毛细管气相色谱法测定六神祛暑水中樟脑与薄荷脑的含量*

2011-01-22

化学分析计量 2011年5期

关键词：薄荷脑六神樟脑

(广东药学院药科学院，广州 510006)

1 实验部分

1.1 主要仪器与试剂

气相色谱仪：6820型,配FID检测器、Aglient Cerity工作站，美国安捷伦公司；

樟脑(批号110747-200507)、薄荷脑(批号110728-200506)、环己酮内标物(批号111674-200401) 对照品：北京中国食品药品检定研究院；

六神祛暑水(批号DN5001～DN5010)：广州星群(药业)有限公司；

乙醇等所有试剂均为分析纯。

1.2 溶液制备

(1)对照品溶液制备

分别精密称取樟脑对照品、薄荷脑对照品、内标物环己酮适量，各加70%乙醇，制成含樟脑1.011 mg/mL、薄荷脑0.996 8 mg/mL、环己酮1.790mg/mL的溶液。

(2)供试品溶液的制备

精密吸取六神祛暑水0.2 mL、1.790 mg/mL的环己酮内标溶液1 mL于10 mL容量瓶中，以70%乙醇定容。

第三，改变以往零散经营、松散合作的简单团队协作方式，通过股份合作组建大型商业企业，运行现代企业管理制度。要把众多中小闽商或以行业、或以地域为单位联合起来，组建大型商业企业或商贸城，用现代企业形式实现互助合作共同经营，把闽商的团队协作纳入现代企业管理，建立股权分散但经营权集中的现代企业制度，有利于参与市场竞争，又避免自相竞争。这样，闽商团队协作就上升到现代企业制度和企业文化的高度。这需要政府出面协调运作，从金融服务、科技中介服务、投资环境服务、公共服务等多方面入手，整合闽商力量。

(3)阴性对照溶液的制备

按处方组成，取除樟脑、薄荷脑外的其余药味，按1.2(2)方法操作制成不含樟脑、薄荷脑的六神祛暑水。

1.3 色谱条件

色谱柱：ZB-FFAP石英毛细管 (30 m×0.25 mm, 0.25 μm,)，美国Phenomenex公司；色谱柱升温程序：起始温度80℃，保持1 min，以8℃/min升至120℃，再以15℃/min升至180℃，保持2 min，然后以30℃/min升至220℃，保持3 min；气化室及检测器温度均为250℃；载气：氮气，流量为1 mL/min；进样量：1 μL；分流比：5∶1。

2 结果与讨论

2.1 色谱图

在1.3色谱条件下分别取樟脑对照品、薄荷脑对照品、内标物环己酮溶液的混合液，供试品溶液和阴性对照溶液进样分析，色谱图如图1所示。

结果表明,樟脑理论塔板数不低于1.3×106，薄荷脑理论塔板数不低于2.0×106。供试品溶液中樟脑、薄荷脑、内标物环己酮峰形对称性好且分离良好，与相邻色谱峰的分离度高达43，阴性对照品溶液未见干扰。

2.2 内标物与升温方式的选择

与采用萘为内标物的分析方法相比[2]，内标物环己酮在樟脑、薄荷脑之前出峰，采用程序升温，可以缩短分析时间且分离度符合药典要求。

2.3 标准曲线与线性范围

精密吸取一定体积樟脑对照品溶液，加入一定体积的环己酮溶液，配制成含樟脑0.040 44、0.101 1、0.202 2、0.303 3、0.505 5 mg/mL，均含环己酮0.179 0 mg/mL的70%乙醇对照品溶液。分别精密吸取1 μL上述溶液注入色谱仪，按1.3色谱条件分别进行分析，测定其樟脑及环己酮峰面积，以樟脑浓度(c)为横坐标，两者峰面积之比(Ai/As)为纵坐标，绘制樟脑标准曲线。

1—环己酮(内标)； 2—樟脑； 3—薄荷脑a—对照品； b—供试品； c—阴性对照品图1 气相色谱图

精密吸取一定体积薄荷脑对照品溶液，加入一定体积的环己酮溶液，配制成含薄荷脑对照品 0.049 84、0.099 68、0.149 5、0.199 4、0.249 2 mg/mL，均含环己酮0.179 0 mg/mL的70%乙醇对照品溶液。分别精密分别吸取1 μL上述溶液注入色谱仪，按1.3色谱条件分别进行分析，测定其薄荷脑及环己酮峰面积，以薄荷脑浓度(c)为横坐标，两者峰面积之比(A薄/A环)为纵坐标，绘制薄荷脑标准曲线。实验表明，樟脑和薄荷脑分别在0.040 44～0.505 5 mg/mL、0.049 84～0.249 2 mg/mL范围内线性关系良好，樟脑线性方程为A樟/A环=6.029c+0.122 6；薄荷脑线性方程为A薄/A环=6.592c+0.023 1；相关系数分别为0.999 9、0.999 4。

2.4 稳定性试验

取供试品溶液(批号DN51001)在室温下放置，分别在0、1、2、3、4、5、6、24 h进行测定，测得樟脑与环己酮峰面积比平均值A樟/A环=1.535，相对标准偏差为2.0%；薄荷脑与环己酮峰面积比平均值A薄/A环=0.854 4，相对标准偏差为2.1%。测定结果在24 h内较稳定。

2.5 重复性试验

精密取同一批号(批号DN51001)样品6份，按1.2(2)制备供试品溶液。取1 μL供试品溶液注入色谱仪，在1.3色谱条件下测定其樟脑及环己酮峰面积比和薄荷脑与环己酮峰面积比，代入标准曲线方程计算样品中樟脑与薄荷脑的含量。樟脑平均含量为11.52 mg/mL，相对标准偏差为0.91%；薄荷脑的平均含量为6.180 mg/mL，相对标准偏差为1.4%，结果表明该方法重复性良好。

2.6 回收试验

精密取同一批号(DN51001)的样品0.1 mL 6份，分别加入樟脑对照品0.995 6 mg、薄荷脑对照品0.475 0 mg和适量的内标物环己酮，以70%乙醇定容于10 mL容量瓶。吸取1 μL该溶液注入色谱仪，按1.3色谱条件进行测定，结果见表1。樟脑平均回收率为99.18%，相对标准偏差为0.79%；薄荷脑平均回收率为99.65%，相对标准偏差为1.5%，结果表明本方法准确可靠。

表1 回收试验结果

2.7 含量测定

取10个批号(DN51001～DN51010)的六神祛暑水样品，按1.2(2)制备供试品溶液，吸取1 μL溶液注入色谱仪，按1.3色谱条件测定，结果见表2。

表2 样品含量测定结果 mg/(5mL)

2.8 耐用性试验

换用FFAP石英毛细管柱(30 m×0.25 mm, 0.50 μm，中科院兰州化物所色谱技术研究开发中心)，按1.2(2)制备供试品溶液，在1.3色谱条件下进样测定，计算的樟脑理论塔板数为2.6×105，薄荷脑理论塔板数为4.8×105,樟脑和薄荷脑的分离度为15.6。虽然塔板数和分离度比进口色谱柱差，但仍能满足定量要求。