奥尼罗非鱼仔稚鱼饲料中适宜脂肪水平的研究

中谷集团茂名饲料有限公司 池作授

广东海洋大学水产学院耿旭 郭云学 董晓慧＊黄翔鹄 王 辉 陈 刚

广东省茂名市茂南三高渔业发展有限公司 李瑞伟

脂肪是动物组织细胞的组成成分，同时也是重要的能源物质，在鱼类生长、发育和繁殖过程中不可缺少。饲料脂肪含量过低，不能满足水产动物的生长需要，尤其是对必需脂肪酸的需要；饲料中脂肪含量过高则会影响鱼虾对饲料的利用率，增加鱼虾体脂肪的含量，损害鱼虾健康，进而影响水产品的品质和保存时间。饲料中适量的脂肪含量，不仅可提高饲料蛋白质的利用率，还是保证合理的养殖成本、鱼体健康和取得良好经济效益所必需。

奥尼罗非鱼具有雄性率高，生长快，群体产量高，抗寒力、抗病力强，含肉率高，肉质清爽等优点（王武，2002）。关于罗非鱼的营养需要和配合饲料的研究，国内外已有较多的报道（刘勇等，2009；朱选等，2009；Rawling 等，2009；Lim 等，2009；Wang等，2008；Tran-Duy 等，2008；林仕梅等，2007），但大多是关于罗非鱼幼鱼、成鱼的研究，对罗非鱼仔稚鱼营养研究的报道不多。

本试验研究了不同脂肪水平饲喂条件下，奥尼罗非鱼仔稚鱼生长、体组成及消化酶活性，了解奥尼罗非鱼仔稚鱼期脂肪营养生理的变化规律，为奥尼罗非鱼仔稚鱼配合饲料的研制提供试验基础。

1 材料与方法

1.1 试验饲料 以鱼粉、豆粕、大豆分离蛋白为蛋白源，豆油为脂肪源，设计6个等氮等能（45%CP、14 MJ/kg）的饲料，在饲料中添加 0、2%、4%、6%、8%和10%的脂肪，测定饲料中实际粗脂肪含 量 为 2.82% （F1）、5.35% （F2）、7.32% （F3）、8.95%（F4）、10.86%（F5）和 13.04%（F6），日粮组成及营养水平见表1。饲料在实验室制备，各种饲料原料粉碎过80目筛，按配方比例准确称重后混匀，微量组分采用逐级扩大法混合。混匀后饲料用封口袋编号分装，于-20℃冰箱中保存备用。

表1 日粮组成及营养水平%

1.2 试验用鱼与饲养管理 奥尼罗非鱼仔稚鱼由茂名市茂南三高渔业发展有限公司提供，为同一批鱼卵人工孵化后暂养10 d的鱼苗。鱼苗运回实验室暂养7 d后，挑选规格一致，体格健壮的鱼苗进行分组，鱼苗初始体重为（0.032±0.002）g。 试验共设6个处理，每个处理3个重复，每个重复一个塑料桶（55 L），每桶放鱼苗150尾，试验期28 d。每天投喂 4 次（07∶30、11∶30、17∶30 和 22∶30），日投喂量约为鱼体体重的15%，每周称量体重一次，根据体重调整投饵量。试验期间每天换水一次，换水量100%，清洁桶一次，每天记录投喂量和水温。整个试验期间充气养殖，水温27～30℃，pH 值 7.4～7.6。

1.3 样品采集和分析 试验结束前一天停喂，次日取出罗非鱼称重、记数，计算生长指标。从每个桶中随机取8尾鱼，取其整个腹部供酶活分析。剩下的鱼全部放入-20℃冰箱中保存，备测体成分。

