胡萝卜籽粗提物抗氧化性及稳定性研究

李锋，王伟

（1.新疆农业大学化学工程学院，新疆乌鲁木齐830052；2.新疆农业大学食品科学学院，新疆乌鲁木齐830052)

胡萝卜籽粗提物抗氧化性及稳定性研究

李锋1，王伟2

（1.新疆农业大学化学工程学院，新疆乌鲁木齐830052；2.新疆农业大学食品科学学院，新疆乌鲁木齐830052)

用分光光度法对胡萝卜籽粗提物的抗氧化性进行初步研究。考察胡萝卜籽粗提物的总还原能力，对羟自由基（·OH）和过氧化氢（H2O2）的清除能力，以及在不同条件下胡萝卜籽粗提物的稳定性。结果表明：胡萝卜籽粗提物有较强的还原能力，对·OH和H2O2均具有较好的清除作用。该粗提物的光稳定性不好，在酸性溶液中能稳定存在，在50℃以下有较好的热稳定性。

胡萝卜籽；提取方法；抗氧化性；稳定性

Abstract:The antioxidant activity of extracts from carrot seeds were studied with photometric method.The scavenging quality of hydroxyl free radical（·OH）and Hydrogen Peroxide（H2O2），the total reducing power and its stability in different conditions were studied.The results showed：the crude extract of carrot seeds have good reducing power and have good scavenging effect on·OH，H2O2.It can be stabled in aicd solution and under 50℃.The effect of light on stability is not very well.

Key words：carrot seeds;extract methods;antioxidant activity;stability

关于胡萝卜籽的记载始于明代《本草纲目》，胡萝卜籽为伞型科植物胡萝卜的果实，含有黄酮类，脂肪油（11%～13%)，脂肪油中有油酸，亚油酸系的甘油酯，胡萝卜甾醇等。胡萝卜籽中的总黄酮具有解痉作用，扩张冠状血管，对动脉粥样硬化，心绞痛之冠状动脉机能不足的患者有很好疗效[1]。本文用分光光度法对胡萝卜籽粗提物的抗氧化性及稳定性进行了研究，以期为胡萝卜籽的进一步开发利用提供试验参考。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

胡萝卜籽：购于新疆维吾尔医医院；95%乙醇、水杨酸、硫酸亚铁、30%过氧化氢、铁氰化钾[K3Fe（CN）6]、三氯乙酸（TCA)、三氯化铁（FeCl3)、抗坏血酸（VC)、磷酸盐缓冲溶液（PBS）等均为分析纯试剂。

TU-1810紫外可见分光光度计：北京普析通用仪器有限责任公司；PHS—25C数显型酸度计：上海宇隆仪器有限公司。

1.2 方法

1.2.1 粗提物的提取[2]

称取干燥粉碎的胡萝卜籽粉末10 g，样品用滤纸包好，装入索氏提取器内，加入95%乙醇100 mL，在90℃下回流提取24 h，然后将液体冷却至室温，过滤，弃去滤渣，滤液减压浓缩，得粗提物。

1.2.2 胡萝卜籽粗提物抗氧化活性的测定

1.2.2.1 还原能力的测定[3]

用95%乙醇配制1.0 g/L的胡萝卜籽提取物溶液，向10 mL具塞试管中分别加入不同体积的胡萝卜籽提取物溶液，然后每管加2.5 mL磷酸盐缓冲溶液（0.2 mol/L，pH=6.6)和 2.5 mL 1%（质量分数）的 K3Fe（CN）6混匀，50℃水浴加热20 min。然后加入1 mL质量分数为10%的三氯乙酸，2.5 mL蒸馏水，0.1%FeCl3溶液0.5 mL，充分混匀后，以试剂空白作参比溶液，于700 nm处测定溶液吸光度值。以不同浓度的VC溶液替代胡萝卜籽提取物溶液，其它过程同上，测定溶液的吸光度。

1.2.2.2 清除H2O2能力的测定[4]

在10 mL具塞试管中，加入由50 mmol/L磷酸盐缓冲溶液（pH=7.4)配制的0.5 mmol/L H2O2溶液2.8 mL后，再加入0.4 mL不同浓度的胡萝卜籽提取物溶液，反应10 min后，于230 nm处测定吸光度值，以同浓度的胡萝卜籽提取物溶液为对照，并计算清除率：

式中：A0为不含样品吸光度值；Ai为含样品的吸光度值。

1.2.2.3 清除羟自由基（·OH）能力的测定[5]

在10mL具塞试管中，加入2mLFeSO4（7.5mmol/L）溶液、2 mL水杨酸（6 mmol/L)，0.4 mL不同浓度的胡萝卜籽提取物溶液。随后加入2 mL H2O2（6 mmol/L）启动反应，于37℃恒温水浴中放置1 h，测定溶液在510 nm处的吸光度值，以同浓度的胡萝卜籽提取物溶液为对照，并计算清除率：

