不同产地青风藤中青藤碱的含量比较

2010-07-29瞿发林董文燊汤莉娜

中国药业 2010年18期

瞿发林，董文燊，刘蓉，杨婷，汤莉娜

(中国人民解放军第102医院，江苏常州 213003)

青风藤为防己科植物青藤 Sinomenium acutum(Thunb.)Rehd.et Wils.及毛青藤 Sinomenium acutum(Thunb.)Rehd.et Wils.var.cinereum Rehd.et Wils.的干燥藤茎，主要分布于河南、安徽、江苏、浙江、福建、广东、广西、湖北、四川、贵州、陕西等地[1]。青风藤的主要化学成分为青藤碱、双青藤碱、木兰花碱、尖防己碱、四氢表小檗碱、异青藤碱、土杜拉宁、清风藤碱、dl-丁香树脂酚、十六烷酸甲酯、N-去甲基尖防已碱、白兰花碱、光千金藤碱，以及β-谷甾醇、豆甾醇。笔者采用高效液相色谱法[2-3]测定了不同产地青风藤的青藤碱含量，报道如下。

1 仪器与试药

Waters系列高效液相色谱仪，Waters CapLC2487双λ吸光度检测器，Empower2数据处理系统(美国Waters公司);FA1004电子分析天平(上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂);AE240S型电子分析天平(梅特勒-拖利多仪器有限公司);SB5200型超声波发生器(上海必能信超声有限公司)。青风藤(常州市华尔神中药饮片厂，并经中国人民解放军第102医院瞿发林主任药师鉴定);青藤碱(中国药品生物制品检定所，批号为0774-200206);甲醇(色谱纯)，乙二胺(分析纯)，水(重蒸馏水)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱:Lichrospher C18柱(150 mm ×4.6 mm，5 μm);流动相:甲醇-水-乙二胺(40∶60∶0.2);流速:1.0 mL/min;检测波长:262 nm;柱温:30℃;进样量:20 μL。在此条件下，色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

2.2 对照品溶液制备

精密称取青藤碱对照品12.5 mg，置25 mL棕色量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液(1 mL含青藤碱0.5 mg)。

2.3 方法学考察

标准曲线绘制:精密吸取对照品溶液 1.0，2.0，4.0，6.0，8.0 mL，分别置10 mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，分别编号为1，2，3，4，5号，原液作为6号。照高效色液相色谱法，依次进样20 μL测定，以进样量为横坐标、峰面积为纵坐标，按最小二乘法进行直线回归，得回归方程 Y=2×107X-57424，r=0.9998(n=6)。结果表明，青藤碱进样量在1～10 μg范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验:取青藤碱对照品溶液(1.0 mg/mL)，连续进样5次。结果峰面积的 RSD为0.99%(n=5)。

稳定性试验:吸取同一份供试品溶液，分别于0，2，4，6，8 h时进样20 μL。结果峰面积的 RSD为1.17%(n=5)。

重复性试验:取江苏产(批号为070227)青风藤药材粉末，精密称取5份，按供试品溶液制备方法制备溶液并依法测定。结果样品的青藤碱平均含量为8.31 mg/g，RSD为1.37%(n=5)。

加样回收试验:精密称取江苏产(批号为070227)青风藤药材粉末6份，约0.25 g，精密称定，再分别加入青藤碱对照品贮备液，依法制备供试液品溶液并测定含量，计算回收率。结果见表1。

表1 青藤碱加样回收试验结果(n=6)

2.4 样品含量测定

取青风藤适量，粉碎后过三号筛，取药材粉末约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇20 mL，密塞，称定质量，超声处理(功率250 W，频率20 kHz)20 min，放冷，再称定质量，用70%乙醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。依法测定，按外标一点法计算含量，结果见表2。

3 讨论

结果表明，不同产地的青风藤中青藤碱含量有差异，即使是同一产地，因采集的时间不同含量也有差异。5批青风藤药材的青藤碱含量最高值为1.90%，最低值为0.58%，差别较大，但都不低于0.5%，符合药典规定。在试验中观察到，青藤碱含量与药材饮片的色泽有一定关系，饮片表面呈绿褐色的药材中青藤碱含量较高，呈棕褐色或灰褐色的药材含量次之，而表面呈灰黄色的药材含量较低。