乙肝产妇乳汁血清HBV-DNA相关性分析

钟伟明，何浩瑜

（广西壮族自治区贵港市妇幼保健院检验科，广西贵港 537100）

乙肝产妇乳汁血清HBV-DNA相关性分析

钟伟明，何浩瑜

（广西壮族自治区贵港市妇幼保健院检验科，广西贵港 537100）

目的：探讨乙肝产妇乳汁中乙肝病毒标志物（HBV-M）和HBV-DNA的关系，从而正确指导乙肝产妇产后母乳喂养。方法：采用时间分辨荧光免疫定量分析法（TRFIA）检测乙肝产妇血清中的HBV-M，采用荧光定量PCR法（FQ-PCR）检测血清及乳汁中HBV-DNA含量情况。结果：120例乙肝阳性产妇大三阳的血清与乳汁HBV-DNA阳性检出率为100%，二者HBV-DNA含量为最高，小三阳组HBV-DNA阳性率分别为87.2%和85.1%，HBsAg/HBcAb组的阳性率分别为88.3%和86.0%，后两组血清HBV-DNA含量分别为4.57×105和5.84×106copy/ml，乳汁HBV DNA分别为4.40×105和5.98×106copy/ml。结论：乙肝产妇产后能不能母乳喂养与产后产妇血清和初乳中HBV-DNA情况有关，根据检测结果决定喂养方式，以保证分娩婴儿的安全哺乳环境。

乙肝病毒标志物；HBV-DNA；乳汁

乙型肝炎是世界上最常见的传染病之一，母婴乙肝病毒的传播途径为胎盘传播感染，分娩时经产道被感染或产后哺乳感染及母婴的密切接触感染[1-2]。了解乙肝表面抗原（HB-sAg）阳性乳汁中的HBV-DNA含量，有利于指导母乳喂养。

1 资料与方法

1．1 一般资料

收集2006年5月～2008年6月检测HBsAg阳性并在本院分娩的产妇120例，年龄20～35岁；健康产妇对照20例，是本院同期住院患者，年龄21～36岁。

1．2 标本采集

血液标本：采用无菌操作技术采集产后2～7 d内产妇血液3 ml，置干燥试管中，3 000 r/min，离心 5 min，取血清；乳汁采集：产妇乳头用无菌0.9%NaCl溶液消毒后，用无菌干燥试管留取乳汁3～4 ml，3 000 r/min，离心15 min，取上清液检测。

1．3 检测方法

TRFIA 法 进 行 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb 5项HBV标志物指标定量检测。仪器与试剂为上海新波生物技术有限公司提供的SYM-B10型时间分辨荧光免疫分析仪及配套试剂，操作严格按试剂说明书，结果判断：HBsAg≥0.5 ng/ml，HBsAb≥10 mIU，HBeAg≥0.03 NCU/ml，HBeAb≥1.5 NCU/ml，HBcAb≥0.1 NCU/ml为阳性。HBV-DNA 定量使用美国ABI公司PE5700自动荧光PCR扩增仪，试剂盒由中山医科大学达安基因诊断中心提供，操作严格按说明书，临界阳性标准品 1.0×103copy/ml，强阳性标准品为 1.0×108copy/ml。

1.4 统计学处理

HBV-DNA定量结果用求对数平均值的方法来计算HBV-DNA平均拷贝数，阴性结果不参加平均值的统计，采用SPSS 11.0统计软件包进行t检验。

2 结果

对照组20例健康产妇的HBV-DNA含量和乙肝标志物的检测结果均为阴性，120例产妇血清乙肝阳性产妇HBsAg(+)，HBeAg(+)，HBcAb(+)(大三阳)30 例，占 25%，HBsAg(+)，HBeAb(+)，HBcAb(+)(小三阳)47 例，占 39.2%，HBsAg(+)，HB-cAb(+)43例，占35.8%。120例产妇血清与乳汁HBV DNA检测结果见表1。

表1 120例产妇血清与乳汁HBV-DNA结果和阳性率比较

120例乙肝阳性产妇大三阳的血清与乳汁HBV-DNA阳性检出率为100%，二者HBV-DNA含量为最高，小三阳组HBV-DNA阳性率分别为87.2%和85.1%，HBsAg/HBcAb组的阳性率分别为88.4%和86.0%，后两组血清HBV-DNA含量分别为 4.57×105和 5.84×106copy/ml，乳汁 HBV-DNA 分别为 4.40×105和 5.98×106，两组相比，差异有统计学意义（P<0.01），乳汁HBV-DNA含量与血清HBV-DNA含量正相关（r=0.921）。