1.3.1 生长指标 生长指标用以下公式计算：

增重率（WG）/%=100×（终末均重-初始均重）/初始均重；

特定生长率（SGR）=[ln（终末均重）－ln（初始均重）]/饲养天数；

肥满度（CF）/%=100×鱼体体重/体长3；

成活率/%=100×试验结束鱼尾数/试验开始鱼尾数。

1.3.2 饲料及鱼体成分分析 样品分析参照国际标准方法（AOAC，1995），水分含量采用105℃常压干燥法测定；粗蛋白质含量采用微量凯氏定氮法测定；粗脂肪含量采用索氏抽提法测定，有机提取溶剂为乙醚；灰分含量采用550℃马弗炉高温灼烧法测定。

1.3.3 酶活性测定 准确称取样品1.0～1.2 g，放入已烘干的玻璃匀浆器中，并加入10倍（体积/重量）预冷的生理盐水，于冰水浴中匀浆。匀浆液在0～2℃、8000 r/min条件下，离心10 min，取上清液进行酶活测定。可溶性蛋白含量、胃蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶均使用南京建成科技有限公司的试剂盒进行测定。

1.4 统计分析 试验数据用SPSS 13.0软件进行统计分析。先对数据作单因素方差分析（ANOVA），如有显著性差异（P<0.05），则进行Duncan’s多重比较。

2 结果

2.1 饲料脂肪水平对罗非鱼仔稚鱼生长性能的影响 结果见表2。

由表2可以看出终末重：F5组体重最大，其次是F4组，两组间无显著差异，但显著高于F1、F2组和F3组。F1组脂肪水平最低，终末重也显著低于F3、F4、F5组和F6组。总体趋势为随饲料脂肪水平的增加，终末重显著升高，在F5组达到最高点，然后显著下降（P<0.05）。

表2 饲料脂肪水平对罗非鱼仔稚鱼生长性能的影响

增重率、特定生长率：各组间的增重率和特定生长率的变化趋势和终末重的变化趋势基本一致。F1组的增重率和特定生长率与F2组差异不显著，但显著低于其他各组（P<0.05）。

肥满度：各组之间无显著差异（P>0.05）。

成活率：罗非鱼仔稚鱼的成活率在脂肪含量从3%到11%之间逐渐增高，但当脂肪含量高于11%时又显著下降（P<0.05）。

2.2 饲料脂肪水平对罗非鱼仔稚鱼体成分的影响 结果见表3。从表3中可知，罗非鱼仔稚鱼鱼体的水分含量有随着脂肪含量的增加呈逐渐下降的趋势，且 F6和 F5组显著低于 F1、F2、F3和 F4组。罗非鱼仔稚鱼鱼体的粗脂肪含量随着饲料中脂肪含量水平的升高而升高，F1组显著低于其他各组，F3、F4、F5各组之间无显著差异，F6组最大，并且显著高于其他各组。灰分随饲料中脂肪含量的升高而显著下降，F1组最大并且显著高于其他5组，其次是F2组，而F3和F4组之间无显著差异，F5和F6之间也无显著差异并且显著低于前4组。饲料中脂肪含量的增加使得罗非鱼仔稚鱼粗蛋白质含量降低，两者关系呈负相关性，但是在F3、F4、F5各组无显著差异。F1、F2组粗蛋白质含量显著高于其他各组，F6组粗蛋白质最低并且显著低于其他各组（P<0.05）。

2.3 饲料脂肪水平对罗非鱼仔稚鱼消化酶的影响 结果见表4。从表4中可知，饲料中脂肪含量对罗非鱼仔稚鱼的胃蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶三种消化酶有显著影响，其中胃蛋白酶活性随着脂肪含量的增加而显著降低，在F6组显著低于其他各组，F1和F2两组之间无显著差异，但是这两组显著高于其他各组；F4组和F5组无显著差异，但是显著低于F3组。脂肪酶活性变化趋势与胃蛋白酶相反、随着饲料脂肪含量的增加，脂肪酶活性显著升高，F6组最高，但F4、F5和F6三组之间无显著差异，这三组显著高于前三组；F1组和F2组之间无差异，但是显著低于其他各组。淀粉酶活性总体趋势是随着饲料中脂肪含量逐渐升高而逐渐降低，F1组最高，显著高于其他各组，F2组也显著高于后4组，而在F3组之后下降的趋势较小，酶活性改变不大，趋于平稳。

