5-HTTVNTR与自杀未遂精神病核心家系的相关性研究*

甘 窈,高新学,艾 明,陈建梅,黎雪梅,况 利△

(1.重庆医科大学附属第一医院心理卫生中心 400016;2.山东省济宁市精神病防治院精神六科 272051）

自杀是一种因社会心理冲突而产生的蓄意终止自己生命,有目的、有计划的自我毁灭行为。自杀未遂定义为主动结束自己生命,未造成死亡的结局,包括决心自杀但未死亡和自杀意图不强而蓄意自伤[1]。以往研究表明,5-羟色胺转运体(5-hyd roxytryp tamine transporter,5-H TT)基因可能影响自杀未遂者体内的5-羟色胺(5-hyd roxytryp tam ine,5-H T)的传递[2]。目前,罹患精神病已被证明是自杀行为的危险因素[3]。关于精神病自杀未遂核心家系的5-HTT基因研究在国内尚少,因此,本课题对5-H TT基因第二内含子多态性(serotonin transporter gene 2 VNTR po lymorphism,5-HTTVNTR)与有精神病的自杀未遂核心家系的相关性进行研究。

1 资料与方法

1.1 一般资料 研究对象来自2007年1月至2008年3月重庆医科大学附属第一医院心理卫生中心住院部、急诊科就诊的汉族自杀未遂者及其生物学父母。自杀未遂者纳入标准:(1)中国汉族人群;(2)年龄不小于15岁;(3)患有精神疾病(包括精神分裂症、情感性精神病以及其他精神疾病),并采用DSMIV-TR轴I障碍用临床定式检查(structured clinical interview for DSM-IV-TR axis I disorders-patient,SCID-I/P)[4]进行评估及诊断。排除标准:排除蓄意自伤类自杀者。本研究共收集86个核心家系共258人(其中有精神病自杀未遂的核心家系57个)。将所有核心家系成员分成两组:患者组86例,其中男38例,女48例;年龄16～45岁,平均(32.6±11.8)岁;父母组172例,父、母各 86例。

1.2 测评工具 测评工具为自编家系调查表、分子遗传学研究家庭问卷(family interview for genetic studies,FIGS)以及肖水源自杀意念调查表[5]。

1.3 研究方法

1.3.1 基因组DNA的制备 采集肘静脉血5 m L,采用常规酚-氯仿法抽提全血标本基因组DNA。

1.3.2 引物 5-H TTVN TR多态性位点引物参考文献[6]。上游引物:5'-GTC GTT GCC GCT CTG AAT GC-3',下游引物 :5'-GAG GGA CTG AGC TGG ACA ACC AC-3',由上海生物工程技术有限公司合成。聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增试剂盒亦由上海生物工程技术有限公司提供。

1.3.3 PCR反应 PCR反应体系为PCR反应液共50μL,含50～100 ng基因组 DNA、10 pmoL引物、1U TaTaRa Ex Taq酶、10×Ex Taq缓冲液(不含 Mg2+)、2.5 mmol/L dNTPs及1.5 mmol/L MgCl2,用双蒸水补充至50μL。PCR反应条件为95℃预变性4 m in,94℃变性60 s,61℃退火60 s,72℃延伸1 m in,再72℃延伸10 m in,共35个循环。将 PCR产物置于2%琼脂糖凝胶中电泳分离,以溴乙锭染色法检视各区带,与相对分子质量标准物比较各片段的大小。

1.4 统计学处理 一般资料应用SPSS13.0统计软件进行分析。遗传学资料采用Spielman RS编写的传递不平衡检验(transmission disequilibrium test,TDT)原理,运用 Genehunter 2.1软件进行分析。用Hardy-W einberg平衡检验分析基因型频率和基因频率。计数资料用χ2检验,以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 H ardy-Weinberg平衡的吻合度检验 5-H TTVNTR多态性位点:父母组与患者组基因型频率和等位基因频率的总体分布比较差异均无统计学意义(χ2=0.939,P=0.33;χ2=4.892,P=0.087),见表 1。

表1 患者组及父母组5-H TTVNTR基因型及等位基因频率的分布[n(%)]

2.2 自杀未遂精神病患者5-H TT基因的2个多态性位点TDT分析 在57个有精神病自杀未遂核心家系中有71个杂合子父母纳入5-H TTVNTR多态性位点的分析,其中,有29个10等位基因和42个12等位基因传给了患病子女(χ2=2.38,P＞0.05)。提示5-H TTVNTR多态性位点与有精神病自杀未遂者不存在连锁不平衡。

表2 自杀未遂精神病患者5-HTTVNTR各位点的 TDT分析(个)

3 讨 论

5-HTT基因第二内含子区存在17 bp可变数目串联重复多态性(即5-H TTVNTR)。目前,5-H TTVN TR与精神病及自杀行为的家族遗传研究甚少,且关联性尚不确切。本研究通过PCR技术在5-H TTVN TR位点扩增出两个等位基因10 repeat(简称10)与12 repeat(简称12)组成3种基因型10/10、10/12及12/12,267 bp片段为10 repeat,301 bp为12 repeat。研究表明5-H TTVNTR位点与自杀未遂精神病患者间不存在连锁不平衡。

国内外对精神病患者的研究表明5-H TTVNTR基因与精神病自杀行为无关[7-12]。Yen等[13]比较了中国台湾160例抑郁症患者及169名正常人,结果也提示5-H TTVNTR与自杀行为无明显关联。Kohlrausch等[14]研究药物对精神分裂症患者5-H TTVNTR的影响时,也未得到相关性的结果。上述研究与本研究结果一致。尽管5-H TT与某些精神病间存在关联,精神病本身是多基因的遗传疾病,但其中5-H TTVNTR可能与精神疾病并没有关系。此外,有研究报道显示自杀性家族史是自杀行为的明显特征[15]。有研究对有或无自杀行为的精神障碍患者进行比较,发现其中自杀未遂患者的亲属中有自杀行为现象比较普遍,自杀行为的风险与遗传因素及家族倾向有关[16]。高树贵等[17]对5-H TTVN TR基因型与情感性精神障碍的家系研究也说明二者之间不存在连锁不平衡。因此,目前为数不多的家系研究提示,5-H TTVN TR与自杀行为的家族遗传性不一定相关。

由于本研究以家族作为对象,样本收集相对困难,且主要研究其传递是否存在不平衡,故在自杀未遂精神病患者中没有细分患有何种精神疾病。因此,5-H TTVNTR与有精神病的自杀未遂核心家系的相关性还有待进一步更深入细致的研究与分析。

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