“绿满园”对红蜘蛛的生物活性及对三种蜘蛛的毒性测定

张梦蕾，李亚东，谢良善，王金亮，贺妮莎，彭宇

（1.湖北大学生命科学学院，湖北 武汉430062；2.湖南武冈县农业综合开发办，湖南 武冈422400）

“绿满园”对红蜘蛛的生物活性及对三种蜘蛛的毒性测定

张梦蕾1，李亚东1，谢良善1，王金亮2，贺妮莎1，彭宇1

（1.湖北大学生命科学学院，湖北 武汉430062；2.湖南武冈县农业综合开发办，湖南 武冈422400）

采用玻片粘胶浸渍法测定“绿满园”水剂对柑桔红蜘蛛Panonychuscitri的生物活性，同时采用浸渍法测定“绿满园”水剂对三突花蛛、斜纹猫蛛和拟环纹豹蛛3种蜘蛛的毒力.结果表明，16% “绿满园”水剂18.75倍稀释液对红蜘蛛毒性最强，处理72h后红蜘蛛死亡率可达99.0%.受药48h后，“绿满园”对红蜘蛛的毒力回归方程为y＝5.175 6＋1.183 8x，致死中浓度LC50为0.710 6mg／mL.16% “绿满园”水剂对三突花蛛和斜纹猫蛛无毒性，但对拟环纹豹蛛有较强的毒性，75倍稀释液处理过的拟环玟豹蛛24h后死亡率可达70%.

“绿满园”；柑桔红蜘蛛；毒性测定；蜘蛛

红蜘蛛属蛛形纲、蜱螨目、叶螨科，是园林中常见刺吸植物汁液的有害螨类［1］.红蜘蛛取食后，致使植物的叶绿素被破坏，光合作用减弱，叶片受害加剧，很快造成黄叶、落叶现象.红蜘蛛的为害严重影响了我国农业和花卉产业的发展.当前，主要采用化学杀螨剂防治红蜘蛛.使用的杀螨剂品种包括24%螨危、40%三氯杀螨醇乳油、20%螨死净（四螨嗪）可湿性粉剂、15%哒螨灵乳油和1.8%齐螨素（阿维菌素）乳油等［2－5］.

“绿满园”是我们自主研发的新型杀螨剂.田间药效试验表明，16%的“绿满园”水剂400倍对柑桔红蜘蛛Panonychuscitri7d后的防治效果为84.4%，对脐橙不产生药害.我们在实验室条件下，测定了“绿满园”对红蜘蛛的急性毒性，同时，以三突花蛛Ebrechtellatricuspidata，斜纹猫蛛Oxyopessertatus和拟环纹豹蛛Pardosapseudoannulata为对象，测定了“绿满园”对害虫捕食性天敌的毒性.该研究对于“绿满园”的推广应用及农田蜘蛛的保护具有一定的参考作用.

1 材料与方法

1.1 供试杀虫剂16%“绿满园”水剂，由湖南省武冈县农业综合开发办提供.

1.2 供试动物红蜘蛛从湖北大学校园内的月季、槐树和油菜上采集获得.试验当日采回带虫叶片，挑取个体大小一致、健康的成螨或若螨用于试验.三突花蛛、斜纹猫蛛和拟环纹豹蛛采用扣管法或者扫网法从湖北大学校园内采集得到.将采回的蜘蛛单头饲养于玻璃指管（直径2cm，长13cm）中，管底部放有一小团吸足清水的海绵，供蜘蛛饮水，管口用棉花塞住［6］.

1.3 “绿满园”对红蜘蛛的急性毒性测定采用联合国粮农组织推荐的玻片粘胶浸渍法测定“绿满园”对红蜘蛛的急性毒性［7］.测定过程如下：在洁净的载玻片一面粘上双面胶，用毛笔将植物叶上的红蜘蛛粘在双面胶上，放置2～4h后于解剖镜下检查，剔除死红蜘蛛.在预备实验的基础上，将“绿满园”稀释成6～7个浓度.将粘有红蜘蛛的载玻片放入不同浓度的药液中浸5s，取出后用吸水纸吸干残留药液.然后，放入铺有滤纸的培养皿中，在滤纸上加水保湿.将载玻片置于温度25～27℃，相对湿度80%～90%的培养箱中，分别于24h、48h和72h后检查红蜘蛛的死亡率.以用拨针轻触虫体，附肢和嘴都不动者为死亡.以清水为对照处理.

