鹅源新城疫病毒云南流行毒株的鉴定理化试验
2010-08-15荀来武尹革芬
刘 燕 荀来武 尹革芬 俞 浩
(①云南农业职业技术学院 昆明 650212 ②云南省种畜场 ③云南农业大学动物科学技术学院)
1 材料与方法
1.1 材料
(1)9日非免疫鸡胚 购自云南农科院鸡场;(2)氯仿、乙醚、甲醛。
1.2 方法
1.2.1 氯仿乙醚敏感性试验 分离病毒毒株尿囊液经4.8%氯仿在4℃处理10min,20%乙醚在4℃处理24h后,分别尿囊腔接种9日龄鸡胚10枚,每胚0.1mL,并设对照组10枚,每胚接种未经氯仿乙醚处理的分离病毒株尿囊液0.1ml(殷震等,1997),观察结果。
1.2.2 甲醛灭活试验 分离病毒株尿囊液经0.1%和0.5%的甲醛处理后,分别尿囊腔接种9日龄鸡胚10枚,每胚0.1mL,并设对照组10枚,每胚接种未经甲醛处理的分离病毒株尿囊0.1mL,观察结果。
1.2.3 病毒热稳定性试验 把分离毒株尿囊液密封于封闭的小试管中,分别置于100℃ 1min、2min;56℃5min、10min、30min、45min和60min,并迅速冷却,按常规处理分别接种9日龄鸡胚10枚,每胚0.1ml。并设对照组10枚,接种未经热处理的鹅源新城疫病毒株尿囊液,每胚0.1ml(苏敬良等,20000),观察结果。
2 结果
2.1 氯仿乙醚敏感性
观察96 h后,经氯仿乙醚处理后的病毒液均不能致死鸡胚,而对照组全部死亡。结果表明分离病毒对氯仿敏感。
2.2 甲醛灭活
接种经甲醛灭活的鹅新城疫病毒KM2007株尿囊液鸡胚均未死亡,而对照组全部死亡。
2.3 病毒热稳定性
结果经100℃ 1min、2min ;56℃ 45min和60min处理的尿囊液接种的鸡胚全部存活,血凝价从25降为20;56℃ 5min、10min、30min组别的鸡胚部分死亡,血凝价从
25分别下降为24、23、22。
3 结论与分析
(1)所分离的病毒对乙醚和氯仿敏感,得出病毒有囊膜。所分离的病毒对甲醛敏感并有血凝价的改变,得出病毒有血凝性。所分离病毒对热也敏感。
(2)用分离病毒株做氯仿乙醚敏感性试验,甲醛灭活试验,结果表明分离病毒KM2007株对氯仿乙醚、甲醛都敏感,病毒热稳定性试验结果表明分离病毒KM2007株对热也敏感。说明所分离病毒KM2007株与NDV的理化特性有很大的相关性,理化试验无法区别这两种毒株的同源性。鹅副粘病毒与NDV之间抗原性和致病性上的差异性有待进一步研究。
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