蒲薏颗粒对化疗药物减毒作用的研究*

张金娟 仝 铁 张贵林 贵阳医学院机能实验室(贵阳 550004)

肿瘤是严重威胁人类健康的一类疾病。目前对肿瘤的主要治疗手段是手术、放疗和化疗,放化疗虽然在一定程度上可控制肿瘤的生长,延长部分患者的生命,但其又存在毒副作用大、降低患者生活质量、削弱患者抗病能力和信心等弊端。故寻找降低化疗药物的用量同时又保存其有效的抗肿瘤作用便成为一种值得探讨的方法。中药抗肿瘤具有毒副作用低,不易产生耐药性和能保护患者抗病能力的特点,近年来为人们所关注。我们曾报道蒲薏颗粒的抗癌作用和对化疗药物的增效作用[1、2、3],本研究旨在探讨蒲薏颗粒与化疗药物联合用药后可能的减毒作用,为肿瘤患者多提供一种有益的用药选择。

1 试验材料 蒲薏颗粒贵州渝生制药有限公司批号:20030306;肝癌 H22瘤株华西医科大学肿瘤研究所;5-氟尿嘧啶(5-Fu)上海旭东海普药业有限公司,批号:030405;电子分析天平梅特勒托利多仪器(上海)有限公司;DJ系列洁净动物饲养柜苏杭实验动物科技发展公司、苏杭净化设备厂;KM小鼠,雌雄兼用,体重 18～22g;贵阳医学院实验动物中心提供,动物合格证号:SCXK(黔)2002-0001。

2 试验方法[4,5]在无菌条件下取生长 8d的小鼠移植型肝癌 H22腹水,显微镜下计数,用生理盐水稀释调整瘤细胞数为 2×107/mL的细胞悬液。于小鼠右腋皮下接种细胞悬液 0.2mL/只,造成荷瘤动物模型。接种 24h后称重,将荷瘤小鼠按体重随机分为 6组:荷瘤对照组(生理盐水 10mL/kg)、5-Fu高剂量组(15mg/kg)、5-Fu低剂量组(5mg/kg)、蒲薏颗粒高剂量加 5-Fu组 (18g/kg+ 5mg/kg)、蒲薏颗粒中剂量加 5-Fu组(9g/kg+ 5mg/kg)和蒲薏颗粒低剂量加 5-Fu组(4.5g/kg+5mg/kg),每组 10只 ,另再取 10只正常小鼠作为正常对照组(生理盐水 10mL/kg)。各组动物分别按各自药物和剂量灌胃(ig)给药,每日 1次,连续 10d。停药次日称重后,摘眼球取血作外周血象检查 ,脱颈椎处死动物,取胸腺和脾脏并称重,按下式计算胸腺指数及脾指数。剥离小鼠右股骨,提取骨髓,计数有核细胞。试验重复 3次(每次试验选同一性别动物)。胸腺(脾)指数=胸腺(脾)重量(mg)/小鼠体重(g)

3 结果 3.1 一般情况及体重变化 5-Fu组小鼠在给药后 6d起,出现被毛蓬松、渐失光泽,活动和饮食减少,体重增长明显抑制,与正常对照组和荷瘤动物组比较差异显著(P＜0.05,P＜0.01);蒲薏颗粒和 5-Fu联合用药 ,除个别小鼠活动减少和有饮食降低等现象外,其余小鼠活动情况、毛色等均正常,体重增长,与 5-Fu组比较有显著性差异(P＜0.05),见表 1～表3。

3.2 对脾脏指数和胸腺指数的影响 各试验组小鼠的脾脏指数和胸腺指数与正常对照组比较均明显下降,尤以 5-Fu单纯化疗组降低最为明显。联合用药后小鼠的脾脏指数和胸腺指数与 5-Fu组比较均有不同程度改善 ,差异显著(P＜0.05,P＜0.01);与荷瘤对照组比较无显著性差异(P＞0.05)。提示蒲薏颗粒具有对抗化疗药物所致免疫器官萎缩,使小鼠脾脏和胸腺指数升高。试验结果见表 1～表 3。

