紫草的药理作用研究及其在兽医临床上的应用概况

2011-02-10严作廷王东升荔霞张世栋

中兽医学杂志 2011年5期

严作廷，王东升，荔霞，张世栋

（中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所，甘肃兰州 730050）

紫草为多年生草本植物，《中华人民共和国药典》2000年版（一部）收载的紫草（Radix Arnebiae,RadixLithospermi）为紫草科植物新疆紫草 Arnebia euchroma(Royle)Johnst.、紫草 Lithospermum erythrorhizon Sieb.et Zucc.或内蒙紫草Arnebia guttata Bunge的干燥根。其性味苦寒，归心包络、肝经，有凉血、活血、清热、解毒的作用，主要用于温热斑疹、湿热黄疸、紫癜、吐、衄、尿血、淋浊和血痢、热结便秘、烧伤、湿疹、丹毒、痈疡等病的治疗。《本草纲目》云：紫草“治斑疹、痘毒，活血凉血、利大肠”以往研究表明紫草具有抗病原微生物、抗炎及抗过敏、解热、抗肿瘤、保肝、止血、降血糖、镇静和影响免疫功能等作用【1】。近几年来紫草的现代药理作用与临床应用研究取得了新的进展。

1 药理作用

1.1 抗炎作用

王文杰等【2】乙酰紫草素为紫草抗炎有效成分之一，腹腔注射对组胺引起的大鼠皮肤毛细血管通透性增加有抑制作用。进一步研究表明，紫草素的抗炎机制可能与抑制花生四烯酸脂氧酶代谢有关。朱瑾波等【3】用小鼠皮肤血管内皮细胞株F-2和F-2C模型探讨了丹参、紫草、三七、雷公藤等中药复合制剂（肤泰宝）治疗银屑病的机理，结果发现肤泰宝可抑制血管内皮细胞游走、增殖并诱导其分化形成管腔，促进血管内皮细胞合成细胞外基质成分IV型胶原蛋白、纤维连接蛋白及基膜连接蛋白，可调节整合素表达，此外还可明显提高钙依赖粘连分子活性。提示肤泰宝能通过多种机理调控血管生成过程。舒洪权【4】发现复方紫草浸膏1.2g/kg、0.6g/kg对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀有明显抑制作用（P＜0.05）、1.2g/kg对塑料环所致大鼠肉芽增生有明显抑制作用（P＜0.05）。

1.2 抗癌作用

新疆紫草素是从新疆紫草根中提取的萘醌类化合物，可对多种肿瘤如小鼠腹水性S180肉瘤、自发性乳腺肿瘤、恶性葡萄胎等起抑制作用，蒋英丽【5】报道新疆紫草素能在体外诱导人大肠癌细胞CCL299凋亡，表现出一系列凋亡的典型特征；在0.1ug/ml-10ug/ml范围内，凋亡细胞比例与药物诱导之间呈现时间一剂量依赖性增强；新疆紫草素诱导人大肠癌细胞CCL299凋亡具有周期特异性，主要诱导G1期细胞凋亡；还能显著降低肿瘤细胞的侵袭和转移能力。祝浩杰【6】报道紫草素能明显抑制K562白血病细胞增殖，药物作用48h后，对K562细胞的IC50为2.25×10-6M；并观察了紫草素对K562细胞形态学的影响，结果发现紫草素能抑制K562白血病细胞的增殖，其抗肿瘤作用被认为与其抑制拓扑异构酶Ⅱ的活性有关，主要是抑制酶的解螺旋活性，对拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用，可能是通过影响DNA底物与酶结合所致。刘立华等【7】以移植性小鼠Lewis肺癌皮下接种动物模型观察紫星溶液（紫草萘醌色素提取物）对实验肿瘤体内生长的作用。结果发现：按每1kg体重灌胃给药0.6-15mg/d，紫星溶液可延长荷瘤鼠生存时间并抑制接种肿瘤的原位增长；皮下注射给药有效剂量为0.12-3.0mg/d；印度墨汁染色显示转移性肺病变较对照组明显轻微。林江等【8】在体外实验中研究表明新疆紫草素对C6、Tca-8113和Hela细胞的生长具有明显的抑制作用。但作用方式不同，对C6和Tca-8113主要以作用于细胞质为主，细胞以坏死为主，而对于Hela细胞则主要作用于细胞核，引起细胞的凋亡，且表现出剂量-效应关系。徐颖等【9】用MTT比色法研究了β-羟基异戊酰基紫草素对体外培养的肿瘤细胞的生长抑制作用，结果发现低浓度的β-羟基异戊酰基紫草素抑制人类白血病细胞K562和U937的生长，在较高剂量下，β-羟基异戊酰基紫草素抑制酪氨酸激酶高表达细胞系大鼠SR-3Y1和KDR/FLK-1-NIH3T3细胞以及人类表皮细胞癌细胞A431的生长。因此认为β-羟基异戊酰基紫草素对多种肿瘤细胞的生长均由抑制作用。

