OSAHS患者外周血Th1/Th2细胞比例变化及临床意义

黄 建

(武警重庆市总队医院呼吸内科 400061)

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS)是最常见的一种睡眠呼吸障碍疾病,OSAHS患者在睡眠过程中间歇性上气道阻塞,出现间歇性低氧血症,导致氧化应激和炎症反应,产生的炎症因子进一步加重气道的阻塞和低氧血症,导致病情加重和心血管并发症的发生[1-2]。

T淋巴细胞在调节炎症反应中起到了重要的作用,其中特别是辅助性T淋巴细胞(Th)更为受到关注[3]。目前研究认为Th亚群的激活以及1型辅助性 T细胞/2型辅助性T细胞(Th1/Th2)比例的失衡,参与了动脉粥样硬化、炎症性肠病、支气管哮喘等多种炎症反应相关疾病的病理过程,但其在OSAHS发病机制中的作用尚不完全清楚。为此,本研究通过检测OSAHS患者外周血Th1/Th2细胞比例变化,探讨Th亚群在OSAHS发病中的可能作用。

“在此次机构改革中，市场监管总局单设了特殊食品安全监管司，就是加强特殊食品安全监管的重要举措。”国家市场监管总局特殊食品安全监管司司长周石平表示，特殊食品安全监管关键要把好注册关、监管关和整治关。

1 对象与方法

1.1 研究对象 连续选取2008年11月至2009年12月在本院经Compumedic S型多导睡眠监测诊断为OSAHS的患者60例为OSAHS组,年龄29～ 70岁,平均(46.21±12.45)岁,其中男48例,女 12例,体质量指数(BMI)为28.98±3.36。据2003年《阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征诊治指南》的诊断标准[4],将OSAHS组分为轻度组[呼吸暂停低通气指数(AHI)为5～19次/h]18例、中度组(AHI为 20～39次/h)22例、重度组(AHI≥40次/h)20例。对照组为 20例年龄、性别、BMI匹配、临床疑似 OSAHS但多导睡眠监测AHI＜5次/h者。

1.2 排除标准 (1)有高血压、冠心病、脑血管意外疾病史;(2)有糖尿病史;(3)有恶性肿瘤、甲状腺功能减低症、肾上腺皮质增生症等内分泌疾病史;(4)2周内有感染、创伤及手术史;(5)近2周内使用糖皮质激素;(6)长期服用非甾体类抗炎药;(7)口服抗凝药病史。本研究符合本单位临床医学试验伦理委员会标准,并得到批准。

1.4 Th亚群细胞比例测定 用流式细胞检测方法,分别用CD4+IFN-γ和CD4+L-4+双阳性细胞的比例代表 Th1和Th2细胞的水平。所有患者行外周静脉无菌穿刺,抽取外周血2 mL肝素抗凝,加入等量淋巴细胞分离液(天津中国医科院血液所),离心后分离外周血单个核细胞(PBMC),经 PBS洗涤后,加红细胞裂解液裂解残余红细胞,离心、去上清液并经PBS洗涤后,制成细胞悬液,调整细胞浓度为不小于1×106/L。将细胞悬液300μL等分到测定管和对照管中,测定管中加入PE标记的CD4单抗10μL,用破膜剂进行细胞打孔后加入FITC标记的IFN-γ单抗10μL和 PE-Cy5标记的 L-4单抗10μL;对照管分别加入相应荧光标记的同型对照抗体,用流式细胞仪检测CD4+IFN-γ和CD4+L-4+双阳性细胞的比例(%)。流式单抗购自EB公司,流式细胞仪为PACS-CALBUR型。

表1 各组一般临床资料比较

1.3 睡眠呼吸监测 采用多导睡眠监测仪进行整夜多导睡眠图监测,包括脑电图、心电图、眼动图、下颌及双侧胫前肌动图、口鼻气流、胸腹式呼吸和脉搏血氧饱和度等。所有记录数据均根据标准进行人工评估。口鼻气流中止大于10 s定为呼吸暂停,气流降低超过正常气流强度的50%以上伴有脉搏血氧饱和度(Sp O2)下降4%以上为低通气。呼吸暂停或低通气事件发生时,伴矛盾胸腹呼吸运动定为OSAHS。

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2 结 果

2.1 各组一般资料比较 各组年龄、男性比例、BMI比较差异无统计学意义(P＞0.05)。OSAHS各亚组与对照组AHI、SpO2差异有统计学意义(P＜0.05),见表 1。

2.2 各组Th细胞亚群比较 OSAHS组Th1比例明显高于对照组,差异有统计学意义[(18.2±5.4)%和(12.5±3.8)%,P＜0.05)],且与对照组和轻度OSAHS组相比,重度OSAHS组Th1比例明显增高(P＜0.01),中度OSAHS组也有增高趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05)。Th2比例在各组间差异均无统计学意义(P＞0.05),见表2。Pearson相关分析显示OSAHS患者Th1细胞比例与AHI呈正相关(r=0.668,P＜0.01)。

