正交试验优选宽心口服液提取工艺Δ

侯林中，张熙洁，王玉，刘晓红（河北唐山市工人医院，唐山市063000）

正交试验优选宽心口服液提取工艺Δ

侯林中＊，张熙洁，王玉，刘晓红#（河北唐山市工人医院，唐山市063000）

目的：优选宽心口服液的提取工艺。方法：以干浸膏得率及丹参中的丹参素钠含量为评价指标，以加水量、提取时间、提取次数为考察因素，采用正交试验选取最佳工艺。结果：最佳工艺为加10倍量水，提取3次，每次提取2h。结论：优化的工艺简单、可行，适用于实际生产。

宽心口服液；正交试验；提取工艺；丹参素钠

宽心口服液是我院中药制剂，由丹参、赤芍、水蛭、当归、川芎、黄芪等10味药材组成，具有活血化瘀、益气通络的功效，用于治疗气虚血瘀、脉络闭阻所致的胸痹、心痛证。动物实验研究表明[1，2]，本制剂可以降低心肌梗死模型大鼠血清内皮因子的表达，保护内皮功能；具有清除氧自由基、减少心肌细胞破坏、保护线粒体结构功能作用；能够提高兔血管成形术后血浆tpa活性，预防动脉血管成形术后局部血栓形成。本制剂由于当归、川芎所含成分相似，其共同的有效成分阿魏酸遇热不稳定，故在进行工艺研究时将二者单独用乙醇提取，并优化了醇提工艺[3]；方中其余药材用水提取。本试验以干浸膏得率及丹参中丹参素（以丹参素钠计）的含量为考察指标，对该口服液水提取工艺进行优选。

1 仪器与试药

高效液相色谱仪，包括2010色谱管理系统、510泵、996二极管阵列紫外检测器、7725i进样器（美国Waters公司）。

丹参素钠对照品（中国药品生物制品检定所，批号：200507）；宽心口服液（我院自制）；丹参、黄芪、赤芍、水蛭、地龙、桃仁、红花、半夏、当归、川芎饮片均购于唐山药材站第二批发部，批号分别为 20070228、20070108、20070122、20070211、20070211、 20070130、 20070120、 20061228、 2007203、20070211；乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 丹参素钠的含量测定

根据笔者前期研究并已另文发表的文献[4]，精密量取口服液1mL，置于10mL容量瓶中，加适量30%甲醇振摇，用30%甲醇稀释至刻度，离心（1500r·min-1）15min，吸取上清液，用0.45μm微孔滤膜过滤，备用。另精密称取丹参素钠对照品适量，加30%甲醇溶解，配制成浓度为0.5mg·mL-1的对照品溶液。按色谱条件进样测定，计算丹参素钠含量。

2.2 宽心口服液最佳水提工艺研究

2.2.1 因素水平的确定 从提取物的性质并结合实际生产考虑，选取影响水提工艺的加水量（A）、提取时间（B）、提取次数（C）为考察因素，每个因素选3个水平，用L9（34）正交表进行试验。因素水平见表1。

表1 因素水平Tab 1 Factors and levels

2.2.2 试验样品的制备及结果 依处方比例，称取丹参、黄芪、赤芍、水蛭、地龙、桃仁、红花、半夏，加入醇提取后的当归和川芎残渣共9份，依正交设计方案于不同条件下提取，抽滤，得滤液，减压浓缩，定容于容量瓶中。取药液10mL，水浴蒸干，105℃烘5h，得干浸膏，称量，按下式计算干浸膏得率：干浸膏得率＝（VW1/10W）×100%。式中，V为每份药材提取液总体积；W1为10mL提取液中干浸膏质量；W为每份药材的质量。按“2.1”项下方法测定丹参素钠含量。正交试验结果见表2；方差分析结果见表3。

表2 正交试验结果Tab 2 Result of orthogonal test

表3 方差分析结果Tab 3 Results of variance analysis

从表2、表3可知，影响干浸膏得率的因素大小依次为C＞B＞A＞D，最佳提取工艺为A3B3C3；而影响丹参素钠含量的因素大小依次为C＞A＞B＞D，最佳提取工艺为A3B3C3。其中，提取次数对干浸膏得率和丹参素钠含量均具有显著性影响。最后确定以A3B3C3为佳，即加10倍量水，提取3次，每次2h。