1.4 “绿满园”对蜘蛛的毒性测定采用浸渍法测定“绿满园”对3种供试蜘蛛的毒性［8］.将蜘蛛浸入不同浓度的“绿满园”中10s后，立即取出，放在吸水纸上吸去多余的药液，然后移入培养皿中.培养皿中用吸足水的海绵保湿，不需喂食.每个浓度各处理蜘蛛30头，对照用清水.分别于24h、36h和72h后检查蜘蛛死亡率.

1.5 数据分析将红蜘蛛的死亡率用Abbott公式进行校正.将校正后的死亡率转换成机率值，杀虫剂浓度换成对数值，以浓度对数值为横坐标，以死亡机率值为纵坐标，求回归方程、致死中浓度（LC50）、95%的置信限和X2［9］.

2 结果与分析

2.1 “绿满园”处理后，红蜘蛛的死亡症状通过显微镜观察，并结合照片分析，我们对红蜘蛛的死亡症状进行描述.对照处理的红蜘蛛个体，体色呈黄色，形态完整（见图1A）.而用“绿满园”处理的红蜘蛛，身体的后半部呈黑色，嘴向外伸出，附肢向外铺展开来.其中有少数红蜘蛛出现身体破裂、体液外流等现象（见图1B）.

图1 “绿满园”处理后红蜘蛛的中毒症状

2.2 “绿满园”不同处理浓度下红蜘蛛

的死亡率从表1可以看出，随着“绿满园”浓度的增加，红蜘蛛的死亡率逐渐增加.用“绿满园”18.75倍稀释液处理72h后，红蜘蛛的死亡率可达99.0%.同时，在相同“绿满园”浓度下，红蜘蛛的死亡率随时间的延长而增大.

2.3 “绿满园”对红蜘蛛的致死中浓度采用机率值分析方法，求得不同处理时间“绿满园”对红蜘蛛的毒力回归方程、致死中浓度LC50、LC5095%的置信限及X2的结果（见表2）.24h和48h毒力回归方程的X2值较小，表明药剂浓度与死亡率之间的回归关系显著性较高，所求的LC50是可信的.由于红蜘蛛在受药24h后仍有红蜘蛛死亡，因此，以48h的死亡率来计算LC50.“绿满园”对红蜘蛛的LC50为0.710 6mg／mL.

表1 “绿满园”不同处理浓度下红蜘蛛的死亡率 %

2.4 “绿满园”对三种供试蜘蛛的毒性“绿满园”对三突花蛛和斜纹猫蛛毒性测定结果见表3.用“绿满园”水剂300倍液、150倍液、75倍液处理后，三突花蛛和斜纹猫蛛在24h、48h、72h后的死亡率均为0.表明16%“绿满园”对这两种蜘蛛无毒性.

16%“绿满园”水剂对拟环纹豹蛛的毒力测定结果见表4.“绿满园”75倍稀释液处理过的拟环玟豹蛛在24h后死亡率可达70%，150倍稀释液处理过的拟环玟豹蛛在24h后死亡率也可达40%.表明“绿满园”对3种蜘蛛的毒力有很大差别，其中对拟环纹豹蛛的杀伤力最大，同时也说明拟环纹豹蛛对“绿满园”的耐受力比三突花蛛与斜纹猫蛛差.

根据所得数据求得“绿满园”对拟环纹豹蛛的毒力回归方程、X2、LC50及其95%的置信限分别为y＝2.039 8x＋4.780 5、0.143 9、1.281 2、（0.958 2～1.974 5）mg／mL.

