吗啡急性成瘾猫症状学与神经电生理变化

郭 韬 郑 杰 康进生 董长征 武 江 岳向勇 李文玲 赵文清 梁 晴

(河北省人民医院功能神经外科，河北 石家庄 050051)

吗啡急性成瘾猫症状学与神经电生理变化

郭 韬 郑 杰 康进生 董长征 武 江 岳向勇 李文玲 赵文清 梁 晴1

(河北省人民医院功能神经外科，河北 石家庄 050051)

目的通过建立急性吗啡猫成瘾模型，观察成瘾猫症状学和神经电生理变化，探讨成瘾症状与神经电生理变化间的关系。方法12只成年雄性家猫随机分成实验组9只和对照组3只，连续5 d，实验组家猫于每日8点、12点、16点行背部皮下注射吗啡，对照组注射等体积生理盐水。第6天，实验组家猫注射纳洛酮诱发戒断症状，证明造模成功后两组于1、3、7 w行皮层和深部脑电图监测。结果实验组家猫均出现吗啡戒断症状，脑电图呈现生理波减少，慢波增多并出现棘波。结论急性吗啡猫成瘾模型的症状学与脑电图改变对揭示吗啡成瘾机制具有一定意义。

吗啡;成瘾;模型;症状学;脑电图

吗啡成瘾已经成为一个全球性的医学和社会的焦点问题。本研究通过建立急性吗啡猫成瘾模型，观察吗啡成瘾猫症状学特点，分析吗啡对脑组织毒性损害造成的神经电生理变化，探讨神经电生理变化与成瘾症状的关系，为临床合理治疗药物成瘾提供神经电生理依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物 雄性成年家猫12只，其中实验组9只，对照组3只。由河北省人民医院临研中心提供，猫龄3～4年，体重2 ～3 kg。

1.2 实验药品 盐酸吗啡注射液，沈阳第一制药厂生产。麻醉药品和精神药品生产定点批件号:TD2006-0028，国药准字:H21022436。盐酸纳洛酮注射液，康哲(湖南)制药有限公司生产。产品批号20070113，批准文号:国药准字H20033435。

1.3 猫吗啡急性成瘾动物模型〔1〕(1)实验组猫按逐日递增原则，分别于每日8点、12点、16点行背部皮下注射盐酸吗啡。连续5 d给药。对照组猫对应时间注射生理盐水。(2)给药剂量:第1天吗啡单次用量2.5 mg/kg，第2天5 mg/kg，第3天7.5 mg/kg，第4天10 mg/kg，第5天12.5 mg/kg，均严格按时、按次注射。(3)纳洛酮诱发实验:第6天8:00对照组给予相同程序的等体积生理盐水皮下注射。实验组以0.5 mg/kg纳洛酮诱发戒断症状。评定猫的戒断症状，证明吗啡急性成瘾猫模型制造成功。

1.4 脑电图监测 两组实验猫分别于造模成功后1 w、3 w、7 w及取材时用MS4000U电生理监测仪进行皮层、深部脑电图监测。监测部位包括额、颞、顶、枕叶皮层、海马、杏仁核和伏隔核区组织。

1.5 症状学评分 依照Maldonado等〔2〕的戒断症状评分标准，评定戒断症状。包括扭体、湿狗样抖、跳跃、站立、齿颤、清理皮毛、上睑下垂。其中每2 min评定1次上睑下垂。观察时间为腹腔注射纳洛酮后，共20 min。

1.6 统计学分析 实验数据采用SPSS 9.0统计软件包进行分析，实验组与对照组比较，采用多个样本均数比较的F检验和两两比较的q检验，数据以±s表示。

2 结果

2.1 吗啡猫成瘾模型症状学特点 本组实验动物无死亡。实验组猫随吗啡剂量加大而出现典型的吗啡依赖症状，表现为给药后逐渐出现呆滞、活动减少、嗜睡，四肢及躯体肌紧张，两眼眼神迷离。上述表现持续约30 min后开始出现兴奋状态，主要表现为活动增多，狂叫，乱跳，快速转圈，舔毛，咬前爪及磕铁笼等。戒断症状评分统计见表1。实验组戒断评分值明显高于对照组(P＜0.05)，吗啡成瘾猫出现戒断症状，而对照组没有出现戒断症状，说明戒断症状是吗啡成瘾猫的特征症状学表现。

