哈萨克族原发性高血压患者血浆Intermedin/adrenomedullin 2水平及其相关性研究

任宏强,杨志家,赵利,王忠

(石河子大学医学院第一附属医院,石河子832002)

哈萨克族原发性高血压患者血浆Intermedin/adrenomedullin 2水平及其相关性研究

任宏强,杨志家,赵利,王忠

(石河子大学医学院第一附属医院,石河子832002)

为探讨血浆Intermedin/adrenomedullin2(IMD/ADM2)水平与新疆哈萨克族(哈族)原发性高血压患者血压、血脂、血糖、肥胖等因素的相关性。根据高血压诊断标准,选取54例新疆哈族原发性高血压患者为观察组,52例哈族健康人群为对照组,测量血压(BP)、身高、体重、腰围(WC)、臀围(HC),抽取空腹静脉血测定血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),计算体重指数(BMI)、腰臀比(WHR)。结果显示:1)原发性高血压组血浆IMD/ADM2水平明显低于对照组(P<0.01);2)Pearson相关分析结果提示:血浆 IMD/ADM2水平与 SBP、DBP、FPG、LDL-C和 TG呈显著负相关,差异有统计学意义(P<0.05);3)多元逐步线性回归分析:以IMD/ADM2为因变量,以其它临床及生化指标为自变量进行多元逐步线性回归分析,结果提示,SBP、DBP和LDL-C是影响血浆IMD/ADM2水平的独立危险因素。由此可知,哈族原发性高血压患者血浆IMD/ADM2水平与血压和血脂水平存在相关性。

IMD/ADM2;高血压;哈萨克族

Abstract:To explore the relationship between intermedin/adrenomedullin2 levels and blood pressure,blood lipid level,fasting plasma glucose,obesity and other factors in patients with esse-ntial hypertension(EH)of Xinjiang Kazakhs.106 Kazakas were selected for the subjects.They were divided into two groups according to essential hypertension diagnostic code:EH group(n=54)and control group(n=52).Measurement of blood pressure,body height,body weight,waist circumference and hip.Fasting venous blood was drawn to detect the plasma IMD/ADM2 level,fasting plasma glucose(FPG),total cholesterol(TC),triglyceride(TG),high-density lipoprotein cholesterol(HDL-C),low-density lipoprotein cholesterol(LDL-C),calculating body mass index,waist-hip ratio(WHR).Results showed that:1)The Plasma IMD/ADM2 level in essential hypertension group was significantly lower than that in control group(P<0.01).2)Plasma IMD/ADM2 level was negatively and significantly correlated with SBP,DBP,FPG,LDL-C and TG in the subjects.3)Multiple regression analysis showed that SBP,DBP and LDL-C were independent dangerous factors to affect the Plasma IMD/ADM2 level.In aword:Plasma IMD/ADM2 level is related to blood pressure and blood-fat in patients with essential hypertension of xinjiang Kazakhs.

Key words:IMD/ADM2;hypertension;Kazakhs

大多数高血压的发生发展无单一或特定的病因,故称为原发性高血压,影响心排血量和外周阻力的多种因素可引起血压升高,其中,由于血管内皮功能失调导致血管活性下降引起血管外周阻力增加而引起的血压升高成为近年来研究的热点。降钙素基因相关肽(CGRP)是一种血管活性肽参与血管舒缩的调节,具有重要的病理生理意义,IMD/ADM2作为降钙素基因相关肽(CGRP)家族的新成员,推测其应具有同样的心血管保护作用。新疆哈萨克族是原发性高血压的高发民族,其循环血中 IMD/ADM2水平如何,未见报道。本研究测定了哈萨克族EH患者循环中 IMD/ADM2水平,并分析了其与高血压的危险因素如血脂、肥胖、血糖等的相关性,现报道如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象

根据流行病学调查资料,选取2009年2-7月在新疆博乐地区收集的哈萨克族人群血样106例为研究对象。根据高血压诊断标准分为两组:1)哈族高血压组54例,男28例,女 26例,年龄25～69岁,平均(47.5±13.2)岁;2)哈族健康对照组52例,男25例,女 27例 ,年龄24～70岁 ,平均(45.6±12.7)岁。两组间性别、年龄比较差异均无统计学意义(χ2=0.514,P=0.879;t=0.832,P=0.338)。

1.2 纳入及排除标准

1.2.1 纳入标准

高血压组纳入标准:根据原发性高血压诊断标准符合中国高血压防治指南(2005年修订版),收缩压≥140 mmHg和/或舒张压≥90 mmHg为高血压组。对照组纳入标准:收缩压≤140 mmHg且舒张压≤90 mmHg。实验前2周均未服用任何降压药。

1.2.2 排除标准

通过问卷调查、问诊、体格检查、心电图检查及抽血化验排除有明显靶器官损害的原发性高血压、继发性高血压、冠心病、糖尿病、慢性肝肾疾病、甲亢等疾病。各组受试者均愿意参加本研究,签署书面知情同意书,并能遵守试验要求。

