脱毒草莓苗田间繁育技术

郭正兵，崔 香

(江苏农林职业技术学院，江苏 句容 212400)

草莓营养丰富，口感好，老少皆宜，市场前景广阔，栽培面积不断扩大。然而，草莓病毒病的危害可使草莓减产30% ～80%［1］，我国因草莓病毒病每年减产35万t，直接经济损失30亿元［2］。世界上已知的草莓病毒有20多种，我国常见的有4种，即草莓轻型黄边病毒 (SMYEV)、草莓斑驳病毒 (SMDV)、草莓皱缩病毒 (SCrV)、草莓镶脉病毒 (SVBV)，我国草莓主栽区均存在上述4种病毒［3］。近年来，长江流域草莓植株严重退化主要是病毒引起，大面积植株感染率50%［4］。防治草莓病毒病，提高草莓产量，主要靠应用无病毒的草莓苗。目前，美国、日本等发达国家全部使用无病毒的草莓苗。要使我国草莓生产稳步发展，生产无病毒的草莓苗非常重要。

目前，虽然尚未找到根治草莓病毒病的有效药物，但是利用组织培养技术可以实现草莓脱毒苗的快繁生产。近几年来这一领域的研究已经有较多报道，也建立了一些重要草莓品种的生产技术体系［5］。但在脱毒苗生产及组培快繁方面，积累的技术要点更多的是属于经验性的，常常因为草莓品种或研究报道的不同而存在较大差异。为此，笔者主要就不同品种草莓脱毒试管苗移栽训化的有关影响因素及田间繁殖表现进行了探讨，旨在为最终建立简易高效的草莓脱毒苗的繁育体系，为进一步开展相关研究工作奠定一定基础，现将研究结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 供试材料

试验于2008－2009年在江苏农林职业技术学院北校区草莓生产基地进行。当地属于北亚热带南部季风气候区，温、光、水协调，四季分明。年平均气温15.1℃，平均年降水量1 028.6 mm，年日照时数2 098.7 h，无霜期225 d。土壤属于宁镇丘陵下蜀黄土母质发育的马肝土，0～20 cm土层有机质含量 16.5 g·kg－1，全氮含量 1.2 g·kg－1，速效磷 8 mg·kg－1，速效钾 70 mg·kg－1，土壤 pH值6.5。

供试草莓品种为江苏宁镇地区主栽培品种:明宝、丰香和红颊，均为江苏农林职业技术学院农艺系组织培养实验室提供。

1.2 试管苗的炼苗与移栽

初步炼苗。将培养瓶上的扎口绳或皮筋松开，只去掉外层的聚丙烯膜，保留内层的白纸，不要将瓶口包扎物全部去掉，因为此时的草莓组培苗茎叶等组织器官表面还没有长出角质层，若暴露于空气中，极易因失水导致死亡。角质层的生长是一个循序渐进的过程，让组培苗初步接触空气，可诱导植株长出角质层。2～3 d后移去瓶口包扎物，让组培苗充分接触空气，再过2～3 d后，组培苗对外界环境已逐渐适应，且培养基已开始长出菌类，此时进行组培苗出瓶炼苗移栽。

小心地用镊子，最好用竹木镊子，或在镊子尖部套上橡胶管，夹持组培苗，将苗从瓶中移出，用流水慢慢冲净植株根部的培养基，注意切勿伤及根部的根毛，更不能用手搓动根部。培养基一定要用流水冲洗干净，否则，易引起根部病菌感染，影响脱毒苗的成活率［5－8］。

移栽。将3个品种的脱毒试管苗 (生长势良好，根系状况相近)分别为2008年5月20日、8月1日和10月25日进行3次移栽于大棚内，每次移栽依据品种分3个小区，每个小区分别设置3种不同基质处理，园土∶泥碳∶河沙∶腐熟厩肥A 1.0∶1.0∶0.5∶0.5(常用复合配方之一)，B 0∶1.0∶0∶0.5(常用于园艺作物生产)，C 1.0∶0∶0∶0.5(常用于园艺作物生产)。3种配方基质在使用前均先采用50%多菌灵400倍液进行处理，3次重复。大棚遮盖防虫网，预防蚜虫叮咬幼苗传播病毒［9］，栽后加强管理。

1.3 脱毒二代苗的培育

2009年3月1日，对明宝、丰香、红颊3个品种的一代苗进行选优，选取生长健壮苗 (3叶1心)作为繁育母株，按常规繁育方法进行大田繁殖，畦宽150 cm，定植于畦的中央。试验依品种分3个小区，小区面积为667 m2，每小区内根据种苗种类进行分组，分脱毒苗和常规苗繁育组，定植株数为300株，其中脱毒苗200株，常规苗100株，株距为100 cm。对上述品种进行比较试验。3个品种进行隔离繁殖，全程防虫网覆盖，各小区肥水管理水平一致。

