牡丹皮水提取物及乙醇提取物的抗菌作用研究

2010-07-29傅若秋孟德胜胡大强龙世林

中国药业 2010年18期

傅若秋，孟德胜，胡大强，龙世林

(第三军医大学大坪医院野战外科研究所药剂科，重庆 400042)

牡丹皮为毛茛科植物牡丹 Paeonia suffruticosa Andr.的干燥根皮，具有清热凉血、活血化瘀功效，主治湿毒发斑、痈肿疮毒、吐血衄血、夜热早凉等症[1]。笔者研究了牡丹皮水提取物及不同浓度乙醇提取物对金黄色葡萄糖球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌的抑制作用，报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

牡丹皮500 g(本院中药房提供)。供试菌种为金黄色葡萄糖球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌(本院检验科提供)。普通琼脂平板、肉汤培养基、葡萄糖酚红肉汤培养基(本院药检室提供)。

1.2 方法

1.2.1 提取方法

取牡丹皮100 g，碾碎，加100 mL蒸馏水浸泡10 min，然后煎煮30 min及20 min各1次，合并煎液，过滤，浓缩至浓度100%(即1 mL药液含生药量为1 g)，作为水提取物，备用。

取牡丹皮100 g，共4份，碾碎，分别加50%，70%，85%，95%的药用乙醇100 mL，回流提取2 h及1 h各1次，合并煎液，过滤，回收乙醇，制成干膏，用无菌蒸馏水调浓度至100%(即1 mL药液含生药量为1 g)，灭菌，冷藏，作为乙醇提取物，备用。

1.2.2 供试菌悬液制备[2-3]

将供试菌种接种于普通琼脂平板，置37℃恒温箱中培养24 h，用接种环挑取少许供试菌，置肉汤培养管中，37℃培养6 h，再用肉汤调细菌浓度，使之含菌量约为0.5麦氏单位，即得供试菌悬液。

1.2.3 最低抑菌浓度(MIC)测定

采用二倍稀释法，取13 mm×100 mm灭菌具棉塞的试管9支，编号，在每管中加无菌肉汤培养基2.0 mL，于第1管中加牡丹皮水或乙醇提取物2.0 mL，混匀后取出2.0 mL放入第2管，依此类推，至第9管取出2.0 mL弃去，即牡丹皮提取物被逐步稀释成1∶2，1∶4，1∶8，1 ∶16，1 ∶32，1 ∶64，1 ∶128，1 ∶256，1 ∶512，往管中加供试菌悬液0.1 mL。每浓度做3个复管。置37℃恒温培养箱中培养18～36 h，肉眼观察结果。试管中液体颜色变成黄色为阳性，试管中液体颜色仍呈红色为阴性。

1.2.4 最低杀菌浓度(MBC)的测定

从上述肉眼观察的 MIC阴性管中取培养液转种到琼脂平板上，置37℃恒温箱中培养24 h，观察结果。培养基中无细菌生长的最低浓度即为牡丹皮试液的 MBC。

2 结果

牡丹皮不同提取物的 MIC和 MBC测定结果见表1。可见，牡丹皮水提取物及乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌具有较强的抑制作用和一定的杀灭作用，其中对金黄色葡萄球菌的抑制和杀灭作用较强。综合分析抑菌效果，强度大小顺序大致为水提取物、50%乙醇提取物、70%乙醇提取物、85%乙醇提取物、95%乙醇提取物。