金辛镇痛液对急性血瘀证大鼠PGF1α及TXB2的影响*

张红星 黄国付 祁 青 易艳东 林世和周 利邹 燃安 雪唐 雷

1湖北省武汉市中西医结合医院（湖北武汉430022）

2湖北中医药大学（湖北武汉430065）

金辛镇痛液是武汉市中西医结合医院中药外用制剂，主要成分为洋金花、细辛、乙醇等。其对动物急慢性炎症、疼痛模型有明显的抗炎、镇痛作用［1］，临床应用于痹证的关节、肌肉、筋骨疼痛等疗效确切［2］。本研究在前期基础上通过建立急性血瘀证模型，观察其对大鼠血液流变学指标和血浆前列腺素F1α（PGF1α）、血栓素 B2（TXB2）的影响。

1 材料与方法

1.1 动物 SPF级SD大鼠（雌雄各半，体质量180～220g），由武汉大学动物实验中心提供，许可证号：SCXK（鄂）2008-0004，合格证号为00008546。

1.2 药物与试剂 金辛镇痛液由武汉市中西医结合医院制剂中心提供，批号：051106；盐酸肾上腺素注射液（武汉远大制药集团有限公司，批号：H42021700）；麝香舒活精（黄石飞云制药有限公司，批号：050701）；肝素（万邦医药，批号：H32020612）；PGF1α和TXB2试剂盒均由武汉华瑞康生物试剂有限公司提供。

1.3 分组及给药 取大鼠60只，采用随机数字表法分为正常对照组，模型对照组，麝香舒活精组，金辛镇痛液低剂量组（100%金辛镇痛液）、中剂量组（200%金辛镇痛液）、高剂量组（400%金辛镇痛液），每组10只。各组大鼠在乙醚浅麻下常规方法背部脱毛，面积约8cm2。第2日于脱毛区涂以相应药物，每只大鼠用药0.5mL/100g，每日2次，连续给药5d。

1.4 造模及采血 于第6日第1次给药后1h，除正常对照组外，其余各组均于皮下注射盐酸肾上腺素0.08mL/100g，共2次，两次间隔4h。在第1次注射盐酸肾上腺素后2h将大鼠浸入冰水中游泳5min，以造成急性血瘀证模型［3］。造模后将所有大鼠禁食12h，次日晨用10%水合氯醛0.03mL/100g腹腔注射麻醉，腹主动脉采血。

1.5 观察指标 （1）血液流变学指标测定：取血5mL肝素抗凝，进行全血黏度切变率（1.00，5.00，30.00，200.00）、血浆黏度、红细胞聚集指数、全血高切相对指数、全血低切相对指数的检测。（2）血浆 PGF1α 和 TXB2测定：取血 2mL，3000r/min，离心 10min分离血浆，采用酶联免疫法（ELISA）测定血浆PGF1α和 TXB2含量。全部样品测定均由专人负责，并严格按照试剂盒说明书所提供的方法操作。

1.6 统计学处理 应用SPSS17.0软件，计量资料以 （x±s）表示，组间差异比较采用单因素方差分析法。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 金辛镇痛液对血瘀证模型大鼠血液流变学的影响 见表1。模型组与正常组比较，血液流变学指标差异有统计学意义 （P＜0.01），结合生物表征，血瘀证模型成立。金辛镇痛液3个剂量组和麝香舒活精组均能不同程度改善血液流变学指标，且与模型组比较，差异有统计学意义（P＜0.05或0.01）；金辛镇痛液组与麝香舒活精组相比无明显差异；提示金辛镇痛液有改善急性血瘀证大鼠血液流变学的作用，降低血液浓、黏、聚、凝状态。

表1 各组大鼠血液流变学指标比较

表1 各组大鼠血液流变学指标比较

与正常组比较，*P＜0.01；与模型组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01。 下同。

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2.2 金辛镇痛液对血瘀证模型大鼠血浆PGF1α和TXB2的影响 见表2。与正常组比较，模型组大鼠血浆PGF1α的含量明显减少，而TXB2含量明显增加，差异均有统计学意义（P＜0.01）。金辛镇痛液3个剂量组和麝香舒活精组均能提高PGF1α的含量，降低TXB2的含量，TXB2/PGF1α值明显改善，与模型对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05或0.01）。提示金辛镇痛液能调节PGF1α/TXB2平衡，改善血瘀状态。金辛镇痛液高剂量组TXB2水平和麝香舒活精组相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。提示金辛镇痛液组与麝香舒活精组效果大致相等。

