中药复方对慢性心力衰竭大鼠心肌组织AngⅡ、BNP的影响*

宫丽鸿 张 艳△ 高 峰

1辽宁中医药大学附属医院（辽宁沈阳110032）

2辽宁中医药大学（辽宁沈阳110032）

△通信作者

慢性心力衰竭（CHF）是临床常见病，多发病及危重病症，常是所有不同病因所致器质心脏病的主要并发症及终末表现，其发病率日益增高。CHF主要是RAS系统激活，血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）等血管活性物质增高所致，脑钠素（BNP）激活导致心室重塑。本实验观察中药益气活血复方对CHF大鼠心肌组织AngⅡ、BNP的影响的干预机制。

1 材料与方法

1．1 实验动物 普通级健康SD大鼠60只，体质量200～230g，12周龄，雄性，由辽宁中医药大学动物实验中心提供。在通风、湿度、湿度适宜的动物室内常规饲养，自由饮水。

1．2 实验药物 益气活血复方：由黄芪、人参、红花、丹参、益母草、三七粉、葶苈子等组成（本溪第三制药厂）。赖诺普利片：上海信谊万象药业股份提供，每片10mg，国药准字H10960265。

1．3 模型制备 常规喂养大鼠1周，第2周饲料减1／2量，以使其饥饿，同时游泳至疲乏，每日1次，共4周。经多普勒超声心动图检测左室射血分数（EF），计算 CI值，EF≤60%，CI≤180mL/（min·kg）者为左心衰；同时大鼠出现体质量减轻，精神萎靡，毛色无光泽。出现以上症状视为造模成功。

1．4 分组与给药 将成模大鼠随机分为中药组、西药组、模型组，每组15只。另取15只未造模大鼠作为正常组。各用药组按人-鼠剂量换算（给药剂量=人给药剂量×0．018/体质量），中药组予益气活血方 9．2g/（kg·d）灌胃，西药组予赖诺普利 1．5mg/（kg·d）灌胃，正常组和模型组大鼠灌胃等容积蒸馏水。每日1次，连续给药6周。

1．5 标本采集 在对大鼠灌胃药物（蒸馏水）6周后，禁食不禁水12h，麻醉处死全部大鼠。腹主动脉取血4mL，室温下血液自然凝固20min，离心20min（3000r/min）。仔细收集上清液，低温保存。取其大鼠心脏心肌组织，每组取8只，每只大鼠心脏按标准处理，于液氮中冷冻后在-80℃条件下保存待测，蛋白印迹分析法检测。

1．6 检测方法 BNP测定：按BNP试剂盒说明书步骤操作，试剂盒购自北京博士德公司。心肌组织AngⅡ表达检测：按AngⅡ试剂盒说明书步骤操作，试剂盒购自大连TaKaRa公司；引物合成，北京华大基因公司。

1．7 统计学处理 应用SPSS 13．0统计软件。 数据以（x±s）表示。组间比较采用完全随机分组多组均数比较的单因素方差分析，若方差不齐采用Dunnett检验。P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结 果

2．1 益气活血复方对CHF大鼠血清BNP水平的影响 见表1。与正常组相比，模型组血清BNP水平显著升高（P＜0．05）；同模型组比较，中药组与西药组血清BNP水平降低（P＜0．05）；中药组与西药组比较，无显著差异（P＞0．05）。

表1 各组大鼠血清BNP水平比较 （μg/L，±s）

表1 各组大鼠血清BNP水平比较 （μg/L，±s）

与模型组比较，*P＜0．05，**P＜0.01。 下同。

组别 n BNP正常组 8 14．49±2．18*模型组 8 39．16±5．83*西药组 8 23．42±2．21*中药组 8 24．42±1．98*

2．2 益气活血复方对CHF大鼠心肌组织AngⅡ表达的影响见表2。与模型组比较，西药组与中药组AngⅡmRNA、AngⅡ蛋白表达有显著差异（P＜0．01）；中药组AngⅡ蛋白表达显著高于西药组（P＜0．05）。

