胃癌组织 Survivin和 Bcl-2的表达及意义

李长福,郑著家

(大庆油田总医院消化科,黑龙江 大庆 163001)

胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一,在我国其发病率居各类肿瘤首位 ,占全部恶性肿瘤死亡人数 1/4。因此,寻找新的胃癌防治方法有重要的临床意义。研究表明,胃癌的发生、发展与凋亡细胞数目减少有密切联系。细胞凋亡失控会引起细胞过度增殖和凋亡减少,从而导致肿瘤发生、发展。生存素(Survivin)属于凋亡抑制蛋白 (IAP)家族,通过抑制 Caspase-3表达,抑制肿瘤细胞凋亡而促进肿瘤的发生、发展。Bcl-2是凋亡调控基因,广泛抑制各种刺激因素诱导的细胞凋亡,延长细胞活力而发挥生物学作用。Survivin与 Bcl-2在胃癌发生、发展中的关系尚不明确。因此,本研究通过检测胃癌组织中 Survivin和 Bcl-2表达,探讨 Survivin和 Bcl-2与胃癌发生、发展的关系及其临床意义。

1 材料与方法

1.1 标本及来源

收集黑龙江省大庆油田总医院 2008— 01～ 2009— 06手术切除胃癌标本40例,取癌组织同时取癌旁正常胃黏膜组织。 其中男 26例 ,女 14例,年龄 40～ 75(平均 65.12)岁,其中未 /低分化癌22例,中 /高分化癌18例;胃癌的分期采用1997年 U ICC分期标准进行 TNM分期 ,Ⅰ ～Ⅱ期 28例,Ⅲ ～Ⅳ期12例;无淋巴结转移 21例,有淋巴结转移19例;未侵及浆膜者20例,侵及浆膜者20例。

1.2 试剂及方法

兔抗人 Survivin和 Bcl-2单克隆抗体购于 Sigma生物技术公司。SP试剂盒购于北京中杉金桥生物技术公司。按试剂盒说明书操作。

1.3 免疫组化染色结果判断标准

常规制备石蜡切片及 HE染色,组织标本均经40g/L甲醛固定,石蜡包埋,4μm厚连续切片,行病理组织学检查。采用 SP试剂盒免疫组化方法染色,用 PBS替代一抗作阴性对照,癌旁正常组织作为正常对照。Survivin和 Bcl-2阳性染色位于细胞浆内,呈棕黄色颗粒状。按阳性细胞数占细胞总数的比例判定：高倍镜下选取10个视野,计数阳性细胞数 ,阳性细胞数 ＜10%(-),≥10%(+)。

1.4 统计学分析

采用 SPSS11.0统计包,数据用i2检验及 Spearman等级相关分析。

2 结果

2.1 Survivin阳性表达

Survivin阳性产物位于细胞浆中 ,呈棕黄色颗粒状。在胃癌组织中 Survivin蛋白阳性率60.00%,在癌旁正常胃黏膜组织中 Survivin蛋白阳性率22.50%,两者比较有显著性差异 (i2= 11.605,P ＜ 0.01),见表 1。

表1 Survivin在胃癌组织与癌旁正常组织中的表达(n=40)

胃癌组织中 Survivin蛋白表达阳性率在男性患者中高于女性,但两者比较差异无统计学意义 (P＞ 0.05);胃癌组织中 Survivin蛋白表达阳性率在高/中分化癌组织中低于未/低分化癌组织,两者比较有显著性差异 (i2= 4.713,P＜0.05);胃癌组织中 Survivin蛋白表达阳性率在Ⅰ～Ⅱ期癌组织中低于Ⅲ～Ⅳ期癌组织,两者比较有显著性差异(i2= 4.682,P＜0.05);胃癌组织中 Survivin蛋白表达阳性率在无淋巴结转移癌组织中低于有淋巴结转移癌组织,但两者比较差异无统计学意义 (i2= 3.480,P＞ 0.05);胃癌组织中 Survivin蛋白表达阳性率在无浆膜侵润癌组织中低于有浆膜侵润癌组织,两者比较有显著性差异 (i2= 4.286,P＜0.05);Survivin与胃癌各临床病理因素间的关系,见表2。

表2 Survivin与胃癌临床病理因素间的关系

2.2 Bcl-2在胃癌组织中的表达

40例胃癌组织中有30例 Bcl-2呈阳性表达,其阳性率为75.00%;30例 Bcl-2阳性表达中 Survivin阳性表达占22例,阳性率为73.33%;Survivin的表达与 Bcl-2的表达呈正相关(r= 0.471,P ＜ 0.01),见表 3。

表3 胃癌组织中 Survivin的表达与 Bcl-2的表达关系

3 讨论

本实验结果显示,在胃癌组织中 Survivin阳性表达率为60.00%,且随胃癌分化程度、TNM分期增加及浆膜侵润程度,其阳性表达率亦随之增高。研究结果提示 Survivin在胃癌发生、发展过程中可能起重要作用。在 Bcl-2阳性表达胃癌组织中 Survivin阳性率为73.33%,提示 Bcl-2与 Survivin可能在胃癌发生、发展过程中起协同作用,这些结果也进一步证实胃癌的发生、发展是多种基因和多种因子共同作用的结果。Survivin是 IAP家族中一个新成员,属凋亡抑制因子,通过直接或间接抑制凋亡效应蛋白酶 Caspase-3和 Caspase-7活化来阻断细胞凋亡过程,促进细胞增殖[1,2]。因此,Survivin参与肿瘤的发生、发展过程。Survivin基因在正常组织中不表达或低表达,而在肿瘤组织中呈高表达,这一特点使其可能成为判断肿瘤病人发生、发展及预后的一项重要指标[3,4]。本实验结果表明,在胃癌组织中 Survivin阳性表达较癌旁正常组织显著增高,且随胃癌分化程度、TNM分期增加及浆膜侵润,其阳性表达率亦随之增高。故推测 Survivin阳性表达可能是胃癌发生、发展的标志之一。检测胃癌组织中Survivin表达可能对判断肿瘤的发生和临床进展有一定作用。有关胃癌组织中 Survivin与 Bcl-2蛋白表达的关系尚不明确。本研究结果显示,在 Bcl-2阳性和阴性的胃癌组织中,Survivin阳性表达率分别为73.33%和20.00%,Survivin表达与 Bcl-2表达呈正相关,这与研究报道一致[5]。提示两者表达可能在胃癌发生、发展过程中具有协同作用。这为进一步探索胃癌治疗方案提供有价值的线索。胃癌的发生、发展是多因素、多阶段、多基因变异的病理过程。其发生机制尚未完全阐明,但和多种基因表达异常密切相关。Survivin与 Bcl-2两种生物因子的检测,可作为胃癌发生与发展的重要参考指标,有望成为胃癌基因诊断性标志物和胃癌治疗的新靶点。

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