表2 各组血浆PGF1α和TXB2含量比较（）

表2 各组血浆PGF1α和TXB2含量比较（）

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3 讨 论

中医学认为寒凝等病因所致血行不畅，停遏于经脉之内及瘀积于脏腑组织器官均称为瘀血。故根据寒凝则血瘀理论，本研究以冰水浴刺激结合皮下注射肾上腺素造成血瘀证模型。肾上腺素为α、β受体兴奋剂，具有收缩外周血管和增加心脏收缩力的作用，与冰水浴刺激结合，可使外周血管强烈收缩，心脏后负荷增加，心肌耗氧代谢增加，心功能逐渐下降，从而使血液运行障碍，血液黏度增加，形成瘀血的病理改变［3］，从而建立急性血瘀证模型。实验研究表明血瘀证与血液循环障碍和内皮功能、血液浓黏聚凝滞状态、血小板活化和黏附聚集、组织细胞代谢异常、免疫功能障碍等多种生理病理改变有很大关联，血液流变学指标异常为诊断血瘀证的重要客观指标［4］。同时有研究表明，血栓素 A2（TXA2）、前列腺素（PGI2）代谢平衡在血瘀证发病中起着重要作用［5］。TXA2为血小板激活剂，是目前已知的最强的缩血管物质和血小板聚集剂之一，能促进血栓的形成，并诱导白细胞趋化、聚集，参与炎症反应及组织损伤；PGI2是血小板功能抑制物，是最强的内源性血小板聚集抑制剂和血管扩张剂，对血小板聚集引起的血管痉挛有保护作用。正常状态下，TXA2、PGI2的产生和释放处于动态平衡，以防止血小板在血管壁上黏附和血小板的自发性聚集，保持血管活力，维持血小板及其他细胞机能，防止血栓形成［6］。当内皮细胞损伤后，血小板被激活，TXA2产生增多，其通过抑制腺苷酸环化酶使血小板和血管壁平滑肌内环磷腺苷（cAMP）减少，或者作为Ca2+载体直接促进Ca2+内流和致密管系统的Ca2+释放，从而促进血小板聚积和局部血管收缩，加重内皮损伤。邻近的正常血管内皮细胞能利用血小板释放的前列腺素环内过氧化物来增加PGI2合成。PGI2通过兴奋腺苷酸环化酶，增加cAMP浓度，起到扩张血管、限制血小板聚积和保护受损内皮的作用［7］。若TXA2/PGI2调节发生紊乱，能明显影响凝血与抗凝血的平衡，导致脉络瘀阻。血栓素A2（TXA2）、前列腺素（PGI2）均系前列腺素代谢衍生物，二者在体内极为不稳定，TXA2于30s、PGI2于3min后分别降解为无活性的 TXB2及 6-keto-PGF1α，因此血浆TXA2和PGI2的含量水平变化可通过检测TXB2和6-keto-PGF1α的含量来反映。

在本研究中，金辛镇痛液低中高剂量组、麝香舒活精组均能不同程度地降低大鼠血液流变学指标，使大鼠血浆TXB2含量减少和PGF1α含量明显增多，TXB2/PGF1α比值相应增高。这些指标的变化提示金辛镇痛液对血瘀证模型大鼠有着明显的活血化瘀作用，抑制TXB2释放，促进PGF1α分泌，纠正 TXB2/PGF1α平衡，从而抑制了血小板的聚集和炎症介质活性，可能是其发挥抗血栓形成作用机制之一，但是其发挥作用的物质基础和深层机理有待于进一步研究。

［1］ 张红星，易艳东，刘倩，等.金辛镇痛喷雾剂抗炎镇痛作用的实验研究［J］.湖北中医杂志，2006，28（7）：10-11.

［2］ 张红星，邹燃，黄国付，等.中药离子渗透治疗腰椎间盘突出症疗效观察［J］.湖北中医杂志，2009，31（1）：13-14.

［3］ 苗明三，朱飞鹏.常用医药研究动物模型［M］.北京：人民卫生出版社，2007：438-439.

［4］ 中国中西医结合研究会.血瘀证的诊断标准［J］.中国中西医结合杂志，1987，7（3）：129.

［5］ 郑健，吴群励，郑建洵，等.肾康灵对阿霉素肾病大鼠血栓素B2和6-酮-前列腺素 F1α 的影响［J］.中医杂志，2004，45（8）：619-622.

［6］ 陈志强，范焕芳，郭登洲，等.化瘀通络中药对MsPGN大鼠血栓素B2及6-酮前列腺素F1α表达的影响［J］.中国中医基础医学杂志，2009，15（3）：197-199.

［7］ 王昕，姚凝，刘健鸿，等.舒经玫瑰胶囊对小鼠原发性痛经血浆血栓素B2、6-酮-前列腺素 F1α 的影响［J］.中国中医药信息杂志，2008，15（6）：41-42.