川芎的有效成分鉴别与含量标准研究

2011-02-10赵文萃康雪莱

中国医药指南 2011年33期

赵文萃康雪莱

（1 吉林省长春市第二○八医院药剂科，吉林长春 130061；2 北京军区北戴河疗养院，河北北戴河 066100）

川芎是伞形科植物的干燥根茎，主要具有行气活血和祛风止痛两大功效，为活血化瘀的一种常用中药[1]。在国内外，关于该药材的化学成分研究的报道有很多，结合该药材的主要成分的药理学的相关研究结果，有专家认为该药物的主要有效成分为藁本内酯和阿魏酸[2]。为了对中药川芎的有效成分进行鉴别，并对相应的含量标准进行系统的研究，为今后对该药材进行更加准确的质量控制，是该药材的临床应用更加合理、准确，避免出现不合理用药现象，使患者的疾病能够在最短的时间内得到最有效的控制，提供一些比较有参考价值的资料，我们进行了本次研究。在研究的整个过程中，我们抽取中药川芎作为研究样品，采用TLC法对川芎中的主要成分进行鉴别，并采用HPLC法对其有效成分物质的具体含量进行测定。现将具体研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

以中药川芎为研究对象。

1.2 仪器和试剂

采用我院现有的高效液相色谱仪，甲醇纯度为色谱纯，水为纯净水，其他试剂的纯度均为分析纯。

1.3 方法

对抽取的中药川芎杨平采用TLC法对川芎中的主要成分进行鉴别，并采用HPLC法对其有效成分物质的具体含量进行测定。

1.3.1 藁本内酯的含量测定

将浓度比为70∶30的甲醇：水溶液作为流动相; 检测波长控制在240nm左右；流速应控制爱0.9mL/min左右[3]。在上述色谱条件下，精称适量藁本内酯对照品，加甲醇配成19.814μg/mL的溶液，进样量分别为2、4、6、8、10、12μL，重复2次，绘制标准曲线，计算回归方程。精吸川芎样品溶液，重复进样5次，进行精密度试验，藁本内酯峰面积积分值的相对标准偏差控制在0.4%左右[4]。不同的提取溶剂比较: 取川芎0.5g，制成粉末，共取8份，精称，精密加入甲醇、乙醇、乙酸乙酯、氯仿各25mL，进行称重处理，超声状态下提取10min左右，放凉并进行称重，滤过；取10mL的续滤液，进行减压浓缩处理，用甲醇将残留物洗出，定容至25mL。不同提取方法的比较: 取川芎0.5g制成粉末，精称，共取7份，精密加入甲醇各25mL，进行称重处理，分别以冷浸状态下放置3、6、9h和超声状态下进行5、10、20、30min提取处理后，放冷并进行称重处理，摇匀后滤过，取续滤液经过微膜，注入液相色谱仪进行测定。稳定性试验: 精吸川芎试品20μL，分别在0、2、4、6、8、10、12、24h的时候进样，依法进行测定。

1.3.2 阿魏酸含量测定

以浓度比为35∶65甲醇-1%乙酸容易作为流动相；检测波长控制在321nm左右；流速控制在0.9mL/min左右；柱温控制在25摄氏度左右[5]。精称阿魏酸对照品5.08mg，用甲醇将其定容至50mL，吸取1、3、5、7、9μL后将其分别注入到液相色谱仪中，重复进样2次，绘制标准曲线，计算回归方程。精吸川芎的样品溶液，重复进样处理5次，阿魏酸峰面积积分值的相对标准偏差为1.50 %[6]。提取溶剂的选择方法: 精称0.5g川芎制成粉末，共制10份，精密加入甲醇、乙醇、三氯甲烷、乙酸乙酯，甲醇与浓度为1 %乙酸的混合溶液各20mL，进行称重处理，在超声状态下提取10min左右，放凉后进行称重并滤过；精取10mL续滤液进行减压浓缩处理，用甲醇将残留物洗出，定容至10mL。提取方法的选择方法：精称川芎制成粉末，共制6份，精密加入甲醇各20mL，称重，在超声状态下分别处理5、10、20、30min左右和冷浸12、24h 后进行提取，放冷后进行称重并滤过，取续滤液过微孔滤膜，进行液相的相关测定。稳定性试验：精吸10μL川芎试品溶液，分别在0、2、4、6、8、10、12、24h的时候进样，依法进行相关测定。由峰面积积分值统计结果可见，川芎溶液在24h内能够保持稳定，RSD=1.07 %。