鞍山地区女性宫颈病变人乳头瘤病毒感染的型别分布和临床意义

李晓楠 金素芬 王长友

宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，发病率仅次于乳腺癌，居女性恶性肿瘤的第二位[1]。人乳头瘤病毒(human papillomavirus，HPV)感染是宫颈癌的主要病因[2]。根据致病力的大小分为高危型的低危型，流行病学证明，高危型HPV感染是子宫颈炎症和宫颈上皮内病变高发的主要危险因素，而低危型HPV主要引起宫颈非特异性炎症或尖锐湿疣。另外，有文献报道，HPV感染基因分型有地理性，因此，对HPV进行准确的基因分型，明确患者感染的高、低危型别以及了解本地区常见的HPV感染型别，对HPV感染的治疗，宫颈癌的预防以及基因疫苗的研制具有重要意义。本实验采用核酸分子快速导流杂交基因芯片技术对815例门诊女性患者HPV感染分型检测，了解鞍山地区宫颈病变常见的HPV感染型别，探讨不同亚型HPV感染的致癌性，进一步为宫颈癌的防治提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2009年5月至2010年3月于鞍山市中心医院妇科门诊接受HPV感染检测的患者宫颈脱落细胞标本(815例)，同时进行宫颈病理学诊断，按病理结果分为炎症组583例，尖锐湿疣组15例，CINI组89例，CINII组77例，CINIII组42例，宫颈癌组9例。

1.2 HPV-DNA检测方法 采用核酸分子快速导流杂交基因芯片技术检测21种HPV亚型，可判断多重感染，包括13种高危型(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59 和 68)和 5种低危型(6、11、42、43、44)和 3 种中国人常见亚型(53、66、CP8304)。杂交过程包括:①样本DNA提取;②PCR扩增;③导流杂交;④结果判断:肉眼观察检测结果:阳性点呈现蓝紫色圆点，根据芯片上HPV分型分布相应的点判断HPV亚型，多点阳性即为多重感染。

1.3 CIN的诊断标准 宫颈鳞状上皮非典型增生及原位癌按Richart标准，分为CINI、CINII和CINIII三个级别病理诊断行盲法阅片。

1.4 统计学方法 采用SPSS 15.0统计软件计算分析，各HPV基因型阳性率采用χ2检验进行比较，为双侧检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 鞍山地区女性 HPV感染的基因型815例女性宫颈脱落细胞中，除HPV 35以外，其余20种HPV亚型均被检出，本组患者HPV感染最常见的10种基因型分别为HPV 16(16.32%)，HPV 58(5.88%)，HPV 52(3.93%)，HPV 33(2.82%)，HPV 31(2.09%)，HPV 11(1.84%)，HPV 53(1.47%)，HPV 18(1.23%)，HPV 68(1.10%)，HPV 66(0.98%)。

2.2 不同级别宫颈病变HPV感染的型别分布 CINI组中，HPV感染的型别分布依次为HPV 16、HPV 58、HPV 52、HPV 31、HPV 33。CINII组中，HPV感染的型别分布依次为HPV 16、HPV 58、HPV 52、HPV 331、HPV 31。CINIII组中，HPV 感染的型别分布依次为 HPV 16、HPV 33、HPV 31、HPV 52、HPV 53。可见随着宫颈病变级别的升高，HPV感染亚型趋于集中，HPV16的检出率在所有宫颈病变种居于首位，且随宫颈病变级别的升高而升高。

3 讨论

3.1 宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，全球发病率最高是南非，其次在亚洲，据统计，世界上每年的新发病例约46万，每年约有25万人死于宫颈癌。在我国，每年宫颈癌的新发病例数超过13万，每年死于宫颈癌的妇女约有2万人。人乳头瘤病毒HPV被公认为是宫颈癌发生的必要病因，迄今为止，已经发现HPV亚型超过200种，其中85种HPV基因克隆被鉴定，另有120种部分基因被鉴定，其中30余种从生殖道分离得到[3]。2005年国际癌症研究所(IARC)明确提出13种 HR-HPV，包括 HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68型[4]。本实验显示在815例患者中常见的HPV感染亚型为 HPV16、58、52、33、31，均为高危型，再次证实了 HRHPV感染是导致宫颈癌和宫颈上皮内病变的主要原因。

3.2 HPV亚型分布的地域性差异 文献报道，HPV感染基因型分布有地理性，在国际癌症协会研究协会(IARC)的最新研究中，宫颈癌患者10种最常见的亚型为16(57.40%)，18(16.60%)，45(6.80%)，31(4.30%)，33(3.70%)，52(2.50%)，58(2.30%)，(2.20%)，59(1.50%)，56(1.30%)。非洲较为流行的是HPV45和33，欧洲流行的是HPV45，南北美洲是HPV31，33和45，亚洲相对流行的是HPV58和52。国内高艳娥等[5]应用荧光偏振对上海地区感染型别的研究中，前四位依次是HPV16、18、58、31。刘敏报道的山东地区女性常见的基因型为 HPV16、52、58、18、11。本实验结果，鞍山地区女性HPV感染型别依次为16、58、52、33、31，这与世界范围及国内的研究结果不同，表明，HPV感染基因型分布存在地域性差异，因此，对不同区域人群进行HPV分型检测及流行病学的调查对宫颈癌的早期防治和疫苗的研究有重要意义。

[1]Cai HB，Ding XH，Chen CC.Prevalence of Single and Multiple Human Papillomavirus Types in Cervical Cancei and Precursor Lesions in Hubei，China.Oncology，2009，76:157-161.

[2]Misra JS，Srivastava S，Singh U，et al.Risk-factors and strategies for control of carcinoma cervix in India:Hospital based cytological screening experience of 35 years.Indian J Cancer，2009，46(2):155-159.

[3]Eileen MB.Human papillomavirusand cervicalcancer.Clinical Microbiology Revlews，2003，16(1):1-17.

[4]Plante M，Lau S，Brydon L，et al.Neoadjuvant chemotherapy followed in bulky stage IB1 cervical cancer:case report.Gynecol Oncol，2006，101(2):367-370.

[5]高艳娥，张菊，吴静.宫颈癌组织人乳头瘤病毒的荧光偏振基因分型.生物化学与生物物理学报，2003，35(11):1029-1034.