正交试验优选复方儿茶止泻膜的成膜材料Δ

梁波，赵君，高明

（大连大学医学院，大连市 116622）

正交试验优选复方儿茶止泻膜的成膜材料Δ

梁波＊，赵君，高明#

（大连大学医学院，大连市 116622）

目的：优选复方儿茶止泻膜的成膜材料。方法：以膜剂的外观质量和体外透皮实验中儿茶素的累积释放量为评价指标，以聚乙烯醇（PVA）1750、羧甲基纤维素钠（CMC-Na）、白及胶用量为考察因素，采用正交试验优选最佳成膜材料。结果：最佳成膜材料为PVA17509mL、CMC-Na 2mL、白及胶4mL。结论：改进后的复方儿茶止泻膜较单用白及胶作为成膜材料的原制剂，外观质量更好，体外透皮吸收含量更高，能够显著改善原制剂的不足之处。

复方儿茶止泻膜；成膜材料；外观质量；体外透皮实验

复方儿茶止泻膜是近年来某“三甲”医院研发的医院制剂，由儿茶、五倍子、黄柏和木香4味中药配伍组成，具有清热燥湿、收敛止泻的功效。临床上用于湿热型儿童腹泻的治疗，疗效显著。原制剂采用白及胶单一成膜材料，虽然柔韧性较好，但制成的膜剂抗拉强度差，且没有进行体外透皮吸收实验等系统研究。本试验意在运用正交试验法对聚乙烯醇（PVA）、羧甲基纤维素钠（CMC-Na）和白及胶3种成膜材料的配比进行筛选，以膜剂的外观质量和体外透皮实验中儿茶素的累积释放量（即儿茶素含量）为指标，优选出复方儿茶止泻膜的最佳成膜材料。

1 仪器与材料

1.1 仪器

HITACHI L-2100高效液相色谱仪、HITACHI L-2400紫外检测器、N-2000色谱工作站（日本日立高科技公司）；HH-S112电热恒温水浴锅（上海跃进医疗器械厂）；AB135-S电子分析天平（瑞士Mettle Toledo公司）；MSE-1600体外透皮吸收仪（天津正通科技有限公司）；KQ-50B超声波清洗器（上海精宏实验设备有限公司）；DHG-9076A型电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）。

1.2 试药

儿茶、五倍子、黄柏、木香和白及药材均购自安徽亳州，经大连大学医学院中医中药学系高松副教授鉴定均为真品；儿茶素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110878-200102）；PVA1750购自国药集团化学试剂有限公司；CMC-Na购自天津市光复精细化工研究所；乙腈和甲醇为色谱纯，磷酸为优级纯，吐温-80和液体石蜡为化学纯，其余试剂均为分析纯。

1.3 动物

SD健康大鼠，♂，体重（200±20）g，由大连医科大学实验动物中心提供（合格证号：2007-6A007）。

2 方法与结果

2.1 膜剂的制备

2.1.1 复方药物提取液的制备 按处方量称取药材，即儿茶36.5g，黄柏7.5g，五倍子7.5g，木香7.5g。药材粉碎后加入7倍量水，微波（功率：480W）提取15min，提取液浓缩成每1mL含相当于生药2.5g的提取液，备用。

2.1.2 白及胶的制备 称取粉碎成豆粒大小的白及适量，加入8倍量蒸馏水，浸泡72h，经常搅拌使充分胶溶；浸液用单层纱布滤过并挤出药渣中余液；将药渣捣烂加入滤液中重新浸泡24h，再用两层纱布滤过，滤液保存，备用。

2.1.3 PVA溶液的制备[1]称取PVA175010g，置于烧杯中，加入80%乙醇适量浸泡48h，烘干后加蒸馏水30mL，90℃水浴加热使溶解成胶浆，用两层纱布滤去不溶物，备用。

2.1.4 CMC-Na溶液的制备 称取CMC-Na 10g，置于烧杯中，加蒸馏水30mL，90℃水浴加热使溶解成胶浆，备用。

2.1.5 复方儿茶止泻白及胶膜的制备 取上述制备好的白及胶6mL，置于烧杯中，加入复方药物提取液1.5mL，再加入10%甘油与2%吐温-80各适量，搅拌均匀，超声振荡至无气泡后量取2mL，倾倒在玻璃板（2cm×7cm）上，涂匀，摊平，自然干燥，即得。