2 结果与分析

2.1 不同移栽时期对试管苗成活率的影响

在没有控温设备的条件下，移栽时期是试管苗能否成活的关键因素之一。从表1可以看出，夏季移栽不利于试管苗成活。通过对1 800株试管苗的移栽试验看出，刚刚移出的试管苗特别不耐25℃以上高温。温度在15～25℃之间移栽试管苗都可以有较高的成活率。

2.2 不同移栽基质对试管苗成活率的影响

从图1可以看出，在基质A中3种试管苗成活率均较高，移栽成活率分别为:明宝91.0%;丰香88.1%;红颊81.2%;基质C中试管苗成活率最低，其中红颊品种只有38.1%。园土∶泥碳∶河沙∶腐熟厩肥1.0∶1.0∶0.5∶0.5为配方的基质不仅能透性较好，而且营养较为充分，适宜作本地区草莓试管苗的移栽基质。

表1 不同移栽期对试管苗成活率的影响

图1 3种不同基质对试管苗成活率的影响

2.3 不同移栽基质对试管苗生长的影响

以丰香脱毒苗为例，在试管苗移栽6周后，调查不同基质对试管苗生长发育的影响。2008年6月1日调查结果 (表2)，丰香脱毒在基质A中表现最好，根系发达、叶大、色浓、植株高，叶片叶绿素含量最高，利于光合作用。在基质C中移栽苗生长发育状况最差:叶小、色淡，叶绿素含量低，光合效率低。

表2 丰香脱毒苗在不同基质中的生长表现

2.4 同一基质不同品种试管苗生长发育的差异

以基质A为试验基质，于第1次移栽 (4月20日)后第8周，即6月16日对每个品种随机取样20株，观察、统计各品种的形态指标，比较各品种之间的差异。从表3看出3种试管苗移栽之后，植株生长表现出较大的差异:明宝表现最好，各形态指标增长率明显高于另2个品种，红颊表现较差，试管苗移栽后初期出现叶片发黄、枯萎的现象，后期草莓苗逐渐恢复，新长出的叶片浓绿，但影响了草莓苗的生长量，植株普遍表现弱小。

表3 不同品种试管苗的生长比较

2.5 无病毒二代苗的培育

2009年5月28日，在每个小区随机抽样50株，初步观察3个品种的繁殖系数及对当地主要的病害白粉病和炭疽病的感染情况 (表4)。

表4 不同品种二代苗的田间表现

3个品种的繁殖能力存在较大差异:不论是脱毒苗还是常规苗，3个品种的繁殖系数均表现出一定的差异性:明宝和丰香品种的繁殖能力均较强，最强的是明宝品种，脱毒苗繁殖系数高达54倍，红颊品种表现较差，常规苗的繁殖系数只有8倍。

脱毒苗和常规苗繁殖能力的差异:3个品种脱毒试管苗的繁殖系数均远远高于常规苗，分别是常规苗繁殖系数的2.5、2.6和3.2倍。红颊品种在此方面的差异性表现较为明显。

3个品种田间抗病性差异:明宝和丰香抗病性较强，尤其是脱毒苗，几乎不感染病害，常规苗只对白粉病轻微感染，红颊种苗在此方面差异最大，脱毒苗只对炭疽病有轻微感染，而常规苗却严重感染炭疽病，中度感染白粉病。

3 小结与讨论

试管苗的炼苗时间以春夏季 (5－6月)和秋季 (9－10月)最为适宜，此时外界温度和湿度均较理想，成活率高，管理方便，炼苗后可接着繁殖一代苗，达到生长快，匍匐茎抽生多，一代苗繁殖量大，能在每2年春季提供更多的二代苗繁育母苗。

对于草莓试管苗移栽技术研究已有很多报道，但对于移栽基质的选择，当前国内外一致认为草炭土、蛭石、珍珠岩等是蔬菜花卉理想的育苗基质［1］。本试验为了方便技术的推广应用，用最为常见的泥炭、泥土、河沙和腐熟厩肥配成不同的基质。结果表明，只要保证试管苗移栽的温度和湿度，将上述4种成份按照一定的比例进行组合，均可保证试管苗移栽的成活率。泥炭富含大量营养元素，尤其含有高浓度的速效氮，由于草莓试管苗驯化比较脆弱，对基质溶液中高浓度离子反应敏感，易造成肥害，生长受到影响;而纯泥土的肥力又不足，试管苗的生长差，故将园土和泥炭按1∶1的比例混合，再加0.5份的河沙 (提高通透性)和0.5份的腐熟厩肥 (提高肥力)，极大地提高了试管苗的移栽成活率，并能提高试管苗的质量。

组织脱毒苗的繁殖系数均远远高于常规苗，二代苗的抗病能力也显著提高，但在供试的3个品种中，红颊对炭疽病较为敏感，抗性较差，本试验中对此品种没有采取避雨繁殖育苗，故在生产过程中可针对性地采取一些保护措施，以提高其种苗的繁殖系数及抗病能力。

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