1.3 研究方法

1.3.1 血压的测量

采用经过校正的汞柱式血压计,受试者在安静的房间内至少休息5 min后取坐位,右上肢平于心脏水平,测其肱动脉血压,连续测量3次,每次间隔至少2 min。分别采用 Korotkoff第Ⅰ音和第Ⅴ音(消失音)确定收缩压和舒张压。取3次平均值为个体值。

1.3.2 身高、体重、腰围(WC)、臀围(HC)的测量及计算体重指数(BMI)和腰臀比(WHR)

腰围即腋中线肋弓下缘与髂嵴最上缘之中点周径。臀围即两侧股骨粗隆水平面周径。体重指数(BMI)=体重/身高2(kg/m2),腰臀比(WHR)=腰围/臀围。

1.3.3 生化指标的测定

取空腹静脉血,测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),血糖(FPG)等指标,采用日立7170S全自动生化分析仪测定。

1.3.4 血浆IMD/ADM2含量的测定

取静脉血2 mL注入含有10%乙二胺四乙酸30μL和抑肽酶40μL的试管中混匀,4℃3500 r/min离心10 min后取血浆,放射免疫法(RIA)测血浆IMD/ADM2含量。试剂盒由美国 Phoenix Pharmaceuticals,Inc公司提供。

1.3.5 统计学处理

采用SPPS13.0软件包进行数据统计处理,数据以均数±标准差(±S)表示,两组间比较采用t检验,相关分析重要采用 Pearson相关分析和多元线性回归分析;计数资料采用卡方检验。结果以 P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 IMD/ADM2水平及临床生化指标的测定

两组临床及实验室资料见表1。由表1可知,原发性高血压组 IMD/ADM2水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。

表1 两组临床及实验室资料比较¯χ±STab.1 Comparifon of clinical and laboratory fingings between two groups

2.2 相关分析

IMD/ADM2水平与各临床指标的Pearson相关分析结果(表2)提示,血浆 IMD/ADM2水平与SBP、DBP、FPG、LDL-C和 TG呈显著负相关。

表2 IMD/ADM2水平与各临床指标的Pearson相关分析Fig.2 Pearson corieration analysis of the evels of IMD/ADM2 and different clinical indexes

2.3 回归分析

以 IMD/ADM2为因变量,以 Age、Height、Weight、WC、WHR、BMI、FPG、SBP、DBP、TG、TC、HDL-C、HC、LDL-C为自变量进行多元逐步线性回归分析,结果(表 3)提示 SBP、DBP和 LDL-C是影响血浆IMD/ADM2水平的独立因素。

表3 IMD/ADM2与各变量多元回归分析结果Fig.3 Result of a multiple regression analysis on IMD/ADM2 and each variable

3 讨论

Roh[1]等在2004年采用系统进化分析法从人类和其他脊椎动物基因组分析,发现了一种新的血管活性物质,由于它在腺垂体中叶(intermediate lobe of the anterior pituitary)表达丰富,故命名为intermedin(IMD)。同年日本学者 Takei等[2]发现了一个降钙素基因相关肽(calcitanin gene-related peptide,CGRP)超家族的新成员Adrenomedullin2(ADM2),经研究发现,两者氨基酸序列及生物活性完全相同,故认为是同一物质。人 IMD/ADM2基因定位于第22号染色体,编码由148个氨基酸残基组成的IMD前体蛋白,IMD前体分子上有多个蛋白酶切位点,可在体内剪切为含47个氨基酸的Intermedin l-47(IMD1-47)和含40个氨基酸的 Intermedin 8-47(IMD8-47)2个活性片断。亦可在prepro-IMD分子的第93和94位降解位点降解为prepro-AMD 95-147即IMD1-53。Yang等[3]研究发现IMD l-53不仅可刺激主动脉内原生性一氧化氮合酶(cNOS)活性、促进血管转运左型精氨酸,而且可促使阳离子氨基酸转运蛋白CA T-1、CAT-2B表达增强,促使主动脉内的NO产物增加。故推测该降钙素基因相关肽(CGRP)家族的新成员水平高低与血压具有一定的相关性。

本研究发现哈萨克族原发性高血压患者血浆IMD/ADM2水平明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01)这与 Takei等的研究结果类似,其通过小鼠静脉内注射ADM2后观察血压水平的变化发现,小鼠血压降低且可产生较肾上腺髓质素(ADM)更强的降压作用,故提出高血压小鼠血浆ADM2水平降低。同样,王曦等[4]对自发性高血压大鼠(SHR)通过微量渗透泵皮下持续给予ADM和ADM2,剂量均为500 ng/(kg·h),埋泵2周后,采用心室导管的方法测定血压和心功能的变化发现,注射ADM2可以显著降低SHR的血压并改善心功能。因此,两项研究均反证了SHR大鼠循环血中ADM2水平的下降,而且研究发现ADM2降压作用较ADM更加显著,其原因可能为:1)ADM2可与其自身受体相结合;2)ADM2可与CGRP家族共同的受体系统降钙素受体样受体/受体活性修饰蛋白(calcitonin receptor-like receptor/receptor activity modifying proteins,CRLR/RAMPs)结合;3)ADM2还可以与 CRLR/RAMP1、CRLR/RAMP2 或 CRLR/RAMP3中任何一个受体相结合而发挥作用[5]。故IMD/ADM2可产生更强的降压作用。