1.3 抗菌作用

近年来，通过体外抗菌实验研究表明，不同品种和产地的紫草抗菌作用强度不同。新疆紫草抗菌谱广，作用较强，内蒙紫草次之，紫草较差；软紫草、黄花软紫草、紫草、滇紫草、露蕊滇紫草、密花滇紫草的水和醇提液体外抑菌比较实验结果以软紫草作用最强【10】.朱汝幸等【11】从诱导形成的滇紫草愈伤组织中分离得到四种单体。其中两种单体：ββ-二甲基丙烯酰阿卡宁和乙酰阿卡宁的愈伤组织混合色素，对金黄色葡萄球菌和假单孢杆菌都有比较明显的抑制作用。尤其是乙酰阿卡宁抑制效果格外显著。而对大肠杆菌却表现不出抑制效应。湿疹喷雾剂对抑金葡菌、绿脓杆菌、大肠杆菌及白色念珠菌。鞠洪涛等【112】发现紫草对大肠杆菌庆大霉素耐药性及耐药质粒有消除作用。

1.4 抗生育作用

马保华等【13】报道紫草有抑制大鼠卵泡发育与成熟的作用，用药后血清FSH和LH浓度下降，出现明显的抗生育效果。停药45d，实验动物重现动情期，恢复正常生育力，为临床中药避孕提高了实验证据。杨柳等【14】取早孕新鲜绒毛组织进行体外培养，并加入一定剂量的紫草乙醇提取物，用放射免疫分析法测定培养液绒毛膜促性腺激素（HCG）的含量。结果发现加药组与对照组比较，HCG含量显著降低，24h、48h呈显著性差异（P＜0.01），72h呈极显著性差异（P＜0.01）；两加药组比较无显著性差异。从而说明紫草乙醇提取物能显著抑制体外培养的人绒毛组织分泌HCG的功能，破坏绒毛组织结构，甚至使其坏死。刘建华等【15】为了探讨紫草辅助米非司酮抗早孕对早孕妇女血中生殖激素的影响，将88例早孕妇女随机分成服用米非司酮、紫草、米非司酮加紫草组和空白对照组，比较用药前后血人绒膜促性腺激素 β 亚单位（β-HCG），卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）、孕酮（P）和睾酮（T）的变化。结果表明单用米非司酮或紫草均对β-HCG有一定的抑制作用，二者合用作用更加明显。单用紫草对血中FSH、LH有较明显的抑制作用，对E2、P和T无明显的影响，认为紫草对绒毛膜功能有一定的影响，与米非司酮合用影响更明显，但是否与紫草能提高药物流产有关，尚需进一步研究。刘建华【16】探索药物流产时在不同时间加用不同剂量的紫草对药物流产效果的影响。将1350例早孕妇女分成9个研究组进行观察，结果表明：在米索应用前3d和前后6d加用紫草效果较米索应用后3d加用紫草在完全流产率和出血时间两方面效果明显改善（P＜0.05）。而紫草用量50-100g时流产效果与紫草剂量无明显。戴远威等【17】在粤黄雏公鸡的日粮中添加了不同剂量（试验I组0.75%、试验Ⅱ组1.50%、试验Ⅲ组3.0%）的紫草等中草药提取物。在雏公鸡生长的第6、8周龄时，试验Ⅱ、Ⅲ组体重显著高于对照组（P＜0.05和 P＜0.01），10周龄时各组体重无显著差异（P＜0.05）。在第 8、10周龄时，各试验组鸡的睾丸重、睾丸指数和血清睾酮水平均显著（P＜0.05）或极显著（P＜0.01）地低于对照组鸡的数值。添加中草药还极显著抑制鸡冠和肉髯的发育，并显著提高了胸肌中粗蛋白含量，但对腿肌粗蛋白含量、胸腿肌中水分和粗脂肪含量无显著影响。上述结果提示本试验所用紫草等中草药提取物具有促进粤黄雏公鸡生长、抑制性腺和冠髯长育、降低血清睾酮水平及改善肉质的作用，表现很强的去势效果。

