对186例流产孕妇及其配偶血清弓形虫抗体检测分析

张志华，杨晓红，段希玲 (山西职工医学院寄生虫学教研室，太原 030012)

刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种呈世界性分布的寄生在宿主有核细胞内的机会致病性原虫(Opportunistic protozoan)［1］。弓形虫病是一种人兽共患寄生虫病，可致人的弓形虫性脑积水、小脑畸形、智力缺陷、脉络膜视网膜炎等。孕妇在妊娠早、中期遭受弓形虫感染会引起流产、早产、死胎，或者分娩脑积水、无脑儿或有其他神经系统缺陷的严重畸形的婴儿［2］。为进一步了解流产与弓形虫感染的关系，本人对186例流产孕妇及其配偶进行了血清弓形虫抗体的检测。

1 材料与方法

1.1 研究对象 收集2008－10～2009－12期间山西省荣军医院妇产科自然流产的孕妇186名，夫妇同时进行血清检测。

1.2 标本采集 受检者均在空腹时抽取前臂静脉血2 ml，常规分离血清，冰箱保存。

1.3 试剂 TOX-IgG、TOX-IgM试剂盒由郑州华美生物工程公司提供。

1.4 检测

1.4.1 TOX-IgG检测 采用ELISA法，用包被液以1∶2 000稀释弓形虫抗原包被反应板置湿盒内4℃过夜，用PBS洗涤5次，每次5 min，每孔加入1%牛血清白蛋白0.2 ml封闭，置37℃温育1 h，同前法洗涤后加入稀释为1∶100的血清，每孔500 ml，置37℃温育1 h，同前法洗涤后加入稀释为1∶1 000稀释的羊抗人IgG辣根过氧化物酶标记物，每孔500 ml，置37℃温育1 h，洗涤后加入新鲜配制的底物液，每孔 0.1 ml，置室温 0.5 h 后，加 2 mol/L H2SO4终止反应，于30 min内测定A值，所用波长450 nm。①目测:根据临界孔显色来进行判断样本孔显色比临界孔深判为阳性，否则判为阴性;②读数判断，样本孔A值＞临界对照孔A值判阳性;样本孔A值＜临界对照孔A值判阳性。

1.4.2 TOX-IgM的测定 将待检血清用样本稀释液按1∶100稀释，每酶标孔滴加稀释后的血清100 μl，同时设阳性、阴性和空白对照，37℃温育30 min，洗涤液重复洗板5次;加酶结合物，37℃温育30 min，洗涤液重复洗板5次;加显色剂37℃温育10 min，取出，加终止液，测定A值，所用波长450 nm。待测样品A值与阴性对照A值平均值之比≥21判为阳性，＜21判为阴性。

1.5 统计学分析 使用SPSS13.0统计软件，采用χ2检验进行分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清弓形虫抗体IgG、IgM调查结果 在186对被检夫妇中，IgG总阳性率11.56%，其中男性阳性率10.75%，女性阳性率12.37%，不同性别间阳性率比较差异没有统计学意义(χ2=1.28，P＞0.05)。IgM 总阳性率10.22%，男性阳性率8.60%，女性阳性率11.83%，不同性别间阳性率比较差异没有统计学意义(χ2=2.13，P＞0.05)。IgG+IgM总阳性率5.38%，男性阳性率4.84%，女性阳性率5.91%，不同性别间阳性率比较差异没有统计学意义(χ2=1.06，P＞0.05)，见表 1。

表1 血清弓形虫抗体IgG、IgM检测Tab 1 Positive expression of IgG，IgM of Toxoplasma gondii

2.2 其他检测项目阳性率 在186对被检夫妇中，夫妇均感染弓形虫者28对，阳性率为15.05%。被检孕妇中，习惯性流产患者(2次以上自然流产)38例，IgG(+)或IgM(+)者22 例，阳性率为58.06%;养宠物者41例，其中IgG(+)或IgM(+)25例，阳性率为60.11%，未养宠物者145例，其中IgG(+)或IgM(+)56例，阳性率为38.29%，两者之间差异有统计学意义(χ2=9.34，P＜0.05)。