本实验 Pearson相关分析发现,血浆 IMD/ADM2水平与收缩压、舒张压、低密度脂蛋白、血糖和甘油三酯呈显著负相关。说明血管活性物质IMD/ADM2与收缩压、舒张压具有明显的相关性,而且其水平与高血压的危险因素血脂、血糖亦存在相关性,糖脂代谢紊乱可能通过对血管活性物质的影响从而影响血压水平。多元逐步回归分析发现,收缩压、舒张压和低密度脂蛋白胆固醇是影响血浆IMD/ADM2水平的独立危险因素。这与 Kuwasako等[6]的研究结果相符合,其发现ADM2与DBP呈显著负相关,静脉注射ADM2后血压下降,而且舒张压的降低较收缩压的降低更加显著。有关血脂与IMD/ADM2的关系,范小芳等[7]通过测定高脂血症性脂肪性肝病大鼠肝脏的表达发现,肝组织匀浆IMD浓度显著高于正常组,分析原因可能为多种调控因素如胰岛素水平、氧化应激、炎症反应等影响脂质的稳态,脂质水平升高,进而上调 IMD/ADM2水平,但其未发现血浆 IMD/ADM2水平在高脂血症组与对照组间的显著性差异,其推测 IMD/ADM2可能仅以旁分泌/自分泌形式在局部发挥作用,但此推论尚待进一步证实。本研究与其结果不同,分析发现,血浆 IMD/ADM2水平与LDL-C存在显著负相关,LDL-C可能对血浆IMD/ADM2有一定影响。本研究未发现其它血脂指标与 IMD/ADM2的相关性,可能确无关系或者可能为样本量较少不能体现真正的相关性的缘故。

总之,血浆 IMD/ADM2水平及其生物活性与高血压患者的血压和血脂具有相关性。但是,在IMD/ADM2的降压机制的研究中结论不尽相同,甚至相反,与 Marin等[5]的研究结果不同,Kobayashi[8]等则通过离体血管试验发现CRLR/RAMP l特异性抑制剂可抑制ADM2介导的舒张血管作用。CRLR/RAMP2、CRLR/RAMP 3的特异性抑制剂则不能抑制ADM2介导的舒张血管作用,因此认为ADM2扩血管作用是由CRLR/RAMP l复合体介导的。与 Yang等[3]的研究结果不同,Abdelrahman等[9]用NO合酶抑制剂L-NAME并不能改变IMD的降压作用,而应用神经节阻滞剂预处理则能增强 IMD的降压作用,故认为 IMD不是通过NO/L-arg途径而是通过拮抗交感神经系统活动而发挥降压作用。因此,深入研究 IMD/ADM2与高血压及其危险因素的关系以及IMD/ADM2的降压机制将有利于对高血压的防治提供新的思路。

[1]Roh J,Chang C L,Bhalla A,et al.Intermedin is a calcitonin/calcitonin gene-related peptide family peptide acting through the Calcitonin receptor-like recptor/receptor activity-modify ing protein receptor complexes[J].Biol Chem,2004(279):7264-7274.

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[3]Yang J H,Pan C S,Jia Y X,et al.Intermedinl-53 activates L-arginine/nitric oxide synthase/nitric oxide pathway in rat aortas[J].Biochem and Biophys Res Commun,2006(341):567-572.

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[5]Marin G M,Flemming J T,Steinhausen M.Atrial natriuretic peptide causes pre-glomerular vasodilatation and post-glomerular Vasoconstriction in rat kidney[J].Nature,1986(324):473-476.

[6]Kuwasako K,Cao Y N,Nagoshi Y,et a1.Characterization of the human calcitonin gene-related peptide receptor subtypes associated with receptoractivity-mdoifying proteins[J].Mol Pharmacol,2004,65(2):207-213.

[7]范小芳,田丽鲜,毛孙忠,等.高脂血症性脂肪性肝病大鼠肝脏Intermedin的表达[J].胃肠病学与肝病学杂志,2008,17(6):489-491.

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[9]Abdelrahman A M,David B,Lisa R S et al.Differential expression of components ofthe cardiomyocyte adrenomedullin/intermedin receptor system following blood pressure red-uction in Nodeificient hypertension[J].J PET Fast Forward,2005,12(3):105-112.

Plasma Intermedin/adrenomedullin2 Level and its Correlation in Patients with Essential Hypertension of Kazakhs

REN Hongqiang,YANG Zhijia,ZHAO Li,WANG Zhong
(The First Affiliated Hospital of the Medical College of Shihezi University,Shihezi 832002,China)

R540.4

A

1007-7383(2010)04-0461-04

2009-10-11

任宏强(1980-),男,住院医师,从事心血管内科的研究。