1.5 免疫功能。

金锐等【18】用抗癌药丝裂霉素C给小鼠腹腔内注射，同时口服中成药紫华荣及其主要成分紫草根、黄芪、川芎，发现紫华荣能刺激网状内皮系统，使处于抑制状态巨噬细胞恢复活性，使被抑制的淋巴细胞活跃，对丝裂霉素C所造成的免疫不全起到防御作用。董建英等【19】发现紫草多糖可促进腹腔巨噬细胞的吞噬功能，增强脾脏中T淋巴细胞的计数和T淋巴细胞的功能，促进迟发性变态反应。说明紫草多糖对机体具有明显的增强特异性的非特异性免疫的作用。刘立华等【20】发现紫草萘醌单体提取物（Lm）能提高对小鼠NK细胞毒活性的调节作用。细胞毒动力学分析的结果显示Lm增强NK活性的机理为增加了杀伤细胞的频率。

1.6 对肝功能的影响

张明远等【21】研究了不同浓度的紫草大黄合剂对四氯化碳（CCI4）致小鼠急性肝损伤的保护作用。结果表明高剂量紫草大黄合剂同联苯双酯一样能够明显降低CCI4致小鼠肝损伤血清ALT、AST 值升高（P＜0.01），减轻 CCI4对肝脏细胞的病理损伤。紫草大黄合剂对CC14致急性肝损伤具有一定的保护作用。邵鸿娥等【22】研究表明，小鼠口服紫草水煎剂3.75g/kg，7.5g/kg，能有效地防止四氯化碳引起的血清丙氨酸氨基转移酶（SALT）升高，使醋氨酚中毒的小鼠生存率达80%；大鼠口服紫草水煎剂2.86g/kg，5.72g/kg，能降低血清SALT的活力和血清胆红素含量。紫草水提取物具有抗四氯化碳所致动物肝细胞损伤的作用。

1.7 抗氧化作用

周少波等【23】给雄性大鼠喂以含15%脂肪，分别来源于牛油、豆油、紫草油、鱼油和混合油的饲料。喂养180天后将取肝脏并用冰冷的生理盐水制成5%的肝匀浆。将暴露于四氯化碳的1ml5%肝匀浆中分别加入 0.01g/L、0.05g/L和0.1g/L的紫草色素，比较加入前后由四氯化碳诱导的氧化产物TBArs的光密度值（OD），结果表明加入紫草素后，TBArs在各剂量组均有不同程度的降低，但是在含多不饱和脂肪酸组，加入高剂量的紫草素后降低的效果显著（P＜0.01），而在饱和脂肪酸组则以中等剂量的紫草素降低氧化损伤的效果较好。姜爱莉等【24】发现紫草的石油醚提取成分（LE-pet）和三氯甲烷提取成分（LE-chl）有明显的抗氧化活性，添加到猪油中后，W=0.02%时，猪油的氧化稳定性比空白样品提高了约1倍。对LE-pet和LE-chl进行薄层层析分离，得到三种化合物：β，β-二甲基丙烯酰紫草醌（I）、乙酰紫草醌（Ⅱ）和紫草醌（Ⅲ）.对它们的抗氧化活性进行测试，化合物Ⅱ和Ⅲ表现出明显的抗氧化活性，当 w（Ⅱ）=0.06%、w（Ⅲ）=0.06%时，猪油的氧化稳定性分别提高了6.04和3.94倍。化合物I、Ⅱ、Ⅲ与VE均有较强的协同作用，化合物I、Ⅱ、Ⅲ的质量分数为0.02%与VE的质量分数为0.02%共同使用时，其抗养护协同系数（SE）分别为 81.4（I）、52.7（Ⅱ）和 132.6（Ⅲ）。彭浩等【25】探讨复方紫草油对于烧伤创面早期影响的可能机制。实验组以复方紫草油外用包扎、对照组以1%SDAg外用、空白对照组创面不用任何药物，分别测定伤前皮肤、伤后2、4、8、12及24h各组创面中的NO、ET-1的含量以及伤前皮肤、伤后4和24h各组创面MDA含量，并计算各组ET-1/NO的比值。结果实验组的创面ET-1、NO、MDA含量较对照组及空白对照组均降低，实验组的ET-1/NO的比值较空白对照组和对照组为低，并且较早地趋向于伤前比值。因此，复方紫草油可能通过调节创面的ET-1、NO的含量，优化ET-1/NO的比值，从而减少创面组织细胞膜的脂质过氧化损伤程度。复方紫草油在减轻创面组织脂质过氧化损害方面较磺胺嘧啶银可能有较好的作用。

1.8 止血作用

杨荣用6种紫草的水、醇提液10g.kg灌服，连续3日，对小鼠断尾出血均有不同程度的止血作用，水提液止血作用强度依次为：软紫草＞露蕊滇紫草＞滇紫草＞密花滇紫草＞紫草＞黄花软紫草，其中前4种作用显著；醇提液作用强度依次为：黄花软紫草＞露蕊滇紫草＞软紫草＞滇紫草＞密花滇紫草＞紫草，前5种作用显著【10】

