七叶皂甙钠对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

刘金彪 王新征 侯永强 丁斌

七叶皂甙钠对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

刘金彪 王新征 侯永强 丁斌

为探讨七叶皂甙钠对肝脏缺血再灌注损伤的作用，通过预先对大鼠肝脏缺血再灌注模型静脉注射七叶皂甙钠，经测定肝组织内ATP、AMP、ADP的含量，肝脏的细胞能荷，及血清谷丙转氨酶，谷草转氨酶，碱性磷酸酶、γ-GT等各项指标，结果发现用药组单纯缺血再灌注对照肝组织内ATP含量高，损害较轻，结果表明:七叶皂甙钠对肝脏缺血再灌注造成的损伤有明显的预防作用。

肝脏;缺血再灌注;七叶皂甙

七叶皂甙系由婆罗子的干燥成熟果实中提取的一种皂甙制成。我们在原位肝脏缺血再灌注模型上，观察七叶皂甙对I/R损伤的影响，旨在探讨该药减轻I/R，损伤的作用，为临床应用七叶皂甙钠防治肝脏I/R损伤提供依据。

1 资料与方法

1.1 药品及动物 注射用七叶皂甙钠为武汉爱民制药厂生产。雄性wistar大鼠25只，体重200～250 g，有同济医科大学实验动物中心提供。

1.2 实验方法及观察指标

1.2.1 实验鼠随机分3组:正常组9只，缺血再灌注组8只和七叶皂甙钠治疗组8只。实验前12 h进食，饮水不限，采用戊巴比妥50 mg/kg体重腹腔麻醉，正中切口开腹，暴露肝门部，小血管夹阻断尾状叶及左叶肝脏血流，但不阻断右叶血流。以防门静脉及肠道淤血，待检查肝组织标本取自尾状叶前部，用巾钳暂时关闭腹腔，在阻断血流40 min后，放开血管夹，再灌注2 h。正常对照组仅作肝门部血管稍分离而不阻断。用药组按20 mg/kg体重静脉注射七叶皂甙钠，分别在阻断血流前及再灌注前10 min，各按上述剂量半量，从股静脉缓慢推注。

1.2.2 肝组织ATP，ADP AMP的测定:取肝脏组织后标本立即置液氮中冷冻保存至检测，首先从液氮内取出标本立即称重500 mg，加HclO4匀浆，置高速冷冻离心机内1200转/min共15 min，提取上清液，再加K2CO3，充分混匀，离心5000转/min共10 min，取上清液，样品处理完后，用高效液相色谱法检测波长测定ATP，ADP，AMP含量。肝细胞的能量状态用能荷表示，能荷的计算公式:

1.2.3 血清酶检测取下腔静脉血标木送生化室测，ALT、AST、AKP、γ-GT 等

1.2.4 数据处理全部数据采用计算机SAS程序SLM过程处理。

2 结果

2.1 肝组织ATP、ADP、AMP及能荷变化，见表1。

2.2 肝功能检测结果用七叶皂贰钠治疗组ALT、AST、AKP、γ-GT等均较缺血再灌注组下降差异有统计学意义(P＜0.05)，见表2。

表1 七叶皂贰钠对缺血再灌注损伤肝细胞ATP、ADP、AMP含量及能荷影响(例，±s)

表1 七叶皂贰钠对缺血再灌注损伤肝细胞ATP、ADP、AMP含量及能荷影响(例，±s)

注:△同对照组比P＜0.01，▲同对照组比P＞0.05，﹡同缺血再灌注组比P＜0.05

组别 例数 ATP(g/mg) ADP(g/mg) AMP(g/mg)08 0.64±0.15 I/R损伤 8 724.03±143.09 2.89.04±303.05 4580.43±1734.08△ 0.25±0.07△药物治疗 8 1376.28±34.8 1610.36±510.21 317.94±241.32▲ 0.52±0.18 Engery charge对照 9 1081.99±155.08 898.53±323.8 1284.15±982.﹡

组别 例数 ATP(g/mg) ADP(g/mg) AMP(g/mg)86±1.81 I/R损伤 8 2103.50±976.20 1485070±778.88△ 394.82±63.93 07.50±4.46△药物治疗 8 599.38±95.35 588.38±215.12﹡ 183.22±64.35 4.14±1.57 Engery charge对照 7 131.33±77.25 378.50±211.77 89.00±14.85 3.﹡

3 讨论

缺血肝脏再灌注后，常使原缺血的组织细胞的损伤加重，谓之肝脏的缺血再灌注损伤，肝脏的I/R是临床工作经常面临的一个问题，如休克后的肝脏功能衰竭，肝移植及肝脏损伤及肿瘤的手术等。虽然肝细胞的损害可直接由缺血引起，但大量的证据说明大部分损伤发生于再灌注［1］，造成肝脏I/R损伤的原因是多因素的且十分复杂［2，3］，临床工作中尚无十分有效的预防措施。实验证明某些药物可一定程度缓解损伤。七叶皂贰钠具有抗渗出、维持细胞膜稳定性、恢复毛细血管正常通透性、改善微循的作用［4］。国内张氏等的实验结果表明，其抑制炎性渗出的作用为氢化可的松的4～5倍，并有抑制毛细血管通透性增加的作用，其强度为氢化可的松的7～8倍。具有对抗磷酸组织胺和缓激肤等炎性介质的作用［6］。我们通过预先对大鼠肝脏I/R模型静脉注射七叶皂甙钠后，观察到用药组较组大鼠的肝细胞内ATP含量明显提高，能荷有所恢复，血清酶ALT、AST、AKP、γ-GT等的释出减少实验结果表明七叶皂贰钠具有抗I/R损伤的作用，七叶皂甙钠保护肝脏的机制尚不十分清楚，结合本实验结果及该药的药理作用，我们推测七叶皂甙钠可能通过以下几个环节减轻I/R造成的损伤:

3.1 增加肝细胞的能量，抑制ATP的过分消耗。七叶皂贰钠可显著减少缺血再灌注大鼠肝细胞ATP含量及能荷的下降，进而减少次黄喋吟大量堆积，因此可使再灌注时OFR的生成减少，七叶皂甙钠增加肝细胞的能量，抑制了I/R生成的OFR启动环节。

3.2 抗炎、维护细胞膜的稳定性:七叶皂甙钠可提高ACTH和皮质酮类的血浓度，血液中，糖皮质激素增加将会抑制水肿，毛细血管扩张可减少中性白细胞数目抑制白细胞的附壁及移行血管外，并可抑制磷酸脂酶A2、花生四稀酸、白三稀等的形成这些物质对化学趋向和炎症起重要的作用［5，6］。

［1］ Parks DA，Granger DN.Contribution of ischemia and reperfusion to mucosal lesion formation.Am J Physiol，1986，250:749.

［2］ Ratych RE.Chukyiska RS，BullKley GB.The primary localization of free radical generation after anoxia/reoxy genetion in isolated endothehal cell.Surgery，1987，102:122.

［3］ Welbourn CRB.Goldman G，Paterson IS.Pathophysiogy of ischaemia reperfusion injury:rentral roal of the neutrophil.Br Sury，1991;78:651.

［4］ 新药手册.中国药学杂志.天津科学技术出版社，1991，5:450-452.

［5］ 李家泰.临床药理学.人民卫生出版社，1991，799.

［6］ 张丽新.婆罗子皂甙的药理研究.中国医院药学杂志，1997，7:337.

471003河南科技大学第一附属医院普外三科