3 讨论

弓形虫呈世界性分布，据统计全世界有20亿人感染弓形虫，感染率为0.6%－94%［3］。据调查，目前在我国各地均证实有本病存在，我国正常人群感染率多在10%以下，平均感染率为5.17%，感染人数可能约有6 000万［4］。正常人体感染弓形虫多为隐性感染，当机体免疫力下降时，虫体大量繁殖，侵入除红细胞外的各组织细胞内寄生，造成各种组织的广泛炎症，从而出现临床症状。

人类感染弓形虫后能诱导产生特异性抗体。IgM抗体是体液免疫反应中最早出现的抗体，IgM阳性多提示有近期感染，IgG抗体多于感染后2－5个月逐渐达到高峰，以后逐渐下降，可维持较长时间，IgG阳性说明有既往感染，或隐性感染［5］。上述指标为弓形虫感染的临床分析及抗弓形虫治疗提供免疫学依据。本研究采用ELISA法对186对流产夫妇检测血清弓形虫IgG、IgM抗体，结果显示IgG阳性率为11.56%，IgM阳性率为10.22%，IgG+IgM阳性率为5.38%，均高于我国正常人群的感染率，但低于王新彩等［6］对不孕症夫妇调查所得的感染率。我们的研究表明弓形虫感染不同性别间无显著差异，这与景彩霞等［7］、李兆爱等［8］的研究一致，但也有研究表明女性感染要高于男性结果［9］，其中原因需要进一步研究。本研究还发现，在这186对流产夫妇中习惯性流产患者(2次以上自然流产)弓形虫感染阳性率为58.06%;夫妇均感染弓形虫者28对，阳性率为15.05%。

弓形虫对人体的危害受到越来越多的关注，尤其是弓形虫对胎儿的影响。习惯性流产与弓形虫感染的关系国内有很多报道，所有报道都显示习惯性流产患者的弓形虫感染率明显高于正常人群，也高于正常孕妇［10］，与本研究的调查结果一致。人食用未煮熟的含有感染期弓形虫的动物肉、乳制品、蛋类，或者饮用被污染的水可被感染。另一条感染途径是与猫、狗等宠物的密切接触，因为这些宠物是弓形虫的终宿主。本研究表明养宠物患者弓形虫感染阳性率为60.11%，明显高于未养宠物患者。因此，对育龄人群一定要做好卫生宣传教育，尤其是准备生育和已经怀孕的妇女，应避免感染弓形虫，以免造成不良后果。

［1］ Brown AS，Schaefer CA，Quesenberry CP，et al.Maternal exposure to Toxoplasmosis and risk of schizophrenia in adult offspring［J］.Am J Phasychiatry，2005，162(4):767－773.

［2］ 于恩庶.中国弓形虫病［M］.香港:亚洲医药出版社，2000:1－13.

［3］ Stellwagen D，Beattie EC，Seo JY，et al.Differential regulation of AMPA receptor and GABA receptor trafficking by tumor necrosis factor-alpha［J］.J Neurosci，2005，25(12):3219－3228.

［4］ 沈一平.新世纪初对我国寄生虫病的思考［J］.中国人兽共患病杂志，2003，19(1):4－6.

［5］ 刘琦，姚莉萍，屠凤娟，等.孕妇、不孕症及妇科疾病患者弓形虫感染的检测分析［J］.疾病监测，2010，25(1):52－54.

［6］ 王新彩，刘润芳，赵荣坡.不孕症夫妇弓形虫感染的血清学检查［J］.河南科技大学学报:医学版，2006，24(2):97－100.

［7］ 景彩霞，薛亚娟，艾彩莲，等.某医学院大学新生血清弓形虫抗体检测结果分析［J］.中国学校卫生，2009，30(6):549－550.

［8］ 李兆爱，张波.2180名中学生弓形虫感染调查［J］.中国热带医学，2006，6(8):1499－1501.

［9］ 刘润芳，王新彩.不孕不育人群弓形虫IgM抗体检测及结果分析［J］.河南科技大学学报:医学版，2007，25(4):279－281.

［10］ 罗晓明，吕冠明.1491例孕妇血清中弓形虫抗体IgG、IgM的检测结果分析［J］.当代医学，2009，9(15):157－158.