天杞颗粒的制备工艺*

李杜军，刘明生，张鹏威，丁仰宏，吴丽媛，曹丽萍，李中桂，周郁斌

(1.广州中医药大学中药学院药剂教研室，510006;2.海南医学院药学系，海口 571101)

天杞颗粒由巴戟天和枸杞子组成。巴戟天强筋骨、温肾助阳;枸杞子补肝肾滋阴，兼可助阳，与巴戟天相配，可弥补巴戟天助阳有余、滋阴不足之弊，使本方成为阴阳兼补之剂。多糖类成分是巴戟天和枸杞子发挥免疫增强作用的主要成分［1-2］，但多糖类成分易吸湿，难以制备固体制剂。因此，以往以巴戟天和枸杞子为配方的保健品往往考虑制成液体制剂，而液体制剂不方便携带、服用，制剂成本高。笔者对颗粒剂辅料进行筛选，以解决此两味药提取物中多糖类成分易吸潮的问题。

1 仪器与试药

1.1 仪器 756MC紫外可见光分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)，PL402-L电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)，DHG-9240A电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)，TDL-40B离心机(上海安亭科学仪器厂)，SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵(巩义市予华仪器有限责任公司)，旋转蒸发器RE-5299(巩义市予华仪器有限责任公司)，TC-15恒温电热套(海宁市华星仪器厂)，200 g摇摆式高速中药粉碎机(温州市大德中药机械有限公司)。

1.2 试药 中药材购于广州致信药业有限公司，药材经广州中医药大学黄海波教授鉴定合格，D-无水葡萄糖对照品(中国药品生物制品检定所，批号:110833-200503)。

2 方法与结果

2.1 天杞颗粒的水煎煮工艺条件优选

2.1.1 正交实验设计 根据预实验，以多糖为指标对水煎煮提取工艺的主要影响因素加水量(A)、提取次数(B)、提取时间(C)按四因素三水平表进行L9(34)正交实验。各因数水平见表1。

表1 正交实验因素水平表

2.1.2 对照品溶液的制备 精密量取105℃干燥至恒重的D-无水葡萄糖10.60 mg，置于100 mL量瓶中，加纯化水稀释至刻度，摇匀作为对照品溶液。

2.1.3 供试品溶液的制备 参考文献［3］。称取巴戟天、枸杞子各27份，按正交实验表下实验条件进行实验，每种方法均重复3次。煎提加热，保持微沸至规定时间后停止加热，放冷，3 500 r·min-1离心10 min。取上清液减压浓缩至250 mL量瓶中，摇匀，精密吸取10 mL置于分液漏斗中，加入石油醚10 mL，萃取3次，萃取液加入1/5体积的savage试剂(三氯甲烷∶正丁醇=4∶1)，振荡后离心，精密吸取上清液1 mL，加入95%乙醇5 mL，4℃冰箱静置24 h，3 500 r·min-1离心10 min，弃去乙醇，沉淀烘干至无醇味，加水溶解并定容于10 mL量瓶中，作为供试品溶液。

2.1.4 标准曲线的绘制 参考文献［4］。分别精密量取对照品溶液 0.20，0.40，0.60，0.80，1.00 mL，分别置具塞试管中，分别加水至2.00 mL，各精密加入5%苯酚溶液1 mL，摇匀，迅速精密加入硫酸5 mL，摇匀，放置10 min，置40℃水浴中保湿15 min，取出后迅速冷却至室温，以相应的试剂为空白。照紫外-可见分光光度法，在490 nm波长处测定吸光度(A值)，以A值为纵坐标，浓度(C)为横坐标，绘制标准曲线，回归方程为:A=6.146 2C －0.000 1，r=0.999 8，结果显示葡萄糖在0.021 2 ～0.106 0 mg·mL-1范围内具有良好的线性关系。

2.1.5 多糖的含量测定 精密吸取供试品溶液1.00 mL，按“2.1.4”项下操作，测定 A 值，用回归方程计算供试品溶液中多糖的含量。多糖含量(%)=多糖质量/药材质量×100%。

