上海地区多种动物莱姆病的血清学调查*

刘佩红,徐 锋,沈莉萍,葛菲菲,王 建

(上海市动物疫病预防控制中心,上海 201103)

莱姆病(Lyme disease,LD)是由伯氏疏螺旋体引起的一种蜱传自然疫源性人畜共患传染病。我国于1986年首次在黑龙江省海林县林区发现该病[1]。血清流行病学调查表明,我国至少有27个省(直辖市、自治区)的人群和动物群中存在伯氏疏螺旋体感染,病原学证实其中18个省(直辖市、自治区)有莱姆病自然疫源地的存在,9种蜱携带伯氏疏螺旋体[2-3]。很多与人类关系密切的动物均有发生此病的报道,已证实约有40多种哺乳动物和鸟类为伯氏疏螺旋体的宿主[4-5]。为初步了解上海地区动物群中伯氏疏螺旋体的感染状况,探讨动物在莱姆病流行环节中的作用,本研究针对与人类关系密切的猪、牛、羊、马、犬、鸡、鸭和野鸟等多种动物,共 870份样品进行了莱姆病血清学检测。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品来源与处理 猪血清采自3个区的规模猪场,每场15份,共45份;牛血清采自3个区的规模牛场,每场 15份,共45份;羊血清采自3个区(县)的散养户,每区20份,共 60份;马血清采自4个区的养马场或游乐园,其中养马场41份,游乐园13份,共54份;鸡血清采自4个区的规模场和散养户,其中规模场58份,散养户 44份,共102份;鸭血清采自4个区的7个专业养殖户,共86份;野鸟血清共37份,其中动物园火烈鸟3份、野鸟栖息地野鸭24份、野鸟栖息地不知名野鸟12份;犬血清共374份,其中家养健康宠物犬292份、门诊发病宠物犬24份、养殖场犬 45份、留验所犬 12份。血液自然凝固析出血清后,离心取血清备用。

1.1.2 主要试剂 VIDAS Lyme IgG和IgM检测试剂盒(LYT)由法国梅里埃公司生产,批号090325-0。

1.2 方法

1.2.1 原理 试剂盒与法国梅里埃公司生产的全自动定量免疫荧光酶标仪(VIDAS)一起使用,采用酶联荧光测定技术(ELFA)定性检测血清中莱姆病感染总抗体IgG和IgM的量。

1.2.2 步骤 从冰箱中取出试剂盒并使其放置至室温,至少30 min;将 LYT试剂条和固相包被针(SPR)放置于VIDAS载物盘上,在VIDAS电脑上按使用手册输入相关信息;将标准品、对照和样品用涡旋混合器完全混匀,分别取100 μ L至样品孔,插入SPR和试剂条至屏幕指示位置,按使用手册开始操作,仪器自动控制所有操作步骤,大约35 min内可得到结果;操作结束后,将使用过的SPR和试剂条高压灭菌处理。

2 结果

猪、牛、羊、鸡、鸭和野鸟中均未检测到莱姆病感染抗体。54份马血清中检测到LD抗体阳性10份,阳性率18.5%,其中2个养马场均有阳性检出,阳性率17.07%;1个游乐场为阴性,1个游乐场阳性检出率25%;374份犬血清中检测到LD抗体阳性46份,阳性率12.3%,其中292份家养健康宠物犬的阳性率为9.93%;24份门诊发病宠物犬阳性率为25%,45份养殖场犬阳性率为8.89%,12份留验所犬阳性率为58.33%(表1)。

表1 不同动物莱姆病血清学检测结果Table 1 The serologic results of Lyme disease from different animal species

3 讨论

自1975年Streere发现莱姆病,1982年Burgdorferi等从已知莱姆病流行区采集的硬蜱中分离到伯氏疏螺旋体以来,目前已知该病分布于五大洲30多个国家,估计年发病30余万人[6]。在美国尤为严重,并有第二“艾滋病”之称,目前仍有不断增多的趋势。1992年,世界卫生组织(WHO)将此病列为重点防治研究对象[7-8]。我国于1986年首次在黑龙江海林县林区发现该病,到目前已有20多个省(直辖市、自治区)发现有此病的分布及报告,其危害已日益受到人们的关注。

蜱是莱姆病的重要传播媒介,我国地跨古北界和东洋界两大区系,分布的蜱种较多,已从9种蜱中分离到莱姆病病原体,但目前能够肯定为媒介的只有全沟硬蜱。我国全沟硬蜱的宿主动物范围广泛,成蜱寄生于大中型家畜及野生动物,包括偶蹄类、食肉类、啮齿类。幼虫和若蜱寄生于小型哺乳类和鸟类[9]。万康林等对我国20个省(直辖市、自治区)的莱姆病调查结果表明,犬的感染率在38%～60%,牛在18%～32%,羊在17%～61%[10]。河北承德地区牛、羊的感染率分别为23.3%和30%,是承德地区莱姆病的重要贮存宿主[11]。天津地区牛、羊、犬的感染率分别为8.14%、8.80%和5.43%[12]。

本研究对上海地区与人类关系较密切的猪、牛、羊、马、犬、鸡、鸭和野鸟等多种动物进行了莱姆病血清学检测,结果表明,上海地区动物群中伯氏疏螺旋体的感染率相对较低,牛、羊、猪、鸡、鸭和野鸟中均未检出莱姆病抗体。牛、羊的感染情况与国内其他省市调查结果有所不同,猪、鸡、鸭和野鸟血清流行病学调查方面的报道较少。但国外已从画眉等野鸟体内分离到病原体[13],且由于野鸟可以长距离飞行传播莱姆病而备受关注,上海地处三大候鸟迁徙路线之一,野鸟在疫病传播中的作用不容忽视。本次研究因样品采集所限,野鸟的样品相对较少,在下一步的研究中还将扩大覆盖面、增加样本量,以更全面地了解野鸟的感染状况。

马对莱姆病有一定的感染性,感染率为18.5%。上海地区马匹养殖量很少,但在本次调查的一个游乐场中,为数不多的马匹中有25%的感染率,因游乐场马匹与游人接触密切,应引起重视。

犬的感染率为12.3%,其中留验所犬感染率最高,为58.3%。留验所收养了大量流浪犬和非法养殖犬,可能由于饲养密度、饲养环境等因素的影响,造成了该病的传播和感染;家养健康宠物犬和养殖场犬中也检出了较高的感染率,提示在莱姆病的传播中可能起重要作用。国内外大量研究都已证实,犬是莱姆病的重要宿主,一方面犬作为宠物与人类关系密切,另一方面,莱姆病抗体在犬体内持续时间较短,而人和其他动物血清抗体阳性可持续几年,通过监视犬血清抗体阳性率可以很好地反映当前特定地区莱姆病的实际发病风险率[14-15],许多研究者提议将犬作为莱姆病潜在区探测发病风险的“哨兵动物”。因此,对犬的监控是今后工作的重点。

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