染料木素自乳制剂的制备及溶出度研究

夏丽文,李大维,张丽杰

(哈药集团 制药六厂,哈尔滨 150056)

自乳化药物传递系统(self-emulsifying drug delivery systems,SEDDS)是由药物、油、非离子表面活性剂(SA)所组成的均一、澄清、各相同性的溶液,有时也包括助溶剂.此体系在胃肠道内或 37℃环境中,通过胃蠕动或温和搅拌即可自发形成水包油型乳剂.SEDDS可减少由于药物与胃肠壁的直接接触而引起的刺激,提高药物的生物利用度,同时可避免水不稳定药物的水解及药物对胃肠道的刺激[1-3].染料木素(genistein)为异黄酮类化合物,化学名称为 5,7,4′-三羟基黄酮(C15H10O5),难溶于水,具有明显防治骨质疏松症、心血管疾病和抗肿瘤等多种药理作用[4-5].染料木素的口服生物利用度极低,限制了其临床应用.本文制备了染料木素自乳化给药系统,以提高染料木素的体外溶出度和口服生物利用度.并以染料木素普通胶囊为参比制剂考察了自乳化制剂的在不同释放介质中的体外溶出度.

1 仪器与试药

1.1 仪器

日本岛津 LC—10A高效液相色谱仪 (配SPD—10紫外可见检测器,CK chrom色谱工作站);;HZQ-C空气振荡器(哈尔滨市东联电子技术开发有限公司);溶出仪(ZRS-智能型溶出仪,天津大学无线电厂);FA2104电子天平(上海精密仪器科学有限公司).

1.2 试药

染料木素(陕西慧科科技开发有限公司,纯度＞98%);染料木素对照品(中国药品生物制品检定所);染料木素普通胶囊(自制,染料木素 50mg,微晶纤维素 75 mg,羧甲基淀粉钠 75 mg);Cremophor EL 35(BASF公司);油酸乙酯(北京长城化学试剂有限公司);Tween 80(北京益利精细化学品有限公司);Transcultol P(法国佳法赛公司);其它试剂均为分析纯.

2 实验方法与结果

2.1 染料木素自乳化软胶囊的制备

称取适量的染料木素,加入处方量的油相、乳化剂和助溶剂,油相为油酸乙酯,乳化剂为 T50C50(50%Tween 80-50%Cremophor EL35),助溶剂为Transcultol P,其最佳比例为 45∶45∶10,药物为辅料总量的 10%.在 40℃,100 r/min空气振荡器中振荡24 h左右使染料木素完全溶解.所得的溶液与明胶在(25±2)℃、相对湿度 40%的条件下,经自动旋转轧囊机压制成软胶囊,每粒含染料木素约 50mg.

2.2 染料木素普通胶囊的制备

称取适量的染料木素,加入处方量的微晶纤维素和羧甲基淀粉钠,混合均匀后装入 2号胶囊中.

2.3 溶出度的测定

2.3.1 色谱条件

色谱柱为 Diamonsil C18柱(200mm×4.6 mm I.D.,5 μm);以甲醇 -0.05%磷酸(60∶40)为流动相;流速为 1.0m L/min;检测波长为 260 nm,柱温为 30℃,进样量为 10μL.

2.3.2 标准曲线

精密称取染料木素对照品约 20 mg置 100 m L量瓶中用甲醇溶解,流动性定容,得到 200mg/L母液 ;分别从中精密移取 0.1、0.5、1、2、5m L于 10 m L量瓶中,移取 0.1、0.5 mL于 100 mL量瓶中用流动性定容 ,得到 0.2、1、2、10、20、40、100mg/L标准液.分别精密取系列标准溶液 10μL注入液相色谱仪,以峰面积对质量浓度进行线性回归.标准曲线为 A=20 854C-623.2(r=0.999 8).结果表明染料木素在 0.2～100 mg/L内线性关系良好.

2.3.3 方法精密度和回收率实验

按“2.3.2”项下的方法配置 1.0、10.0、40.0 mg/L 3种质量浓度的标准溶液,于同日内连续测定 6次,计算其日内测定的 RSD;对上述 3种质量浓度的溶液于 6 d内分别进行测定,计算日间测定的 RSD;同时计算方法回收率.结果见表1.

表1 方法的精密度和回收率,n=6

2.3.4 溶出度的测定

分别取染料木素自乳化软胶囊和普通胶囊各6粒,照中国药典(2005版)二部溶出度测定法(附录Ⅹ C第一法),分别以蒸馏水、0.1 mol/L盐酸、pH值为 6.8磷酸盐缓冲液 900mL为溶出介质,温度为(37±0.5)℃,转速为 100 r/min,依法操作,分别在 5、10、20、30、45、60min时 ,取溶液 5mL(同时补充同温同体积的新鲜介质),用 0.45μm微孔滤膜滤过,取续滤液,照高效液相色谱法,在 260 nm的波长处测定峰面积,计算累积溶出量,结果见图1.自乳化制剂中的染料木素 20min的溶出度即可达 90%以上,而普通胶囊中的染料木素 45 min的溶出度不足 30%,将染料木素制成自乳化胶囊后,溶出度较普通胶囊有明显提高.

图1 染料木素自乳化软胶囊和普通胶囊的溶出曲线

3 讨 论

选择 Transcultol P作为助溶剂,主要作用是溶解药物,当 Transcultol P的比例过高,不利于轧制软胶囊.以 T50C50(50%Tween80-50%Cremophor EL35)为混合乳化剂乳化效果要好于 Tween80单独作为乳化剂.由于 SEDDS处方中使用了大量的表面活性剂,长期服用可能对机体产生毒性,而助溶剂可能与胶囊壳相互作用导致药物渗出[6],故在表面活性剂量和助溶剂量尽可能小的前提下,同时保证药物充分溶解和形成的乳剂较好为原则,最终确定了该处方.

由溶出度试验结果可见,SEDDS中染料木素的溶出度明显高于普通胶囊,表明 SEDDS可以显著提高难溶性药物的体外溶出度,进而有助于提高口服生物利用度.

染料木素自乳化制剂在三种释放介质(蒸馏水、0.1 mol/L盐酸、pH 6.8磷酸盐缓冲液)中的溶出度无显著性差别,表明释放介质对染料木素自乳化制剂的溶出度无影响.

[1] POUTON CW.Self-emulsifying drug delivery systems:assessment of theefficiency of emulsification[J].Int JPharm.,1985,27:335-48.

[2] POUTON CW.Formulation of self-emulsifying drug delivery systems.Adv Drug Del Rev.,1997,25(4):47-58.

[3] GURSOY R N,BENITA S.Self-emulsifying drug delivery systems(SEDDS)for improved oral delivery of lipophilic drugs[J].Biomed Pharmacother,2004,58(3):173-82.

[4] 黄 枚,陈利铭.染料木素防治癌症的研究进展[J].海峡药学,2000,12(3):9-10.

[5] 王剑波,顾 宜,郭 萍,等.紫外分光光度法测定染料木素胶囊含量和溶出度[J].药物分析杂志,2004,24(5):473-476.

[6] CHARMAN SA,CHARMANW N,ROGGR M C,et al.Selfemulsifying drug delivery systems:formulation and biopharmaceutic evaluation of an investigational lipophilic compound[J].Pharm Res,1992,9:87-93.