表2 不同处理时间“绿满园”对红蜘蛛的毒力回归方程及致死中浓度

表3 “绿满园”不同处理浓度下三突花蛛和斜纹猫蛛的死亡率

表4 “绿满园”不同处理浓度下拟环纹豹蛛的死亡率

3 讨论

一种好的杀虫剂应该对害虫高效而对害虫天敌无毒性.本实验结果表明，“绿满园”水剂对红蜘蛛毒性很强.16%“绿满园”稀释18.75倍时毒性最强，在用药1d后虫体死亡率为72.4%，3d后，虫体死亡率达到99.0%.由于本实验设置的“绿满园”浓度梯度中，最低稀释倍数为18.75倍，而且，由表1可知，随着稀释倍数逐渐降低，药剂对红蜘蛛毒性越明显，18.75是否为最大毒性稀释倍数，还有待进一步实验验证.本研究没有比较“绿满园”与其他杀螨剂对红蜘蛛的毒性差异.同时，“绿满园”对其他有害螨类的毒性如何，均有待进行更深入的研究.“绿满园”对捕食性害虫天敌三突花蛛与斜纹猫蛛没有毒性.但在较高浓度下，对拟环纹豹蛛的毒性较大，“绿满园”对拟环纹豹蛛的毒性效果及原因还有待进一步探讨.本实验在测定“绿满园”对害虫天敌的毒性中只选取了田间较为常见的3种蜘蛛做实验.“绿满园”对瓢虫、家蚕、蜜蜂等有益昆虫是否安全，将会在以后的研究中进行.

［1］王智琛.温室红蜘蛛的发生及无公害防治［J］.西北园艺（蔬菜专刊），2009（1）：33.

［2］赵日坚，谭耀华.24%螨危悬浮剂防治柑橘红蜘蛛示范试验［J］.广东农业科学，2009，8：143－144.

［3］周青，李秀梅.红蜘蛛药剂防治试验研究［J］.河南林业科技，2003，23（3）：16－17.

［4］韦晓新，王益奎，赵坤.七种杀螨剂防治柑橘红蜘蛛田间药效试验［J］.现代农业科技，2008，19：156－157.

［5］孙广勤，于茂申.1.8%阿维菌素乳油防治夏玉米红蜘蛛药效试验［J］.农药，1999，38（9）：36－37.

［6］刘凤想，赵敬钊.蜘蛛的饲养与管理［J］.蛛形学报，1997，6（2）：146－152.

［7］慕立义.植物化学保护研究方法［M］.北京：中国农业出版社，1997.

［8］彭宇，王萌长，韩召军.蜘蛛对农药敏感性的测定方法［J］.动物学杂志，2001，36（3）：47－49.

［9］Finney D J.Probit analysis［M］.London：Cambridge Univ Press，1971：1－160.

The controlling role of"Lümanyuan"toPanonychuscitriand measurement of toxicity to three kinds of spiders

ZHANG Menglei1，LI Yadong1，XIE Liangshan1，WANG Jinliang2，HE Nisha1，PENG Yu1
（1.School of Life Science，Hubei University，Wuhan 430062，China；2.Hunan Wugang County Agriculture Comprehensive Office，Wugang 422400，China）

The slides viscose immersion method was taken to determine the toxicity of"Lümanyuan"toPanonychuscitri，in the meanwhile，investigated the influence of"Lvmanyuan"on three kinds of spiders，Ebrechtellatricuspidata，OxyopessertatusandPardosapseudoannulata.The results showed that the toxicity of 16%"Lümanyuan"toP.citriwas the strongest when diluted by 18.75times，and the mortality could reach 99.0%after 72htreated by the pesticide.48hafter treatment，the linear regression equation of"Lümanyuan"toP.citriwasy＝5.175 6＋1.183 8x，LC50＝0.710 6mg／mL."Lümanyuan"was non－toxic toE.tricuspidataandO.sertatus，but it had a strong toxicity toP.pseudoannulata，actually.The mortality ofP.pseudoannulatacan reach 70%after 24htreated by the 75times diluted pesticide.

"Lümanyuan"；Panonychuscitri；measurement of toxicity；spider

S482.3

A

1000－2375（2011）04－0418－03

2011－07－14

国家自然科学基金（31071895）和武汉市科技攻关项目（201120722216－3）资助

张梦蕾（1989－），女，本科生；彭宇，通信作者，教授，E－mail：pengyu＠hubu.edu.cn

（责任编辑 游俊）