丙型肝炎病毒核心抗原检测对临床诊断的价值

王丽娜

青岛市传染病医院（266033）

丙型病毒性肝炎是严重危害人类健康的传染性疾病之一。据统计全球已有1.7亿人感染丙型肝炎病毒（HCV），其感染率为1%～5%，我国的HCV感染率大约为3.2%，其主要是通过血液传播。由于HCV感染后，多数感染者都是无症状的，仅少数引起急性肝炎，病情会在不知不觉中持续进展。同时，人体并不产生对丙型肝炎病毒的免疫保护作用（包括同源和异源的），因此目前尚无有效的疫苗；还有人使用非特异性的免疫球蛋白进行被动免疫，免疫效果亦欠佳。不幸的是，HCV感染后形成慢性感染的概率很高，且有相当比例患者会发展成肝硬化、肝癌[1]。然而，我国筛查丙型肝炎病毒的主要方法是通过酶联免疫吸附法（ELISA）检测丙型肝炎抗体（HCV-Ab），HCV-Ab是在HCV感染后6～12周（窗口期）才出现。为此，能尽早检出HCV感染，对及时有效的阻断HCV的传播是极其重要的。HCV核心抗原（HCV-cAg）的检测能使HCV检测的窗口期缩短到15 d[2]，进而大大降低了HCV经血液传播的风险。本文对住院输血前及门诊的部分患者共340例，同时进行HCV-cAg、HCV-Ab和HCV-RNA检测，从而研究游离核心抗原试剂在HCV感染筛查时的有效性。

1 材料与方法

1.1 研究对象

1.1.1 HCV-Ab阳性标本

采自笔者所在医院2009年8月～2010年8月经HCV-Ab检测阳性的血液标本80例，分离血清并置-20℃冰箱保存。

1.1.2 HCV-Ab阴性标本

采自笔者所在医院2009年8月～2010年8月住院输血前及门诊检查的血液标本，随机抽取260例，这部分患者采用双盲法同时检测HCVAb和HCV-cAg。

1.2 方法与试剂

1.2.1 HCV-Ab检测

应用的丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒由上海科华生物工程股份有限公司生产，严格按照说明书上的方法操作，阳性结果经二次复检。

1.2.2 HCV-cAg检测

应用的HCV-cAg ELISA试剂盒由湖南景达基因公司生产，严格按说明书上的方法操作，阳性结果经二次复检。

1.2.3 HCV- RNA检测

应用的丙型肝炎病毒PCR检测试剂盒由深圳匹基生物工程有限公司生产，严格按说明书上的方法操作。

2 结 果

260例未知标本的检测HCV-Ab均为阴性，HCV-cAg阳性5例，阳性率1.9%，其中HCV-RNA 4例；80例HCV-Ab阳性的样本检出HCV-cAg阳性33例，阳性率为41.25%；HCV-RNA 47例，HCV-cAg与HCVRNA符合率为70.21%（33/47），见表1。

表1 HCV-Ab、HCV-cAg和HCV-RNA检测结果

3 讨 论

称为“沉默杀手”的传染性疾病——丙型肝炎越来越受到医学界的重视。该病目前尚无特殊疗法，主要采取保肝治疗，因此，及时准确地检测出体内感染丙型肝炎病毒，就能在很大程度上减轻肝脏的损害。然而，HCV感染者的血液中病毒含量极低，还没有适当的方法可以直接检测病毒。同时，由于丙型肝炎病毒在机体复制增殖时，存在HCV-Ab和HCV-cAg浓度相互主导转换的一个过程。感染初期，机体内存在一定浓度的HCV-cAg，刺激机体产生HCVAb，几乎所有的游离HCV-Ab与结合成免疫复合物，此时抗原过量，而酶联免疫法只能检测游离状态的HCV-Ab或HCV-cAg，因此HCV-Ab检测为阴性，HCV-cAg为阳性[3]。随着病程的进展，HCVAb的浓度升高，游离的HCV-cAg浓度下降，抗体与抗原结合后，机体内仍存在一定浓度游离的HCV-Ab，可被酶联法检测出来，此时HCV-Ab和HCV-cAg的检测均为弱阳性。

病程的进一步发展，HCV-Ab继续升高，体内绝大部分的HCV-cAg与HCV-Ab结合形成免疫复合物，游离的HCV-cAg低于检测下限转为阴性，而HCV-Ab的浓度进一步升高，检测才为阳性。因此，在感染早期仅仅单纯依靠HCV-Ab的检测进行筛查及早期诊断丙型肝炎感染就有很大局限性。本文260例HCV-Ab阴性的临床样本中，检出HCV-cAg阳性5例。表明有1.9%的患者因在“窗口期”测不出HCV-Ab而被漏诊。本实验应用的湖南景达基因公司生产的ELISA试剂，是采用单克隆抗体制备的，加之其已对样本稀释液进行了改进，使待测血清中丙型肝炎病毒的外壳破坏较完全，核心抗原暴露，保证抗原抗体能充分接触，从而提高了检测的敏感性，并且ELISA 法简便、快速，几乎所有的实验室无需再增加特殊设备即可进行检测。

260例HCV-Ab阴性中，检出HCV－cAg阳性5例，其中HCV-PCR 4例。反转录多聚酶链反应（RT- PCR）是一个非常敏感的方法，HCVRNA暴露后的1～2周就可被检出[4]。在某些HCV感染恢复期的患者或免疫功能低下的HCV感染者中，HCV-Ab可能会逐渐下降到检测限以下[5]或持续阴性，这时，HCV-RNA的检测是感染HCV的惟一证据。在被测的80例丙型肝炎样本中HCV-cAg阳性33例，HCV-RNA阳性47例，符合率为70.21%（33/47）。由于RT- PCR技术较复杂，对试验环境和条件的要求较高，还有较多实验室不能接受和推广，而HCV－cAg也是HCV感染者体内出现较早的感染标志，几乎与HCV－RNA同时出现，因此丙型肝炎抗原不失为早期检测是否感染丙型肝炎的最佳手段之一。综上所述，HCV－cAg检测可作为HCV-Ab检测的补充试剂，联合应用可大大提高丙型肝炎的诊断率，还可应用于输血筛查，降低检测成本，但其敏感性和特异性有待提高。

[1]王齐欣,魏来,高燕等.丙型肝炎病毒感染自然过程中的准种变化[J].中华传染病杂志,2004,22(5)：323-324.

[2]Lee SR,Peterson,J,N iven P,et al. Efficacy of a hepatitis Cvirns,co re antigen enzyme linked im muo sirbent assay fo r the identifica2 tion of‘w indow phas’blood donatisons[J].Jvox Sanguinis,2001,80 (3)：19-22.

[3]王少敏,陈杰,谢圣高.慢性丙型病毒性肝炎患者血清sICAM-1与肝组织病理变化的相关性研究[J].中国当代医药,2009,16(25)：124-125.

[4]BuschMP,Kleinman SH,Jackson B,et al.Nucleic acid amp lificationtesting of blood donors for transfusion-tranmitted infectious diseases[J].Transfusion,2000,40：143-1591.

[5]Alter HJ,Seeff LB.Recovery persistence and sequelae in hepatitis Cvirus infection： a perspective on long - term outcome[J].Semin LiverDis,2000,20：17-351.