2.1.6 正交实验结果 按照表2安排实验，并对结果进行方差分析。供试品正交实验结果和方差分析见表2，3。

表2 正交实验安排及结果

表3 正交实验方差分析结果

由表2结果可知:巴戟天、枸杞子多糖提取的影响因素主次顺序为B＞C＞A，即浸提次数＞浸提时间＞加水倍量，综合各因素的K值和直接比较，最佳提取工艺为:A2B3C3，即加水量15倍，提取1.5 h，提取3次。

由表3结果可知:提取次数、提取时间对多糖的提取影响显著，加水倍量对多糖的提取无显著影响。因此，从生产成本考虑，可将加水倍量调整为10倍，最佳提取工艺为:A1B3C3，即加水量10倍，提取1.5 h，提取3次。

2.1.6 验证实验 取药材3份，根据筛选得到的提取工艺A1B3C2，进行正交验证实验，测得多糖的含量分别为 0.767 5%，0.743 2%，0.731 9%，平均为0.747 5%，RSD=2.43%(n=3)。

2.2 天杞颗粒的成型工艺研究

2.2.1 天杞颗粒填充剂的优选 分别以淀粉、糊精、乳糖、微晶纤维素为填充剂制备颗粒，考察颗粒的吸湿情况。干膏与淀粉、乳糖、糊精、微晶纤维素的比例分别为1∶5，1∶4，1∶3，1∶2 时易成型，颗粒无明显吸潮现象。

2.2.2 天杞颗粒润湿剂的优选 取干膏20 g、糊精40 g各3份，分别以60%，80%，95%乙醇为润湿剂制粒，发现60%，80%的乙醇作黏合剂黏度大，难混匀制粒，95%乙醇易混匀制粒，对制得的颗粒进行考察，休止角、稀释率良好。故选择95%乙醇做润湿剂。

2.2.3 天杞颗粒矫味剂的优选 分别选用甜菊苷、甜蜜素、阿斯巴甜3种甜味剂进行比较，实验结果以药粉50 g中加入阿斯巴甜2.5 g效果最佳。

2.2.4 天杞颗粒的制备 干膏∶糊精∶阿斯巴甜为1∶4∶0.04，95%乙醇混匀，过筛孔内径 1.40 mm(14目)筛制粒，60 ℃干燥，过筛孔内径(250.0±9.9)μm(65目)筛整粒即得。

3 讨论

中药制剂的吸潮是影响其质量的棘手问题，目前解决中药吸潮问题的关键是辅料选择或采用颗粒包衣技术防潮。辅料的防潮效果一般是乳糖＞微晶纤维素＞糊精＞淀粉，辅料之间的比例恰当也能够减少吸湿性;颗粒包衣技术是采用丙烯酸树脂或乙基纤维素的乙醇溶液做粘合剂制粒，或者普通方法制粒后将颗粒包上述辅料的膜衣。但颗粒包衣技术成本高、工序复杂，一般少用。

考虑到微晶纤维素水溶性不好、乳糖成本太高、淀粉用量太大，暂定糊精作为填充剂进一步进行考察。干膏分别与混合辅料糊精和淀粉、糊精和乳糖制粒，吸湿率较单一辅料糊精略低，但效果不明显，在生产中无实际应用意义，故选择糊精作为填充剂。

实际生产中需要注意缩短颗粒暴露时间、控制环境湿度。另外，中药浸膏吸湿性大往往是因为某些成分具有吸湿的性质，如果吸湿成分为无效成分，可考虑对提取和纯化工艺进行调整，以达到减小剂量、增加稳定性的目的。

［1］陈彩英，詹若挺，陈蔚文.巴戟的药理研究进展［J］.中药新药与临床药理，2009，20(3):291 －293.

［2］孙桂菊，左平国.枸杞多糖功效研究及应用状况［J］.东南大学学报:医学版，2010，29(2):209 －215.

［3］贺培益，王米，孟新宇，等.壳聚糖絮凝法澄清复方黄芪水提液的工艺研究［J］.中国生化药物杂志，2010，31(3):173－175.

［4］国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)［M］.北京:化学工业出版社，2005:232.