2.1.6 不同配比基质的复方儿茶止泻膜制备 以PVA 1750（A）、CMC-Na（B）和白及胶用量（C）为考察因素，设计正交试验[2]。按正交设计表安排，分别量取3种成膜材料倒入研钵内，研匀后按10∶1（成膜材料和药液的体积比）的比例加入复方药物提取液，再加入10%甘油、2%吐温-80各适量，研匀，超声振荡至无气泡后，量取2mL，倾倒在玻璃板（2cm×7cm）上，涂匀，摊平，自然干燥，即得。因素水平见表1；正交设计见表2。

表1 因素水平Tab1 Factor and level

2.2 膜剂的外观质量检查

对上述制得的复方儿茶止泻白及胶膜和各种不同配比基质的复方儿茶止泻膜进行外观质量（膜剂的柔韧性、均匀度和抗拉强度[3，4]）检查，结果见表3。

2.3 儿茶素含量测定

2.3.1 色谱条件 色谱柱：Hypersil GOLD ODS（250mm×4.6mm，5µm）；流动相：乙腈-0.2%磷酸（8∶92）；流速：1.0mL·min-1；检测波长：280nm；柱温：室温；进样量：10μL。

2.3.2 对照品溶液的制备 精密称取儿茶素对照品3.6mg，用甲醇溶解，超声处理5min，定容至25mL容量瓶中，制得1mL中含有0.144mg儿茶素的对照品溶液。用0.45μm有机微孔滤器滤过，取续滤液，备用。

表2 正交设计Tab2 Orthogonal design

表3 复方儿茶止泻膜的外观质量检查结果Tab3 Results of appearance quality tests of Compound catechu anti-diarrhea film

2.3.3 供试品溶液的制备 在透皮3h后定时从接受管量取1mL接受液，定容于50mL容量瓶中，混匀。用0.45µm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

2.3.4 标准曲线的制备 精密吸取儿茶素对照品溶液（0.144mg·mL-1）5、10、15、20μL，依次进样（n＝3），以进样量（X）对峰面积积分值（Y）进行线性回归，得回归方程为Y＝466326X（r＝0.9995）。结果表明，儿茶素进样量在0.72～2.88μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系。

2.3.5 儿茶素含量测定 取各供试品溶液，进样10µL（n＝3），按上述色谱条件测定，用外标法计算儿茶素含量。

2.4 体外透皮实验

2.4.1 离体皮肤的制备 颈椎脱臼法处死大鼠，除去脐部的毛，用镊子钝性分离脐部已去毛的皮肤，小心剔除皮下脂肪和结缔组织后用0.9%生理盐水洗净。将洗净后的皮肤置4℃冷藏保存，于第2天选择无可见伤痕的皮肤供透皮吸收实验用。

2.4.2 样品膜的制备 取上述制得的复方儿茶止泻白及胶膜和各种不同配比基质的复方儿茶止泻膜，分别剪下0.785cm2的小圆片（等于体外透皮吸收仪中接受管上孔面积），精密称重，备用。

2.4.3 体外透皮实验 将供试皮肤固定于样品池与接受池之间，将制备的药膜贴于皮肤上层，使皮肤角质层面向样品池，接受管内注入5mL 0.9%生理盐水，开动恒温水浴循环[（37±1）℃]和磁力加热搅拌器（转速：130r·min-1），达到设定温度后开始计时，3h后定时从接受管内量取接受液制备供试品溶液，按上述色谱条件进行含量测定，结果见表4；方差分析结果见表5。

表4 复方儿茶止泻膜体外透皮实验结果Tab4 Results of transdermal tests of Compound catechu anti-diarrhea film