表2 各组Th细胞亚群比较

3 讨 论

有研究表明,OSAHS患者血清促炎因子 IL-8水平与AHI呈正相关[6],体内促炎因子 IL-6升高[7],升高的 IL-6又能促进T淋巴细胞和单核细胞等免疫细胞释放IFN-γ、IL-1和TNF-α等促炎性细胞因子。同时,王智刚等[8]发现OSAHS患者TNF-α水平显著升高,且与疾病严重程度呈正相关。这些研究表明,OSAHS患者促炎因子增加,另一方面,有学者报道OSAHS患者血清抗炎因子IL-10水平明显降低,与AHI呈负相关[9]。改善OSAHS患者缺氧的CPAP治疗能减少 LTB4、TNF-α及Hs-CRP的生成,增加 IL-10的生成,降低 OSAHS所致的局部气道和系统性炎症反应,提高抗炎因子水平,预防或治疗OSAHS的并发症[10]。OSAHS患者炎症反应增强,抗炎因子水平降低,OSAHS患者外周血中多种细胞因子水平均发生变化,免疫细胞和炎症反应可能参与OSAHS的发病或疾病的进展。

OSAHS是临床上常见并具有一定潜在危险的疾病。近年来,随着睡眠多导记录仪的开发和临床应用,对本病的认识逐步深入,但是其确切发病机制尚不清楚。OSAHS患者由于慢性缺氧导致低氧血症、高碳酸血症及睡眠质量低下引起多系统、多器官的慢性损伤,其中OSAHS对细胞因子及炎症反应的影响成为近年来研究的热点之一[5]。

（4）止水带压板采用“凵”型钢板，在螺帽和压板之间设置弹性垫圈，调整定位后拧紧。螺帽以上紧为准，原则上紧固力为3kg，一般不宜超过5kg，但不应小于2.5kg。螺栓外露部分采用塑料套保护。此种钢板刚度较“一”型成倍增加，拧紧螺栓时不会因压板变形而产生漏水空洞。

通过以上研究，本文认为当前正处于转型期的中国不应只将经济增长、收入增加作为国家追求的终极目标，而应该在经济取得一定成就后，逐渐将视角转移到增强国民实际幸福感这一问题上。而提高国民幸福感除了采取措施提高收入外，改善医疗、教育、就业等民生问题显得十分重要。另外，由于个体之间对于幸福的感受存在异质性，政策的制定和实施应该做到有差别且具针对性，应该更多关注弱势群体和幸福感低的群体，提升他们的幸福度，以维护社会的稳定和经济的可持续性发展。

辅助性T淋巴细胞通过分泌细胞因子起到调节炎症反应的作用。细胞因子根据其功能不同分为两大类:一类为促炎性细胞因子,主要由 Th1细胞分泌,包括 TNF-α、INF-γ、IL-2等,与细胞免疫有关;另一类为抑炎因子,主要由Th2细胞分泌,如IL-10、TGF-β、IL-4等,在终止病理免疫反应中起重要作用。正常人Th1/Th2类细胞因子相互依存和制约,保持动态平衡,维持机体正常的细胞免疫和体液免疫。有研究表明IL-6、TNF等细胞因子可能作为睡眠内源性调节因素,参与睡眠紊乱的发生,其分泌也随睡眠有一定的昼夜节律性[11],一旦在外来因素刺激下细胞因子水平发生变化,这一平衡就会被打破,引起免疫功能紊乱,导致睡眠紊乱及对机体产生损伤。

本研究发现OSAHS患者Th1细胞激活程度显著增高,而Th2细胞没有显著变化,导致Th1/Th2比例失衡,且Th1比例与OSAHS的严重程度呈正相关。提示由Th1比例增高导致的Th1/Th2比例失衡可能在OSAHS的发生、发展中发挥一定的作用。但这种变化与OSAHS的因果关系及内在的联系尚不清楚,有待进一步研究。

[1] 汪武,姚红兵.儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的治疗现状[J].重庆医学,2009,38(9):1047.

[2] 夏秋萍,陈建荣,蔡映云,等.阻塞性睡眠呼吸暂停综合征呼出气冷凝液中炎症因子检测的研究进展[J].国际呼吸杂志,2008,28:146.

[3] Laurat E,Poirier B,Tupin E,et al.Invivo down regulation of T helper cell 1 immuneresponses reduces atherogenesis in apolipoprotein E-knockout mice[J].Circulation,2007,110(2):197.

[4] 中华医学会呼吸病学分会睡眠呼吸疾病学组.阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征诊治指南[J].中华内科杂志,2003,43(8):594.

[5] Berger KI,Goldring RM,Rapoport DM.Obesity hypoventilation syndrome[J].Semin Respir Crit Care Med,2009,30(3):253.

[6] 包海荣,余勤,刘晓菊.阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者血清白细胞介素8和单核细胞趋化蛋白1水平的变化及意义[J].临床荟萃,2004,19(20):1156.

[7] Yokoe T,Minoguchi K,Matsuo H,et al.Elevated levels of C-reactiveprotein and interleukin-6 in patients with obstructive sleep apnea syndrome are decreased by nasal continuous positive air way pressure[J].Circulation,2003,107(8):1129.

[8] 王智刚,张希龙,李翀,等.阻塞性睡眠呼吸暂停低通气患者血浆TNF-α水平的变化[J].江苏医药,2009,35(9):1005.

[9] Ohga E,Tomita T,Wada H,et al.Effects of obstructive sleep apnea on circulating ICAM-1,IL-8,and MCP-1[J].J Appl Physiol,2003,94(1):179.

[10]Ryan S,Taylor CT,McNicholas WT.Predictors of elevated nuclear fact or kappaB dependent genes in obstructive sleep apnea syndrome[J].Am J Respir Crit Care Med,2006,174:824.

[11]Arter JL,Chi DS.Obstructive sleep apnea,inflammation,and cardiopulmonary disease[J].Front Biosci,2004,9(9):2892.