GC-MS检测乳制品中15种邻苯二甲酸酯物质方法研究

李飞，陈静，张耀广，赵建飞，朱宏

（石家庄君乐宝乳业有限公司质量中心，石家庄 050221）

GC-MS检测乳制品中15种邻苯二甲酸酯物质方法研究

李飞，陈静，张耀广，赵建飞，朱宏

（石家庄君乐宝乳业有限公司质量中心，石家庄 050221）

建立了乳制品中邻苯二甲酸酯的GC-MS测定方法。样品用正已烷萃取，硅胶固相萃取净化后，用GC-MS测定：HP-5MS毛细管管柱分离，定性离子丰度比定性，外标法定量离子定量。标准曲线相关系数在0.9991～0.9998之间，方法检出限0.05 mg/kg，平均加标回收率在90.67%～107.33%之间，相对标准偏差在0.94%～3.83%之间，精密度相对标准偏差在3.79%～6.91%之间。结果表明所建立的方法经济、准确、可靠，适用于乳制品邻苯二甲酸酯的检测。

GC-MS；乳制品；邻苯二甲酸酯

0 引 言

邻苯二甲酸酷类化合物广泛运用于材料、食品等领域中，为人们的生活、工作带来了极大的便利[1]。然而这些化合物在自然界中原本不存在，且难以降解，对生态平衡具有破坏作用，通过环境和食品的污染及生物富集作用与食物链，可通过呼吸、饮食和皮肤接触进入人体和动物体内[2]。通过物质与功能的积蓄对人体健康产生的慢性与远期的危害不可忽视[3]。2011年5月28日，网络报道称台湾某添加剂厂爆出添加剂中涉嫌掺入塑化剂（邻苯二甲酸酯类物质），事件经过几天发展，涉及相关食品达900多种。2011年6月1日，卫生部紧急发布公告，将邻苯二甲酸酯类物质列入食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单[4]。

1 实 验

1.1 仪器与试剂

气相色谱-质谱联用仪（Agilent 6850-5975C）；电子天平；超声波清洗仪；固相萃取装置；高速离心机

乙酸乙酯；正己烷（色谱纯）；无水硫酸钠；氯化钠。

1.2 样品处理

（1）液态乳、酸奶、乳饮料。称取2 g样品于玻璃离心管中，加入4 mL的正己烷，1 g氯化钠，20℃水浴超声萃取15 min。10 000转/min离心5 min，取上清经无水硫酸钠过滤，氮吹浓缩至1 mL，待过柱用。

（2）奶粉。 用40～50℃水按1∶7比例稀释至为液体，以下按1.2（1）步骤操作。

（3）将1 mL提取液过预先用乙酸乙酷活化过的500 mg/3 mL的液相硅胶固相萃取小柱进行净化和浓缩富集，上样完毕后，用3 mL乙酸乙酯洗脱，洗脱速率为1 mL/min，用10 mL氮吹管收集洗脱液，氮吹浓缩至1 mL，过0.45 μm的一次性针筒式微膜过滤器于进样瓶中，可直接进样分析。

1.3 标准溶液的配制

15种邻苯二甲酸酯混标质量浓度为1 000 mg/L。

邻苯二甲酸酯标准储备液：吸取5 mL混标正己烷定容至100 mL容量瓶中得到50 μg/mL邻苯二甲酸酯标准储备液。

分别吸取1.0，2.0，4.0，8.0，10.0mL标准储备液正己烷定容至100 mL容量瓶中，得到邻苯二甲酸酯标准溶液质量浓度分别为0.5，1.0，2.0，4.0，5.0 mg/L。

1.4 GC-MS仪器条件

1.4.1 色谱条件

色谱柱：HP-5 MS石英毛细管柱30 m×0.25 mm（内径）×0.25 μm；进样口温度：250℃；升温程序：初始柱温60℃，保持1 min，以20℃/min升温至220℃，保持1 min，再以5℃/min升温至280℃，保持4 min；载气为氦气（纯度≥99.999%），流速1 mL/min；进样方式为不分流进样；进样量为1 μL。

1.4.2 质谱条件

色谱与质谱接口温度：280℃；电离方式：电子轰击源 （EI），监测方式：选择离子扫描模式（SIM）；电离能量：70eV；溶剂延迟：6 min[5]。

2 结果与讨论

2.1 前处理过程的优化

乳制品中含有大量蛋白质，加入正己烷提取液后形成乳浊液，本研究加入氯化钠，使水层与有几层分离，并通过高速离心得到澄清透明有机提取液，有利于净化过程。

2.2 固相萃取柱的选择

固相萃取中固定相的选择主要是根据目标化合物的性质和基体性质。目标化的极性与吸附剂的极性非常相似时，可以得到目标化合物的最佳保留。本实验的提取液为非极性的正己烷，所以选用正相填料的硅胶固相萃取小柱[3]。