式中：A0为不含样品，但含有H2O2的吸光度值；Ax为含有样品也含有H2O2的吸光度值。

1.2.3 粗提物的稳定性试验[6]

配制1.0 g/L的胡萝卜籽提取物溶液，在不同波长下测定吸光度，确定最大吸收波长，测定该溶液在不同时间间隔内、不同温度（20、50、70、90 ℃)、不同 pH下在最大吸收波长处的吸光度。

2 结果与分析

2.1 粗提物抗氧化性的测定

2.1.1 还原能力的测定

测定不同浓度胡萝卜籽提取物溶液与VC溶液在700 nm处的吸光度，所得结果如图1。

由图1可知，随着胡萝卜籽提取液和VC溶液浓度的增大，吸光度值逐渐升高，表明还原能力随浓度的增大而增强，且通过和同浓度的VC作对比，胡萝卜籽提取液的还原能力与VC相当。

2.1.2 清除H2O2能力的测定

根据1.2.2.2方法，试验测定了不同浓度的胡萝卜籽提取液对H2O2的清除能力，清除率与提取液浓度的关系如图2所示。

从图2可以看出，在试验浓度范围内，随着提取液浓度的增大，其对H2O2的清除率也增大，表明胡萝卜籽提取液对H2O2的清除能力与其浓度呈明显的正量效关系。

2.1.3 清除羟自由基（·OH）能力的测定

根据1.2.2.3的试验方法，将不同浓度胡萝卜籽提物液对羟自由基清除能力的结果绘制如图3。

从图3可看出，在试验浓度范围内，随着提取液浓度的增大，对羟自由基清除率也逐渐增大，当浓度达到0.07 g/L时，清除率为48.2%，再增大提取液浓度，清除率增长缓慢，说明用量接近饱和。

2.2 粗提物的稳定性研究

2.2.1 最大吸收波长的测定

配制浓度为0.01 g/L的胡萝卜籽提取液，用分光光度法测定其在不同波长下的吸光度，结果见图4。

显然，波长为240 nm时，吸光度最大。

2.2.2 粗提物的光稳定性

配制浓度为0.01 g/L的胡萝卜籽提取液，置于自然光下，定期测其吸光度，结果见图5。

由图5可知，粗提物的光稳定性较差，在18 d内吸光度由0.626减小到0.555，变化了11.3%。

2.2.3 粗提物的热稳定性

配制浓度为0.01 g/L的胡萝卜籽提取液，分别在20、50、70、90℃ 加热，每隔 30 min取样测吸光度，结果见图6。

由图6可以看出，当在20、50℃加热180 min，吸光度分别变化了2.1%和7.7%，变化较小，70℃时变化了17.3%，90℃时变化了74.9%。说明在50℃以下有较好的热稳定性，在50℃以上时热稳定性下降，尤其在90℃加热，30 min内吸光度就发生很大改变，而后变化不大。

2.2.4 粗提物对酸碱度的稳定性

向浓度为0.01 g/L的提取液中分别滴加0.2 mol/L HCl和NaOH溶液，使提取液的pH分别为1、2、3、4、

由图7可以看出，当pH从1增大到6时，吸光度从0.499到0.520，变化了4.2%，当pH从6增加到7时，吸光度从0.520减小到0.438，变化了15.8%，胡萝卜籽粗提液的稳定性降低。

3 结论

胡萝卜籽提取物对羟自由基、过氧化氢都有较好的清除作用，有较强的还原能力，其抗氧化能力及清除作用与提取物浓度成正量效关系。

胡萝卜籽提取物对光稳定性不好，当温度超过50℃，热稳定性下降，而在酸性条件下有较好的稳定性。因此，该提取物在低温、避光条件下保存较好。

[1]江苏新医学院.中药大辞典：下卷[M].上海：上海科学技术出版社，2004：1552

[2]马利华，秦卫东，宋慧，等.不同提取方法对牛蒡中类胡萝卜素含量的影响[J].食品科技，2007(1)：80-84

[3]徐清萍，敖宗华，陶文沂.恒顺香醋提取物抗氧化性的研究[J].中国酿造，2004(7)：16-18

[4]郭春梅，武荣兰，封顺，等.香青兰多糖的提取、测定及其对活性氧自由基的清除作用[J].食品与发酵工业，2005，31(3)：129-132

[5]郎娜，罗红霞.黄花菜中黄酮类物质抗氧化性的研究[J].食品研究与开发，2007，28(3)：74-77

[6]毛绍春，李竹英，李聪.酸果蔓提取物的抗氧化活性及稳定性研究[J].食品科学，2007，28(5)：71-73

Study on the Antioxidant Activity and Stabitity of Crude Extract from the Carrot Seeds

LI Feng1,WANG Wei2
（1.College of Chemical Engineering，Xin Jiang Agriculture University，Urumqi 830052，Xinjiang,China；2.College of Food Science，Xin Jiang Agriculture University，Urumqi 830052，Xinjiang,China）

2009-11-04

李锋（1977—），女（汉），讲师，硕士，研究方向：应用化学。