表1 对照组与实验组戒断症状评分的比较

2.2 脑电图变化 正常对照组皮层脑电图，基本节律以中低波幅α波为主，少量β波，枕区尤为明显。波形规整，左右对称，调幅调节好(见图1)。吗啡成瘾猫皮层脑电图特征性波形表现为:额区α波数量逐渐减少，呈短节律，活动或散在出现。伴α波调幅减弱，α波慢化。低、中波幅θ波、δ波逐渐增多。α节律出现高幅α梭形波节律，其最大峰峰值与平均峰峰值间相对比＞3.00。同时，棘波、棘慢波频繁出现，有时甚至棘波连续发放，出现棘节律(图2)。顶区可见少量棘波及棘慢波发放(图3);颞区病理波较额区相比，波幅较低，发放频率亦逊于额区，但慢波明显增多，以低、中波幅θ波为主，有时连续发放(图4);枕区正常生理性α波数量逐渐减少，波幅减低，直至解体、难以辨认，伴α波调幅调节变差，α波慢化，低、中波幅θ波、δ波逐渐增多(图5);而海马、杏仁核区表现为正常背景生理波波幅减低，频率加快，波形不整，调幅调节变差，可见少量低幅尖波出现(图6)。伏隔核区有时可见高幅及超高幅棘波(图7)。

图1 正常对照组皮层脑电图

3 讨论

据文献报道〔3〕吗啡在人体的致欣快作用主要表现在注射吗啡后瞬间的快感，快感后的松弛效应延续0.5～2 h，以及其后2～4 h显得精神抖擞、自我感觉良好的状态。随着注射剂量的增大，最终导致成瘾(依赖)，表现为精神依赖和躯体依赖，精神依赖主要表现为强烈的药物渴求和持续的觅药行为，躯体依赖主要表现为耐受性和戒断反应，戒断反应是吗啡成瘾最具特征和最重要的诊断依据。

本实验发现，猫用递增法注射吗啡后出现戒断综合征表现:扭体、湿狗样抖、上睑下垂、齿颤、异常姿势等行为动作变化和稀便、流涎、流泪等自主神经系统症状。是阿片类物质成瘾的特征性症状，其产生机制目前普遍认为是躯体神经生理对阿片类的反适应作用。本实验中猫戒断症状的表现基本与吸毒者平常使用毒品后的表现相似，这说明用动物实验获得的发现可在某种程度上去解释吗啡对人体的影响和毒性损害。

吗啡成瘾对脑组织可造成慢性持续性损害，病变广泛，病理类型复杂多样。是一种慢性脑病。临床上出现戒断症状表现的神经精神病症候群也是复杂多样，多数学者认为，其病理机制应是多重机制而非单一病机。目前比较公认与下列机制有关〔4，5〕:①吗啡作用于内源性阿片肽系统及其他神经递质系统，引起这些系统受体前、受体、受体后多环节结构及功能变化，造成一系列神经功能紊乱，从而表现出多样的病理类型及临床症候群。②自由基作用:吗啡成瘾造成体内自由基增多，引发链式脂质过氧化反应，通过损伤细胞膜、抑制蛋白质功能、破坏核酸及染色体等机制，引发包括脑细胞在内的躯体细胞损伤死亡。③吗啡成瘾造成躯体其他重要器官、系统病变，如心、肝、肾、肺和血管损害。④非提纯的吗啡制品中有混杂物，其中的有害物质可通过直接毒性作用，或发生炎性反应，或导致过敏反应而致脑细胞损害。

本实验中当猫脑功能正常时，枕区α波频率多在8～13 Hz，调幅调节良好。枕区α波的数量、频率及调幅调节可反映脑功能的情况〔6〕。而吗啡成瘾猫枕区α波数量减少，调幅调节变差，形态异常，直至难以辨认。吗啡成瘾猫各脑区病理波数量明显增加，证实吗啡对中枢神经系统有兴奋和抑制的双相作用。实验过程中吗啡成瘾猫出现发作性强直阵挛状态，皮层脑电显示的棘波及棘慢波等病理波为吗啡成瘾猫癫痫发作提供依据。吗啡还可改变中枢和外周钙离子通道的数目和开放状态，导致神经细胞膜中的钙通道增多，细胞内钙离子浓度升高〔7〕。过量的钙内流在细胞内形成高浓度游离钙，使线粒体肿胀，细胞能量代谢障碍和激活钙依赖蛋白酶及磷脂酶分解维持正常细胞功能所必备的蛋白质，磷脂酞胆碱和磷脂酞乙醇胺，而导致神经细胞坏死，疤痕形成，成为致癫痫灶。这可能是吗啡成瘾后出现神经元异常放电的生物化学基础。