2.3 验证试验

称取3份处方药材，按照优选工艺提取，用上述方法测定干浸膏得率和丹参素钠的含量。结果，干浸膏得率和丹参素钠含量均高于正交试验，表明优选工艺可行。验证试验结果见表4。

3 讨论

中药提取过程对于中药质量、疗效有着举足轻重的影响。众所周知，中药的疗效是通过一系列相似结构的化合物群（有效成分）的协同作用而体现的。要保证中药产品的质量稳定、疗效可靠，就必须对中药提取物生产过程进行研究和标准化建设[5]。

丹参为方中君药，丹参素为其水溶性代表成分之一[6]。现代药理研究证明[6，7]，丹参素对实验性心肌缺血有明显的保护作用，能显著缩小心肌梗死范围和减轻病变程度；具有抗血栓形成、抑制血小板聚集等作用。丹参素的药理作用决定了其在制剂中的地位，故本研究参照有关文献[8]以丹参素（以丹参素钠计）含量为考察指标。

在测定含量时[4，9]，曾采用流动相甲醇-0.5%冰乙酸溶液，并根据文献调整比例1∶6、1∶8、1∶10、1∶12。结果，丹参素钠峰与其他成分色谱峰分离不佳。后改用现在的流动相：乙腈-水-磷酸（1∶30∶0.5），丹参素钠峰能够与其他色谱峰完全分离。通过方法学考察，含量测定方法简便、可靠、重复性好。

表4 验证试验结果Tab 4 Results of verification test

[1] 张春来，尚小明，徐 丹，等.心肌梗死大鼠外周血中血管内皮因子水平与参芍宽心合剂的干预作用[J].中国组织工程研究与临床康复，2007，11（45）：9039.

[2] 李 霞，尚小明，许 丹，等.宽心合剂对大鼠急性心肌梗死后心室重构作用影响的研究[J].河北中医，2007，29（3）：257.

[3] 侯林中，刘晓红，张熙洁.正交试验优选宽心口服液中当归、川芎提取工艺[J].中国药学杂志，2007，42（10）：794.

[4] 侯林中，刘晓红，张熙洁.高效液相色谱法测定宽心口服液中丹参素钠的含量[J].中国实验方剂学杂志，2008，14（10）：18.

[5] 倪力军，史晓浩，高秀蛟，等.提取时间、溶剂对丹参提取物质量的影响研究[J].中成药，2003，25（10）：780.

[6] 吕亚青.丹参的化学成分及临床应用进展[J].中国药房，2007，18（12）：947.

[7] 李艳杰，孙玉华.丹参素药理作用研究[J].延边大学医学学报，2006，29（1）：73.

[8] 谭建伟，杨天才，马秀芬，等.乳安合剂的制备与质量标准研究[J].中国药房，2007，18（33）：2588.

[9] 侯林中，刘晓红，张熙洁.宽心口服液质量控制[J].中国医院药学杂志，2009，29（13）：1126.

Optimization of the Extraction Technology of Kuanxin Oral Liquid by Orthogonal Test

HOU Lin-zhong，ZHANG Xi-jie，WANG Yu，LIU Xiao-hong（Tangshan Gongren Hospital of Hebei Province，Tangshan 063000，China）

OBJECTIVE：To optimize the extraction technology of Kuanxin oral liquid.METHODS：The extraction technology of Kuanxin oral liquid was optimized by orthogonal test with the content of dry extract and sodium danshensu as index and with amount of water，extraction time and extraction times as factors.RESULTS：The optimized extraction technology was as follows：adding 10-folds water，extracting 3times for 2hours each time.CONCLUSION：The optimized extraction technology is simple，practicable and suitable for industrial production.

Kuanxin oral liquid；Orthogonal test；Extraction technology；Sodium danshensu

R284.2；R283.612

A

1001-0408（2010）47-4447-02

Δ河北省科学技术研究与发展计划项目（03276196D-60）

＊副主任中药师，硕士。研究方向：中药工艺和质量标准。电话：0315-3722354。E-mail：tshlz2004@yahoo.com.cn

#通讯作者：主任药师，硕士研究生导师。研究方向：医院药学。电话：0315-3722435。E-mail：liuxiaohong@medmail.com.cn

2010-06-30

2010-10-29）