喷昔洛韦原位胶化滴眼液的制备与质量控制

李军，杨惠玲

(郑州大学第一附属医院药剂科，450052)

喷昔洛韦(penciclovir)是英国SKB公司开发的开环核苷类抗病毒药物，是无环核苷活性衍生物，是伐昔洛韦的活性代谢物。有抗单纯疱疹病毒 HSV-Ⅰ，HSV-Ⅱ，带状疱疹病毒等的作用，它的作用机制与阿昔洛韦相似。与阿昔洛韦比较，其抗病毒效果显著，是一种抗病毒谱较广的药物［1］。主要用于治疗单纯疱疹病毒引起的感染，也可用于治疗带状疱疹病毒感染。喷昔洛韦同类药物的眼用凝胶剂治疗病毒引起的疱疹性角膜炎、眼睑单纯疱疹、病毒性角膜炎及流行性结膜炎等，均有较好疗效［2-3］。笔者研制了喷昔洛韦原位胶化滴眼剂并制订质量标准。

1 仪器与试剂

高效液相色谱仪(美国Dionex P680);UV-754紫外分光光度仪(上海第三分析仪器厂);喷昔洛韦(丽珠集团常州康丽制药有限公司，批号:061208);喷昔洛韦对照品(由原料药精制所得，含量＞99.5%);海藻酸钠(青岛胶南明月海藻化工有限公司 ，批号:061113);硼酸(青海制药厂有限公司，批号:060521)，其余试剂均为药用规格或分析纯。水为注射用水。

2 处方与制备

2.1 处方 喷昔洛韦2 g，海藻酸钠10 g，硼酸18 g，5%羟苯乙酯醇溶液10 mL，注射用水加至1 000 g。

2.2 制法 称取海藻酸钠 10 g，加入注射用水200 mL，水浴加热，搅拌使溶解;另取喷昔洛韦2 g，硼酸18 g，用适量注射用水溶解，搅拌加入尼泊金乙酯醇溶液(必要时加热)，混匀。在迅速搅拌下将喷昔洛韦溶液缓缓加入制备好的海藻酸钠溶液中，搅拌至澄清，以0.1 mol·L-1的氢氧化钠溶液调 pH 至5.0 ～7.0，混匀，抽滤，经滤器加注射用水至全量，以100℃流通蒸汽灭菌30 min，无菌分装，即得。

3 质量控制

3.1 性状 本品为无色澄明液体，pH为5.0～7.0，其他符合滴眼液项下规定［4］。

3.2 鉴别 取喷昔洛韦原位胶化滴眼液适量(相当于喷昔洛韦10 mg)，加水20 mL，置水浴中加热使溶解，过滤，滤液中滴加氨制硝酸银试液数滴，即产生白色沉淀。参照高效液相色谱法［3］操作，样品主峰保留时间与喷昔洛韦对照品峰保留时间一致，均为8.282 min。

3.3 含量测定

3.3.1 色谱条件 固定相:Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm× 250 mm，5 μm); 流 动 相: 甲 醇20.01 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(用三乙胺调 pH至7.0)(10∶90);检测波长:252 nm;进样量:20 μL;理论塔板数按喷昔洛韦峰计算应≥2 000。

3.3.2 标准曲线的绘制 精密称取干燥至恒重的喷昔洛韦对照品50 mg，置于100 mL量瓶中 ，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取 1.0，5.0，10.0，15.0，20.0 mL 分别置 100 mL 量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，进样20 μL，照高效液相色谱法测定峰面积，记录色谱图，将峰面积(Y)对喷昔洛韦浓度(X)进行回归处理，得回归方程:Y= －7 627.76X+60 800.52，r=0.999 7。结果表明喷昔洛韦浓度在 5.00～100.00 μg·mL-1范围内线性关系良好。

3.3.3 溶液稳定性实验 取“3.3.2”项下溶液1份(50 μg·mL-1)，分别在 0，1，2，4，6，8 h 进样 20 μL，照高效液相色谱法测定峰面积，结果样品在8 h内稳定，峰面积的RSD=0.91%。

