弥漫大B细胞淋巴瘤中Bcl-2基因表达的临床意义*

朱 锋 周 丽

(泰山医学院附属医院血液科，山东 泰安 271000)

弥漫性大 B 细胞淋巴瘤 (Diffuse large B cell lymphoma, DLBCL) 是最常见的一类侵袭性非霍奇金淋巴瘤, 约占成人非霍奇金淋巴瘤(non hodgkin lymphoma, NHL)的30%～40%。是一组恶性程度不一的异质性肿瘤，在形态学和临床特征上都表现出异质性。尽管联合化疗能使 40%～50%的患者达到持续缓解,但仍有许多 DLBCL患者不能缓解或缓解后很快复发。其临床特征、治疗效果与多种因素有关。研究表明，Bcl-2 是一种凋亡抑制基因,与淋巴瘤的发生密切相关[1]。本研究利用免疫组织化学技术检测了 Bcl-2在26例DLBCL 中的表达，以探讨它的表达与DLBCL 的临床特征、治疗效果等因素的关系。

1 材料和方法

1.1材料 26例 DLBCL 病例来自泰山医学院附属医院血液科2004～2010 年活检标本。其中男性18例,女8例，年龄在 21～79岁, 平均年龄 71 岁。26例DLBCL 患者中中心母细胞性淋巴14例,免疫母细性淋巴瘤9例, 间变性大B 细胞性淋巴瘤3例,26例患者均行R-CHOP方案正规化疗。患者诊断及疗效评价参照《血液病诊疗指南》(张之南主编)。

1.2方法与试剂 26例病例均行病理及免疫组化检测，诊断符合WHO标准。免疫组化染色采用Elivision法，鼠抗人单克隆抗体(DAKO及试剂盒购自华美生物工程公司上海分公司。

1.3结果判断 阳性结果采用定性判断：>10%肿瘤细胞浆内出现清晰的棕黄色或棕褐色颗粒定为阳性。

1.4统计学方法 应用SPSS14.0统计软件包进行数据统计分析。采用Pearsonχ2检验比较各组间阳性率，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1临床及病理结果 26例患者原发于淋巴结内17例，单纯累及结外9例,主要以胃肠道、中枢神经系统、扁桃体多见。临床多表现为局限性肿块,部分病例出现远处播散。病理形态学大多表现为典型的大细胞,弥漫增生、浸润。淋巴瘤细胞形态多样,核呈圆形、不规则折叠或锯齿状,染色质呈粗颗粒状或空泡状,可见一个或多个核仁,核分裂像易见;胞浆量中等或丰富，透明、淡染或嗜双色。

免疫组织化学染色结果 Bcl -2阳性主要表达为细胞质着色，阳性细胞可呈灶状聚集或弥漫分布。阳性率约为46.2%。(见图1)

2.3统计分析表明Bcl -2蛋白表达与年龄、原发部位无关,与发热、盗汗、体重减轻等全身症状、Ann Arbor分期及临床疗效有关(表1)。

表1 Bcl-2在DLBCL中的阳性表达与其临床特征的关系

注：*连续性校正χ2值。

图1 Bcl -2在DLBCL中的表达

3 讨 论

DLBCL是最常见的一个侵袭性非霍奇金淋巴瘤,约占所有NHL的 30%～40%。5年生存率在25%左右，而低危者可达70%左右。根据形态学、免疫组织化学及细胞遗传学特征, 可将DLBCL分为多个亚型。不同组织学亚型淋巴瘤病例的临床特征、治疗效果相差甚远，临床异质性显著，联合化疗可使40%～50%患者持续缓解，但仍有许多患者不能缓解或缓解后复发[2]。虽然临床用来判断预测DLBCL的临床特征、治疗效果的指标有多种, 但都不十分理想。

研究表明Bcl -2基因是细胞凋亡调节基因，它通过调节线粒体、控制细胞色素C和其他一些凋亡因子释放使得肿瘤细胞凋亡过程发生异常，在淋巴瘤的发病以及淋巴瘤细胞对治疗的敏感性上发挥重要作用[3]。研究表明，Bcl -2异常表达主要由于t (14 ; 18) (q32 ; q21) 导致Bcl -2基因和 IgH 基因异位使位于18号染色体的Bcl -2基因插入到14号染色体 Ig基因位点，促进Bcl -2转录，使其表达异常增高[4]。该基因表达异常主要见于滤泡性淋巴瘤，但在部分 DLBCL中也见Bcl -2基因高表达。Bcl-2 的过度表达能够抵抗化疗药物如阿糖胞苷、氨甲喋呤、长春新碱等所引起的细胞凋亡[5]。体外研究表明，Bcl-2 基因的表达，使肿瘤细胞对多种药物产生耐药[6]。其原因可能有以下几点: (1) Bcl-2 阳性的淋巴瘤本身具有多药耐药活性；(2) Bcl-2 阳性的淋巴瘤细胞同时存在多药耐药糖蛋白的表达增高；(3) Bcl-2阳性淋巴瘤细胞较多处于G0期; (4) Bcl-2阳性恶性淋巴瘤患者常处于中晚期。我们的研究发现DLBCL患者中 , Bcl-2阳性患者初治CR率明显低于Bcl-2阴性患者，提示Bcl-2 阳性者治疗反应差。也提示我们在治疗Bcl-2阳性的DLBCL患者时，应给予更加强烈的化疗方案，以取得更高的 CR 率[7]。有关Bcl -2基因表达的临床意义仍存在争议。我们的研究结果表明，Bcl -2基因在DLBCL 中表达与患者的年龄、原发部位无关，而与患者全身症状的有无、Ann Arbor分期及临床疗效有关，与有关文献报道一致[9]。我们认为患者的年龄、肿瘤的发生部位对淋巴瘤细胞的生物学性质无重大影响, 而Bcl -2基因的表达改变了肿瘤细胞的生物学行为，从而导致DLBCL 患者出现不同的临床特征，Bcl -2基因异常表达时，肿瘤细胞凋亡受到抑制且对化疗不敏感，表现为患者临床分期较晚、病情进展较快、全身症状明显、对治疗的反映较差等[8]。提示Bcl -2基因表达可以用来作为 DLBCL 的不良临床过程、疗效差的指标之一。

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