3.3 对外周血象的影响荷瘤对照组小鼠血小板数、白细胞、血红蛋白明显低于正常对照组(P＜0.05),荷瘤小鼠给予高、低剂量的 5-Fu后,血小板和白细胞计数、血红蛋白均显著降低,与荷瘤对照组比较有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01);联合用药后 PY+5-FU高、中剂量的上述指标有不同程度改善,与 5-Fu组比较差异显著(P＜0.05,P＜0.01);提示蒲薏颗粒对 5-Fu所致荷瘤小鼠血小板、白细胞和血红蛋白降低有显著的对抗作用。试验结果见表 4～表 6。

3.4 对骨髓有核细胞计数的影响 5-Fu高、低剂量组小鼠的骨髓有核细胞计数显著降低,与荷瘤对照组比较有显著性差异(P＜0.01),联合用药后骨髓有核细胞计数较荷瘤对照组明显降低,但较 5-Fu组显著升高。与荷瘤对照组比较 PY+5-FU中、低剂量组有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01),与 5-Fu组比较 PY+5-FU高、中剂量组有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01),提示蒲薏颗粒具有对抗化疗药物所致骨髓有核细胞计数降低的作用。试验结果见表 4～表 6。

表1 对荷瘤小鼠体重及胸脾指数的影响(第一次试验结果,♂)

表2 对荷瘤小鼠体重及胸脾指数的影响(第二次试验结果,♂)

表3 对荷瘤小鼠体重及胸脾指数的影响(第三次试验结果,♀)

表4 对荷瘤小鼠血象及骨髓有核细胞数的影响(第一次试验结果)

表5 对荷瘤小鼠血象及骨髓有核细胞数的影响(第二次试验结果)

表6 对荷瘤小鼠血象及骨髓有核细胞数的影响(第三次试验结果)

4 小 结 蒲薏颗粒由蒲公英、薏苡仁、何首乌、灵芝、三棱等 5味药组成,是一经验方,临床应用 50余年。本研究观察蒲薏颗粒与 5-Fu联合应用对肝癌 H22荷瘤小鼠一般情况、体重、胸脾指数、外周血象及骨髓有核细胞数的影响,并与单用 5-Fu作比较,探讨蒲薏颗粒对化疗药物 5-Fu的减毒作用,为蒲薏颗粒的临床应用提供实验依据。试验结果表明:蒲薏颗粒与 5-Fu联合应用可改善 5-Fu引起的小鼠行为活动减少、体重下降等毒性反应 ,可对抗 5-Fu所致免疫器官萎缩 ,使小鼠脾脏和胸腺指数升高,并可对抗 5-Fu所致荷瘤小鼠血小板、白细胞、血红蛋白及骨髓有核细胞的降低,提示蒲薏颗粒具有降低化疗药物的毒性、增强免疫功能作用。蒲薏颗粒对肿瘤细胞和有一定的细胞毒作用;对环磷酰胺和 5-氟尿嘧啶的抗肿瘤作用有明显的协同作用,具有增效减毒、扶正祛邪作用;临床用于肿瘤病人的辅助治疗应具有积极的临床意义。

[1]尹家荣,任光友,张贵林.蒲薏颗粒对体外培养人食管癌细胞(ECA-109)作用的研究 [J].新中医,2007,39(10):103-104.

[2]尹家荣,牟 萍,仝 铁,等.蒲薏颗粒对小鼠肾包膜下植入食管癌肿瘤的抑制作用研究 [J].陕西中医,2007,28(12):1693-1697.

[3]张金娟,尹家荣,仝 铁,等.蒲薏颗粒对化疗药物的增效作用研究 [J].陕西中医,2009,30(7):910-912.

[4]王北婴,李仪奎.中药新药研制开发技术与方法 [M].上海科学技术出版社,2001:735.

[5]胡志力,温守功,于人江,等.灵芝菌合剂抗肿瘤及增效减毒作用研究[J].山东中医药大学学报,2003,27(6):466.