3讨论

众所周知，母乳喂养婴儿是最好的喂养方式，母乳成分是婴儿最佳营养品，母婴密切接触有利于母婴的身心健康。乙肝病毒携带者母乳传播问题一直是医务人员比较关注的重要问题之一，关于乙肝病毒标志物阳性产妇能否进行母乳喂养一直有争议。母婴传播是乙肝病毒感染流行的重要途径之一，约占HBV感染的1/3，新生儿感染HBV，则将有90%可转变为慢性HBsAg携带者，因此乙肝的传播已成为影响人口素质的重要问题[3]。

从120例乙肝产妇的乳汁HBV-DNA检测中，血清HBV阳性的母亲，其乳汁可能存在HBV-DNA。HBV携带者产妇乳汁和血清中HBV-DNA差异无统计学意义（P>0.05），血中HBeAg阳性产妇其初乳中HBV-DNA含量更高[4]，本文也说明这一点。从检测结果来看，乙肝产妇乳汁HBV-DNA含量，大三阳组>HBsAg/HBcAb+组>小三阳组，乳汁和血清HBV-DNA含量呈正相关；血清大三阳产妇的乳汁HBV-DNA含量最高，检出率为100%。大量资料表明，血清中HBeAg阳性率与HBV-DNA阳性率之间有较好的相关性，HBeAg能基本反映HBV在体内的复制状态[5]。血HBeAg阳性产妇具有较大的潜在危险性，HBV-DNA是HBV的遗传物质，是病毒复制的指标之一[6]。HBV-DNA定量测定的意义是判断HBV感染者病毒复制的水平，关于血液循环中HBV-DNA浓度与患者传染性之间的关系，通常血浆HBV-DNA浓度大于109copy/ml则日常生活中密切接触中具有较强的传染性，105～106copy/ml生活中密切接触中传染性较小，小于105copy/ml则日常生活中密切接触几乎无传染性[7]。

结果表明HBeAg阳性产妇体内HBV处于复制活跃期，传染性大，建议采取人工喂养。

血HBeAg阴性的HBV携带产妇不能排除HBV通过乳汁传播的可能[8]。本实验对其中47例HBeAg阴性HBV携带产妇乳汁HBV-DNA检测时发现，有85.1%HBV-DNA检出率。血HBeAg阴性产妇HBV携带者母乳喂养应慎重。

笔者认为产妇HBV携带者母乳喂养应慎重，较理想的方法是HBV感染者在婚前、孕期在医生指导下做相关检查，根据需要采取一些防御措施，如妊娠晚期是否需要注射高效乙肝免疫球蛋白，尽量防止或减少母婴间的垂直传播，给将分娩的婴儿一个安全的哺乳环境。

[1]李甲芬.HBV标志物阳性者产妇乳汁HBV DNA检测[J].临床检验杂志,2005,23(2):119.

[2]隋爱华,刘相萍,杨堃.乙肝血清学阳性产妇乳汁中HBV DNA检测的意义[J].实用医药杂志,2008,25(11):1329.

[3]林瑞珠.新生儿注射灭活乙肝疫苗的效果评价[J].广东医学,2004,25(1):106.

[4]吴岷岷,唐引荣,郭彩玉,等.采用阻断措施的乙型肝炎病毒携带产妇哺乳结果的观察[J].中华妇产科杂志,2002,37(4):235.

[5]洪艳华.乳汁乙肝病毒标志物检测的临床意义[J].临床和实验医学杂志,2007,6(2):92.

[6]陆德源.微生物学[M].5版.北京:人民卫生出版社,2002:289-293.

[7]李金明.实时荧光PCR技术北京[M].北京:人民军医出版社,2007:198.

[8]吴晓蔓,冯秀兰,周利纯.乙肝病毒携带产妇乳汁、唾液乙肝病毒标志物检测结果分析[J].中国妇幼保健,2009，24(8):1037.

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1674-4721（2010）09（b）-077-02

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