玉竹提取物A对小鼠脾淋巴细胞转化和IL-2产生的影响

2010-07-30关玲敏潘兴瑜

中国医药指南 2010年14期

关玲敏潘兴瑜*

玉竹（polygonatum odoratum var plurif l orum ohwi）为百合科黄精属植物药，具有扶正固本、滋补强壮、养阴润燥和生津止渴的功效，中医认为有延年益寿和抗衰老作用，并常用于治疗糖尿病和结核等疾病。现代药理研究其主要成分有多糖、生物碱和菸酸等成分，证明有强心、扩张血管、降血压、降血脂和降血糖等作用[1]。有关玉竹对免疫功能的作用各家报道不一，有人认为玉竹具有增强免疫作用[1]。也有资料表明玉竹具有类似肾上腺皮质激素样作用[2]。本文对东北辽西山区所产玉竹的根茎进行提取，以玉竹提取物A为研究对象，探讨其对免疫功能的影响和作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料

BALB/C小鼠，6～8W，由本校动物室提供；Con-A（Sigma，美国）；MTT（Fluka，瑞士）；玉竹提取物A（干品，由本室研究人员采集和提取）；RPMI1640（Gibco，美国）。

1.2 小鼠脾淋巴细胞转化实验

细胞密度为1×106/mL，加Con-A6μg/mL刺激和不加Con-A刺激两种形式。5%CO2条件下培养72h，于前4h加MTT，采用本室改进的MTT比色法[6]测定OD值。IP=（1-实验组OD值/对照组OD值）×100%。

1.3 小鼠脾淋巴细胞IL-2的产生

按文献[4,5]的方法，细胞密度为4×106/mL，采用5μg/mL的Con-A做为诱导剂，实验组添加不同剂量的玉竹提取物A，培养48h后收获上清冻存待测。

1.4 小鼠脾淋巴细胞去除Con-A和玉竹提取物的IL-2产生

按文献[6]的方法，Con-A浓度为7μg/mL，细胞密度为1×107/mL，实验组添加不同剂量的玉竹提取物A，培养6h后洗二次，去除Con-A和玉竹提取物A，重悬细胞密度为4×106/mL，继续培养42h后收获上清冻存待测。

1.5 小鼠IL-2的测定

小鼠IL-2靶细胞按文献[7]的方法诱导；小鼠IL-2的活性测定采用文献[3]的方法测定。IP=（1-实验组OD/对照组OD）×100%。

1.6 统计方法

采用t检验。

2 结果

玉竹提取物A对Con-A诱导的小鼠脾淋巴细胞转化具有较强的抑制作用，其中以1μg/mL的剂量抑制作用相对为强，见表1；对小鼠脾淋巴细胞自然转化也有一定的抑制作用，但是抑制作用是有限的，低剂量没有作用，见表2；玉竹提取物A对小鼠脾淋巴细胞经Con-A诱导的IL-2产生也有显著的抑制作用，6h后去除Con-A和玉竹提取物A，其抑制作用不能解除，二者最有效的抑制剂量均在10μg/mL，见表3和4。

3 讨论

玉竹提取物A对小鼠体外免疫功能具有显著的抑制作用，用Con-A最小剂量诱导小鼠脾淋巴细胞转化实验的结果表明0.1μg/mL的玉竹提取物A便可产生较强的抑制作用，对非Con-A诱导的小鼠脾淋巴细胞自然转化也有一定的抑制作用，但抑制作用较弱，低剂量并无此作用，二者均呈量效关系。以上结果提示玉竹提取物A对免疫功能的抑制作用是有限度的，只抑制增值的淋巴细胞，对静止的淋巴细胞未发现有任何明显的抑制作用，有实验结果表明，玉竹提取物A没有直接的细胞毒作用，也没有反映出对细胞的毒副作用，这区别于现在临床所应用的免疫抑制剂，是以损伤免疫系统而实现免疫抑制作用的。玉竹提取物A对小鼠脾淋巴细胞经Con-A诱导的产生也有显著的抑制作用，即使作用6h以后去除Con-A和玉竹提取物A，这种抑制作用仍不能解除，二者最低最有效的剂量都在10μg/mL。该结果提示玉竹提取物A对免疫功能抑制的机制之一就是抑制小鼠脾淋巴细胞IL-2的产生，且作用于早期阶段，但不能解释0.1μg/mL的玉竹提取物A对小鼠脾淋巴细胞转化所产生的较强的抑制作用，因为低剂量玉竹提取物A对小鼠脾淋巴细胞IL-2产生几乎没有影响，提示尚有另外的抑制环节。其明确的抑制作用尚在探讨之中。