表5 儿茶素含量方差分析结果Tab5 Variance analysis of the content of catechin

以膜剂外观质量为指标的结果显示，第8组，即PVA 17509mL、CMC-Na 2mL、白及胶4mL为混合基质制得的膜剂，其柔韧性、均匀度和抗拉强度均满足要求，外观质量最好；以儿茶素含量为指标的结果显示，各因素作用的主次为A＞C＞B，以A3B2C1（即第8组）为最佳。从表5可知，B因素对儿茶素含量有显著性影响（P＜0.05），A和C因素对儿茶素含量有极显著性影响（P＜0.01），因而确定PVA17509mL、CMC-Na 2mL、白及胶4mL为最佳基质配比。结合外观质量考察结果，该配比混合基质制得的膜剂，其外观质量（柔韧性、均匀度、抗拉强度）也为最好。综上所述，确定A3B2C1为膜剂的最佳基质配比，即分别量取PVA17509mL、CMC-Na 2mL和白及胶4mL倒入研钵内，研匀后加入复方药物提取液1.5mL，再加入10%甘油、2%吐温-80各适量，研匀，超声振荡至无气泡，量取2mL，倾倒在玻璃板（2cm×7cm）上，涂匀，摊平，自然干燥，即可得到优质的膜剂。

3 讨论

PVA、CMC-Na和白及胶均为良好的成膜材料[5～7]。目前对复方儿茶止泻膜成膜材料的研究仍处于单一基质的状态。本试验中分别制备了3种单一成膜材料制成的膜剂，结果表明，以PVA为成膜材料制得的膜剂柔韧性差，PVA浆液与药液的互溶性也很差；以CMC-Na为成膜材料药物的溶解性好，制成的膜剂光滑均匀，但是柔韧性和抗拉强度都很差；以白及胶为成膜材料制得的膜剂具有较好的柔韧性，但是抗拉强度比较差。最重要的是，3种单一成膜材料制得的膜剂在体外透皮实验中测得的3h后儿茶素含量都比较少，因而不适合使用单一成膜材料制备复方儿茶止泻膜。鉴于此，笔者进行了混合基质的配比研究，优选出最佳的基质配比，制得的膜剂体外透皮吸收3h后儿茶素的含量显著增加，且膜剂的柔韧性、均匀度、抗拉强度都好于3种单一成膜材料制成的膜剂，大大改善了原医院制剂（使用白及胶为单一成膜材料）的不足。

本方君药为儿茶，因而选择儿茶的主要有效成分儿茶素作为检测指标，通过测定儿茶素在体外透皮实验中的3h含量来考察不同基质配比的膜剂质量。参考日常用药的需要，笔者选择测定透皮3h后儿茶素的含量为指标，但由于其并不能全面反映膜剂的具体释药特性，对此还有待于进一步考察研究。

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Optimization of Film Materials of Compound Catechu Anti-diarrhea Film by Orthogonal Test

LIANG Bo，ZHAO Jun，GAO Ming
（Medical College，Dalian University，Dalian 116622，China）

OBJECTIVE：To optimize the film materials of Compound catechu anti-diarrhea film.METHODS：The proportions of film material were optimized by orthogonal experiments using appearance qualtiy and the cumulative drug release of catechin in transdermal tests in vitro as index and with amount of PVA 1750，CMC-Na，bletilla gum as factors.RESULTS：The optimal proportion of film material was as follows：PVA17509mL，CMC-Na 2mL and bletilla gum 4mL.CONCLUSION：The improved Compound catechu anti-diarrhea film has the better appearance quality and the higher permeated content of catechin than the original film prepared with bletilla gum alone so that it could make up for the deficiencies of the original one.

Compound catechu anti-diarrhea film；Film materials；Appearance quality；Transdermal tests

R283.62；R943

A

1001-0408（2011）19-1764-03

Δ大连市科技计划项目（2008E11SF171）

＊副教授，博士。研究方向：中药化学成分的分离鉴定、中药制剂及其分析。电话：0411-87402334。E-mail：beibeiliang0000@hotmail.com

#通讯作者：教授，硕士研究生导师。研究方向：中药药剂。电话：0411-87402361

2010-05-18

2010-10-11）