1.9 其它

李根林等【26】为了筛选对视网膜组织细胞具有药物保护作用的中药成分，以新生儿小牛视网膜细胞悬液为研究对象，SFA，苦参碱，青藤碱1紫草素为处理因素，维拉帕米和神经生长因子（NGF）为处理对照，将细胞培养24小时后MTT法检测细胞增殖活性。结果发现SFA对视网膜组织细胞有明显的促增殖作用，且呈剂量依赖关系；苦参碱轻度促进视网膜组织细胞增殖，青藤碱，维拉帕米和NGF轻度抑制视网组织细胞增殖；而紫草素则低浓度时抑制，高浓度时促进视网膜组织细胞增殖。舒洪权观察复方紫草浸膏能明显缩短小鼠断尾出血时间。

1.10 抗免疫缺陷作用

从紫草A.euchroma的根中分离得到的咖啡酸四聚单钠和单钾盐具有明显的抗HIV活性，从而证明钠、钾盐对增强抗HIV活性的重要性。另外报道，紫草L.eryrorhizon根的热水提取物的抗 HIV 活性为 IC100=16ug/ml。许杭民等【27】应用3H-TdR渗入试验研究了报道“艾滋Ⅱ号”（由黄芪、紫草、甘草等制成）的作用机理。结果表明艾滋Ⅱ号在适当浓度下，能使NK细胞对YAC-1肿瘤靶细胞的杀伤率从26.4%提高至62.7%（P＜0.01，体内）或从 27.3%提高至 66.4%（P＜0.01，体外）；MTT比色分析法结果表明，该复方对ConA激活的小鼠胸腺前T细胞和脾脏混合淋巴细胞的增殖较单独使用ConA提高121%和137%（P＜0.01）。

2 在兽医临床上的应用

张伟【28】消乳散由全瓜蒌 100g，紫花地丁、赤芍、牡丹皮、金银花、连翘、紫草、大青叶各50g组成，共为末，开水冲调，候温灌服，每天1剂，连服6～8剂。共治疗10例，痊愈7例，好转2例，无效1 例。用紫红散【29】（紫草、红藤、生地、玄参、山药、山楂、漏芦、木通、蒲公英各15-30g）治疗乳山羊乳房肿痛、乳痈未成10多例，全部治愈。王福田等【30】鸡瘟宁（由巴豆、龙胆草、良姜、苍术、金银花、黄芪、紫草、板蓝根等20多味中药研制成）主要用于防止鸡瘟、鸡白痢、禽霍乱、鸡痘、球虫病等。从1982～1994年用本药共防治病鸡1244663只，治愈率达95%以上。治疗鸡白痢疗效达100%。预防鸡7832只、鸭1496只，经半年至1年的观察均未见发病。用葛根45g、紫草21g、甘草24g水煎治疗猪痘，效果良好【29】。治疗猪痘初起用紫草30g煎水外敷擦洗或者紫草、茜草、黄芩、黄连、黄柏、甘草水煎，喂服【29】。赵福贵用芦根紫草双花汤（芦根30g、紫草、连翘、甘草、双花各20g、蒲公英5g）治疗猪痘，治愈率达100%。用紫草、生地、甘草研末为丸喂服治疗鸡痘【31】。黄连紫草膏（黄连 34g、紫草 100g、黄柏 68g、归尾 68g、生地68g、麻油1000ml、黄蜡200g）治疗马骡各种外科化脓创近千例，疗效显著【29】。用加味紫草膏（紫草、金银花、黄柏、芙蓉叶、乌蔹、白蜡、冰片共为细末，用香油熬黄，趁热过滤后加入白蜡、冰片调匀）治疗牛顽固性瘘管、化脓疮25例全部治愈。用紫草15g、大枫子、蛇床子、密陀僧、巴豆、黄柏各60g、石灰、硫磺各 1000g、水 2500ml。先将石灰、硫磺分别研细末，其余各药用布包好，加水煎熬，加石灰后加硫磺，文火熬至深黄色，水分蒸发一半，取出药包，让浓液冷却沉淀，次日取上层清液，装瓶备用。先将患部用肥皂水洗净，去痂，擦干，然后患处涂上药液，共治疗疥螨483例（牛150例、兔 45例、羊 8例、马 50例）【29】。肖永坤用紫草膏（紫草、双花、白芷各30g、冰片3g、香油500g、蜡烛25g）治疗家畜外伤17例，取得了较好效果【32】。刘咸春等用生肌膏（白芷 6g，甘草 15g，白蜡、当归各24g，忍冬藤、血竭、轻粉各5g，紫草3g，麻油200g组成），治疗家兔化脓创，用双氧水清创后，将生肌膏均匀地涂布于纱布上贴于创面上，用药8天后显效，15天后创面完全愈合，疗效达 100%【33】。

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