急性单核细胞白血病非特异性酯酶染色与CD14表达的比较
2010-10-12余蓉晖
余蓉晖
(湖南省常德市第一人民医院中心实验室,湖南常德 415000)
急性单核细胞白血病按FAB分型[1]分为M5a和M5b,尤其M5a在形态学上易与M1混淆,通过细胞酯酶染色及免疫分型等检查有助于M5的诊断。非特异性酯酶可存在于多种血细胞中,只有单核细胞对NaF敏感而被抑制。CD14则是单核细胞系特异性的表面标志。我们对31例AML-M5患者的NAE染色、NaF抑制试验和CD14表达情况进行回顾性分析,现总结如下:
1 资料与方法
1.1 一般资料
31例均经我科中心实验室确诊,根据FAB分型的急性单核细胞白血病M5a10例和M5b21例。
1.2 方法
非特异性酯酶染色应用文献[2]中的染色方法,基质液以α-醋酸萘酚(α-NAE,国产)为底物,重氮盐为坚固兰B,同时做NaF抑制试验。标本均为骨髓细胞涂片。免疫学分型应用流式细胞术,仪器和试剂均来自于美国BD公司。
1.3 结果判定
α-NAE染色结果阳性反应为细质内呈灰黑色弥漫性或黑色颗粒沉淀,以计数100个原幼单核细胞阳性率作为检测结果;NaF抑制试验,以计数抑制后阳性率作为检测结果。
2 结果
2.1 α-NAE染色结果
31例患者α-NAE均呈阳性反应,最高阳性率达96%(M5a),最低阳性率为13%(M5b),并且所有病例均对NaF敏感而被抑制。α-NAE染色结果阳性率明显,高于NaF抑制后的阳性率,差异具有统计学意义(P<0.01)。
2.2 免疫分型检测结果
31例AML-M5患者CD14表达(>20%)8例,弱表达(<20%)1例,均为M5b型,其表达率为22.65%,见表1。
表1 31例AML-M5患者的免疫分型结果(例)
3 讨论
细胞化学染色是应用涂片染色的方法来研究细胞化学成分的性质,包括各种蛋白质、酶类、脂类、糖类、无机盐和核酸等。它能在形态学的基础上进一鉴别各类血液细胞,为某些血液病(白血病、淋巴瘤、贫血、血红蛋白病及组织细胞疾病)的诊断和鉴别治疗提供依据。酯酶是一组具有较大PH范围的水解酶类,在骨髓各系细胞中分布不尽相同,按其对不同脂肪酸水解选择性不同,可分为非特异性酯酶和特异性酯酶两大类。非特异性酯酶可有在于多种血细胞中,只有单核细胞系对NaF敏感而被抑制。我们应用中性非特异性酯染色法,结果显示,此方法有较高的敏感性和特异性,对以FAB分型区分粒系和单核系白血病具有重要的诊断和鉴别诊断价值。随着单克隆抗体(McAb)技术不断发展,一些免疫标志物在白血病分型中有较高的特异性[3],CD14特异性较好,但敏感性较差。本组病例CD14表达率为22.65%,与国内报导道的20%左右的表达率相一致。我们还发现对分化较低的单核细胞即M5a,α-NAE染色阳性反映较强,胞质呈黑色颗粒状沉淀(+++~++++);而CD14表达则相反,对分化较好的单核细胞即M5b较为敏感。
[1]张文南.血液病诊断及疗效标准[M].第2版.北京:科学出版社,1997:174-175.
[2]李家增,王鸿利,韩忠朝.血液实验学[M].上海:上海科学技术出版社,1997:59-60.
[3]汤美华,周 宇,沈德诚,等.从AML细胞表面标记特点看AML、ALL鉴别时单招的选择[J].中华血液学杂志,1994,15:466-468.