殖,其作用最小浓度为50 mg/L;而不同浓度多糖与104TCID50病毒在体外共同孵育12 h后加入到单层细胞,多糖直接杀灭PRRSV的最小浓度为100 mg/L。
张红英、邵珊等报道,山药多糖、板蓝根多糖、黄芪多糖、白花蛇舌草多糖能够提高PRRS灭活疫苗的抗体水平,外周血中T淋巴细胞转化率、外周血中T淋巴细胞亚群中CD3+、CD8
+细胞数量,IL-2分泌水平,表明以上4种多糖可以增强PRRS灭活苗免疫应答能力,提高疫苗保护率。