3.3.4 精密度实验 取“3.3.2”项下溶液(50 μg·mL-1)，进样量20 μL，连续进样 5 次，测得峰面积RSD=0.51%。

3.3.5 回收率实验 模拟处方配制高、中、低3种浓度，每种浓度取样3次。精密称取不同浓度的喷昔洛韦和辅料适量，置100 mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀、过滤。精密量取续滤液10 mL，置100 mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀。进样20 μL，照高效液相色谱法测定峰面积，计算回收率。结果平均回收率97.12%，RSD=1.84% ，见表 1。

表1 喷昔洛韦回收率实验结果 μg·mL-1

3.3.6 样品含量测定 精密称取喷昔洛韦原位胶化滴眼液适量(相当于喷昔洛韦50 mg)置100 mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀、过滤。精密量取续滤液10 mL，置100 mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀。进样20 μL，照高效液相色谱法测定峰面积，测定含量。结果批号为090522，081019，081221的样品，含量分别为标示量的 98.62%，97.79%和 99.17%。

4 稳定性实验

取包装完好，于室温避光条件下放置12个月的样品，批号:071221，080109，080118 ，观察其外观颜色无变化;参照含量测定项下 ，结果含量为标示量的99.06%。结果表明本品性质稳定。

5 刺激性实验

取健康成年家兔5只(由河南中医学院实验动物中心提供，合格证号:SCXK-2008-0015)，体质量(2.5±0.5)kg，每只均于右眼滴入喷昔洛韦原位胶化滴眼液1滴，左眼滴入0.9%氯化钠溶液1滴作对照，tid，每次用药后观察家兔躁动，眼部充血、红肿、流泪、羞明、分泌物等现象。连续用药2周后将家兔处死，取眼部组织作病理切片检查，未发现任何病理变化。

6 讨论

传统的滴眼剂往往是一种药物的溶液剂，给药后，由于眼睑的快速眨动和结膜囊内泪液不停地分泌，导致滴眼剂通过鼻泪管迅速排除，造成滴眼剂的生物利用度低(往往＜1%)［5］。眼部原位胶化给药系统就是将药物以水溶液的形式给药，在滴入眼时，受到温度、pH或离子强度的影响，迅速形成凝胶，减少给药次数，延长药物作用时间和具有较好的流变学性质，避免或减少血药浓度的峰谷现象，提供平稳有效的血药浓度［6-8］。

海藻酸钠是海藻酸的钠盐，是一种亲水性多聚糖，能够与人体泪液中含有的钠离子(Na+)、钾离子(K+)、钙离子(Ca2+)等阳离子发生作用而引起构象改变，使滴眼液由溶液转化为凝胶。形成凝胶的强度依赖于海藻酸钠中β-D甘露糖酸与α-L古洛糖酸的比例，以及海藻酸钠的浓度［9］。

［1］侯炜，肖红，毛琳，等.喷昔洛韦体外抗病毒的药效学研究［J］.华西药学杂志，2004，19(2):87 －89.

［2］孙文武，江先义，张小平，等.复方阿昔洛韦眼用凝胶的制备及临床应用［J］.中国医院药学杂志，2001，21(11):695.

［2］许俊羽，刘玉旺，孙培红，等.喷昔洛韦注射剂在中国健康人体内的药代动力学［J］.中国临床药理学与治疗学，2007，12(4):470 －473.

［4］国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)［M］.北京:中国医药科技出版社，2010:附录32.

［5］ZHANG J J，XIE L K，CHEN Z J，et al.Determination of fluconazole in tears and aqueoushumors after topically applied to rabbit eyes by gas-liquid chromatography［J］.Chin Ophthal Res，2000，18(5):385.

［6］孙海燕，杜兴，沙红玉，等.原位凝胶在滴眼剂中的研究进展［J］.中国药业，2005，14(8):91.

［7］周军.羟甲唑啉胶化滴眼剂的制备与质量控制［J］.医药导报，2010，29(12):1624 －1625.

［8］赵宁民，张凯，王豫辉.加替沙星原位胶化滴眼剂的制备及质量控制［J］.中国医院药学杂志，2008，28(22):1962－1963.

［9］钟延强，蒋华芳，刘善奎，等.原位胶化缓释滴眼剂的研究进展［J］.药学服务与研究，2003，3(3):170 －172.