2.3 本底的影响

由于邻苯二甲酸酯类物质在环境中普遍存在，为了减少本底的影响，本实验选取了玻璃离心管，避免使用塑料容器[6]，溶剂采用色谱纯的正己烷，最大程度减少本底的影响。

2.4 色谱柱的选择

由于邻苯二甲酸酷类化合物沸点较高，而且15种PAES分子量相差比较大，程序升温所需要的温度较高，极性越强的色谱柱能达到的温度越低，因此，,选择弱极性的HP-5 ms（5%的苯基十95%聚二甲基硅氧烷）熔融弹性石英毛细管柱分离15种PAES，色谱图如图1所示。

由图1可以看出，15种化合物能在26min内有效的分开，峰型尖锐，对称性好，出峰附近都没干扰峰，各峰间间隔适宜，是理想的色潜检测条件。

2.5 标准曲线和检出限（LOD）

取15种邻苯二甲酸酷的混合标准系列溶液，按照上述第1.4中所述仪器条件进行分析，外标法定量。每次进样1 μL，平行测定3次，以峰面积Y对质量浓度X（mg/L）进行线性回归，回归方程和相关系数如表1所示。

最低检出限的做法：取质量分数为1mg/kg的标准液，进样1 μL，按公式计算，得到各组分的最低检出限（见表1）。

式中：CL为最低检测限（mg/kg）；C为标准液的质量分数（mg/kg）；Nd：基线噪声峰高；H为标准液色谱峰高；V为进样体积1 μL。

由表1可以得出15种邻苯二甲酸酯类物质在0.5～5.0 mg/kg线性范围内其丰度呈线性关系，相关系数在0.9991～0.9998之间，表明线形良好，符合准确度的要求。检出限为0.05 mg/kg。

表1 回归方程及检出限

2.6 方法准确度（样品回收率）

为了验证方法的准确度，本论文对样品进行了标准加标回收实验，做3份平行实验，计算平均回收率和标准偏差。结果如表2所示。

由表2可以看出，在空白样品中添加质量分数为1 mg/kg的15种邻苯二甲酸酯类混标，3次平行试验平均回收率在90.67%～107.33%之间，RSD在0.94%～3.83%之间，其回收率及精密度均符合标准要求。

2.7 方法精密度

精密度是使用特定的分析程序，在受控条件下重复分析均一样品所得的测定值之间的一致程度，检验分析方法的精密度时，通常以标准溶液、实际样品和样品加标3种方法分析样品。本研究采用标准样品做精密度实验，结果如表3所示。

表2 加标回收率结果%

表3 标准样品的方法精密度%

由表3可以看出，以质量分数为0.5 mg/kg的标准溶液连续进样5次，所得质量分数的平均值在0.486%～0.566%之间，其精密度在3.79%～6.91%之间，精密度符合标准要求。

3 结 论

本文建立了乳制品中15种邻苯二甲酸酯的GCMS测定方法。根据乳制品的特点采用加氯化钠及高速离心得到澄清提取液，采用玻璃离心管及色谱纯试剂最大程度减少了本底的影响。通过加标回收率验证了方法的准确性，重复性实验验证了方法的精密度，结果表明：标准曲线相关系数在0.9991～0.9998之间，方法检出限为0.05 mg/kg，平均加标回收率在90.67%～107.33%之间，相对标准偏差在0.94-3.83%之间，精密度相对标准偏差在3.79%～6.91%之间。回收率、相对标准偏差和精密度都符合相关要求，可以快速、高效、准确检测乳制品中邻苯二甲酸酯类物质。

[1]魏爱雪，徐晓白.环境污染治理技术与 设备，2005，6（7）：90-93.

[2]李文兰，季宇彬，杨波，等.城市环境与城市生态,2003,16（1）：22-24.

[3]柴丽月.食品及包装材料中邻苯二甲酸醋的检测与迁移规律的初步研究[D].南京农业大学，2008：30-31.

[4]关于公布食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单（第六批）的公告.卫生部公告2011年第16号[R].

[5]GB/T 21911-2008食品中邻苯二甲酸酯的测定[S].

[6]徐向华,方晓明,丁卓平，等.高效液相色谱测定牛奶中邻苯二甲酸酯的方法研究[J].化学通报,2008（6）：420-424.

Determination of phthalic acid esters in dairy products by GC-MS

LI Fei，CHEN Jing，ZHANG Yao-guang，ZHAO Jian-fei，ZHU Hong
（Shijiazhuang Junlebao Dairy Co.Ltd,Quality Center 050221）

In this paper,a method of GC-MS for detection of 15 phthalic acid esters in Dairy products was be established：The sample was extracted with n-Hexane,then purified by Silica SPE kit,finally detected by GC-MS,it was separated by HP-5MS capillary column,Characterization of ion abundance ratios of qualitative and quantified by external standard method ion quantitation.The correlation coefficient of the standard curve in 0.9991～0.9998,the detection limit of the method are 0.05mg/kg,the average recoveries in 90.67%～107.33%,the relative standard deviation in 0.94-3.83%.The relative standard deviation of precision in 3.79%～6.91%.The results show that the established method is economic,accurate and reliable,applicable to Determination of Phthalic Acid Esters in Dairy products.

GC-MS；dairy products；Phthalic Acid Esters

TS252.7

A

1001-2230（2011）10-0050-04

2011-08-04

李飞（1982-），男，硕士，从事乳制品检验方法研究。