神经突触是脑内信息传递的主要结构，突触结构的改变必然与神经电生理活动的异常有关。吗啡导致神经细胞变性坏死、萎缩退化，而机体为了摆脱其引起的信息传递抑制作用，维持正常的生理功能，必然会在某些部位发生一些代偿性改变。并且随依赖时限的延长，这种代偿性改变变得更加明显。吗啡依赖时胶质细胞弥漫性或灶性增多、靶神经元多次重复兴奋，他们可能分泌一些神经营养因子或营养活性物质，促进轴突、树突的生长，并且建立更多的突触联系和引起突触可塑性的改变〔8〕。部分神经细胞变性坏死后，外周存留细胞可能会发出新的侧支，并形成新的突触，以弥补神经细胞坏死后引起的突触丧失。突触的丢失和重组不断进行，必然会破坏正常的神经细胞间相互联系的秩序，这可能是吗啡成瘾猫皮层异常放电的病理学基础。另外，实验研究、分子解剖学已证实中脑一边缘多巴胺系统是几乎所有成瘾药物产生奖赏效应的结构基础，在把情绪转化为意向性行为和活动的过程中起重要作用〔9〕。而这种转化正是产生药物依赖所必需的。中脑一边缘多巴胺系统主要包括中脑腹侧被盖区、伏隔核、杏仁核等脑区。伏隔核内主要为多侧棘的γ-氨基丁酸能(GABA)小神经元。伏隔核区多巴胺受体密度与纹状体非常相近，是脑内多巴胺受体密度最高的脑区之一。伏隔核被认为和选择性注意、继发性易化、奖赏、记忆等行为过程有关，是将中脑-边缘叶信号通过锥体外系结构转变为行动的调控站。一切天然的奖赏性刺激都是通过作用于该系统，在注射吗啡的动物体内，5-HT的代谢和合成增加，而5-HT3可激发NAc区DA能神经元的超常电活动，最终引起伏隔核内多巴胺释放增多，从而产生奖赏效应，诱发吗啡依赖者的戒断症状和对吗啡的渴求。这可能是吗啡成瘾猫戒断行为的神经电生理学基础。

1 纪家涛.吗啡依赖大鼠模型的建立〔J〕.第二军医大学学报，1997;18(1):81-2.

2 徐贵丽，刘泽源，苏国丽，等 大鼠海洛因依赖催促戒断模型的建立〔J〕.中国药物滥用防治杂志，2000;2(3):9-10.

3 邓金昆，李经才.近年来戒毒药物的研究进展〔J〕.沈阳药科大学学报，2003;20(2):147-51.

4 Nadel J，HauberW.Reversemicrodialysis of a dopamine D2 receptor antagonist alters extracellular adenosine levels in the ratnucleus accumbens〔J〕.Neurochem Int，2004;44(8):609-15.

5 秦 伟，潘贵书，陈远寿，等.海洛因依赖大鼠部分脑区超微结构变化研究〔J〕.遵义医学院学报，2007;30(1):8-10.

6 刘晓燕.临床脑电图学〔M〕.北京:人民卫生出版社，2006:357-63.

7 王 林，傅先明，钱若兵，等.吗啡成瘾性大鼠脑内核团神经细胞〔Ca2+〕i变化的研究〔J〕.立体定向和功能性神经外科杂志，2007;20(2):84-7.

8 高家林，黄 彬，罗素元，等.吗啡依赖戒断焦虑大鼠海马突触结构的可塑性〔J〕.解剖学杂志，2008;31(1):40-2.

9 Koob GF.Drug of abuse:anatomy，pharmacology and function of reward pathways〔J〕.TiPS，1992;13(1):177-84.

Study of semeiology and neural electrophysiology about the cat w ith acutemorphine addiction

GUO Tao，ZHENG Jie，KANG Jin-Sheng，et al.
Department of Functional Neurosurgery，Hebei Provincial Hospital，Shijiazhuang 050051，Hebei，China

ObjectiveTo observe the semeiology and the change of neural electrophysiology of the cat with acute morphine addiction.Methods12 male catswere randomly divided into experiment and control groups.The cats of experiment group were hypodermic injection with morphine at8，12，16 h.The cats of control group were hypodermic injection with normal sodium at the same time.After 5 days，the cats of experiment group were injected with allylnoroxymorphone for inducing abstinent symptom.Two group cats were monitored with electroencephalogram at1，3，7 w after inducing abstinent symptom.ResultsAll of the cats of experiment group showed abstinent symptom.The changes ofelectroencephalogram were physiologicalwaves reducing and slow waves and spikewave increasing.ConclusionsThe semeiology and the change of neural electrophysiology of the catwith acutemorphine addiction conduce to reveal themechanisms ofmorphine addiction.

Morphine;Addiction;Model;Semeiology;Electroencephalogram

R322

A

1005-9202(2011)18-3528-03

河北省科技攻关计划项目(07276101D－133)

1 辛集市第一医院

赵文清(1956-)，男，主任医师，主要从事功能神经外科疾病诊断与治疗研究。

郭 韬(1972-)，男，主治医师，主要从事功能神经外科疾病诊断与治疗研究。

〔2011-01-06收稿 2011-03-04修回〕

(编辑 曲 萌/曹梦园)