表 2 各组大鼠心肌组织AngⅡ表达比较 （±s）

表 2 各组大鼠心肌组织AngⅡ表达比较 （±s）

与西药组比较，△P＜0．05。

组别 n正常组 8模型组 8西药组 8中药组 8 AngⅡmRNA 1.00±0.00*1.418±0.545 1.206±0.498**1.227±0.788**AngⅡ蛋白表达51.938±6.919*180.232±3.047 83.197±4.919**90.387±6.606**△

3 讨 论

本实验验证了益气活血复方治疗CHF的有效性，其治疗效果与西药疗效相当。通过临床大量试验也发现益气活血复方治疗CHF有效可达85%以上［1］。根据中医辨证论治的认识，CHF的病机关键是心（气）阳虚，根据“虚则补之”的原则，临床采用益气温阳的手段恢复阳气，调整脏腑功能，平衡气血阴阳。我们根据临床经验发现CHF患者多属心气虚，血脉不通，心血瘀阻，水湿内停所致。而血瘀与水饮又互相影响，如仲景所云“血不利则为水”，如使得水湿得化，瘀血得消，则阳气自复，从而达治疗之功。由此可见益气活血是CHF，特别是气虚血瘀证的治疗大法，且贯穿于CHF各证型的治疗大法。

BNP是利钠肽类的一种肽类激素，在左右心房的含量最多。BNP的合成分泌受心室容量负荷和室壁张力的影响，故血BNP含量可直接反映心室功能。BNP的前体前脑钠肽原 （prep roBNP）由心室细胞分泌，脱去N端28个氨基酸组成的信号肽，成为由108个氨基酸组成的脑钠肽原，在分泌过程或进入血液过程中，由丝氨酸蛋白酶分解成为具有生物活性的含有32个氨基酸的BNP和含有76个氨基酸的无活性的氨基末端脑钠肽前体（NT-proBNP）［2］。 外周血中 BNP 和 NT-proBNP 二者的浓度相等，但他们的半衰期却有较大差别，BNP为20min，NT-proBNP为120min，故有些学者认为，通过测定NT-proBNP在血浆中的水平，更能反映BNP水平的变化［3］。脑钠肽对CHF的影响其主要作用包括：对肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAAS）的拮抗作用，对交感神经系统的拮抗作用，舒张冠脉作用。 此外，BNP还具有抑制心肌纤维化，抑制血管平滑肌增生，抑制系膜细胞及纤维母细胞增生，在心室重构中作为一种局部调节因子起作用。另外，还可以抑制纤溶酶原激活物抑制因子-1（PAI-1）的表达，防止血栓形成［4］。

AngⅡ是造成心肌肥厚、心室重构，诱导心肌细胞凋亡，最终导致CHF重要且相对独立、特异的指标。特别是对心肌细胞直接注射AngⅡ，而AngⅡ在不依赖血流动力学改变的情况下对心肌细胞增生及肥厚有明显作用，严重时可造成心肌纤维化、心肌重构，导致心肌收缩与舒张功能受损，最终造成CHF的发生［5］。

通过本实验证明，益气活血复方对心肌组织中AngⅡ、BNP相对模型组有抑制其表达的作用，与西药组相比疗效相当；充分证明益气活血复方可抑制或逆转心室重构的过程，从而达到治疗CHF的目的。

［1］ 张艳，杨硕，庞敏，等.益气活血复方对慢性心衰大鼠心肌组织AngⅡ及 PKC 的影响［J］.中华中医药杂志，2008，23（11）：999-1001.

［2］ 卢飞舟，赵殿有．充血性心力衰竭患者血浆脑钠肽素浓度与心功能的关系［J］．心脏杂志，2004，16（3）：266．

［3］ Szypryt E P， Twining P， Mulholland RC， et al．The prevalence of disc degenerationassociatedwithneuralarchdefectsofthelumbarspine assessed bymagneticresonanceimaging［J］.Spine，1989 ，14（11）：977.

［4］ 陶以嘉，李春庆，金伟东，等.血浆B型利钠肽（BNP）在心功能不全中的诊断和治疗效果中的应用 ［J］.中国微循环，2005，9（6）：433-435.

［5］ KannelWB，Ho K，Thorn T．Changing epidemiological featuresof cardiac failure［J］．BrHeart J，1994，72（5）：3-9.