表3 饲料脂肪水平对罗非鱼仔稚鱼体成分的影响 %

表4 饲料脂肪水平对罗非鱼仔稚鱼消化酶活力的影响U/mg

3 讨论

3.1 饲料脂肪水平对罗非鱼仔稚鱼生长的影响本试验结果表明，在饲料脂肪含量为3%～11%时，增重率随着饲料脂肪的增加而上升，但在超过11%脂肪含量时，增重率显著下降。罗非鱼仔稚鱼在饲料脂肪含量为11%时获得最大的生长。通过对增重率和饲料脂肪含量进行二次回归分析显示，罗非鱼仔稚鱼在饲料脂肪含量为10.98%时到达最快的生长（图1）。水产动物对脂肪需求量差异主要取决于水产动物的食性，一般来说，草食性和杂食鱼类对脂肪需要量比较低，而肉食性鱼类对脂肪的需要量高。庞思成（1994）报道，在尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）饲料中添加3% ～5%的豆油，使饲料的总脂肪达到8.8%～10.7%时，罗非鱼的生长最佳。这与本试验的结果基本一致。王贵英等（2003）研究发现，饲料脂肪水平对鳜鱼（Siniperca chuatsi）的生长和蛋白质效率有显著影响，饲料脂肪水平在7%～12%时，鳜鱼获得最佳生长效果。雍文岳等 （1985）报道，草鱼（Ctenopharyngodon idella）饲料的脂肪最适含量为3.6%，而毛永庆等（1985）的试验结果表明，草鱼饲料脂肪的最适含量为8%。庸鲽（Hippoglossus hippoglossus L.）饲料中适宜脂肪含量为14%（Martins等，2007）， 饲料脂肪含量为 15.5% ～18%时，石首鱼（Atractoscion nobilis）生长效果最好 （López等，2006）。 当饲料蛋白质水平为33%时，鲤鱼（Cyprinus carpio Linnaeus）对脂肪的需要量为5% ～8%（李爱杰，1996）。王道尊等（1987）试验表明，青鱼（Mylopharyngodon piceus）饲料中脂肪含量为6.5%时，促生长效果最好。黄鳝（Monopterus alba）饲料中脂肪的最适含量为3%～ 4%（杨代勤等，2000）；王松等（2008）认为，黄鳝饲料的最适脂肪含量在10%左右。由此可见鱼类对脂肪的需要量因品种而异，甚至同一种鱼类对脂肪的需要量也可能由于试验初始重、环境等因素的不同而不同。本试验中，特定生长率和成活率变化趋势呈现出与增重率几乎相同的变化趋势，均在饲料脂肪含量11%时有最大值。根据本试验结果和二次回归的结果表明：罗非鱼仔稚鱼获得最大生长的饲料最适脂肪含量为10.98%。

图1 罗非鱼仔稚鱼增重率与饲料脂肪水平的关系

3.2 饲料脂肪水平对罗非鱼仔稚鱼鱼体组成的影响 饲料脂肪含量对罗非鱼仔稚鱼的体成分影响显著，在本试验中，随着饲料中脂肪水平的升高，试验鱼体水分、粗蛋白质、灰分含量显著下降，粗脂肪含量显著升高。汪留全等（2003）报道，中华绒螯蟹（Eriochier sinensis）幼蟹的体水分、粗蛋白质、灰分随饲料脂肪含量的增加而降低，体脂肪含量则显著上升，这与本试验结果一致。在饲料蛋白质含量为48%和51%的条件下，红笛鲷（Lutjanus erythropterus）幼鱼肌肉中脂肪含量随饲料脂肪含量的增加而显著升高（彭志东，2007）；随饲料中脂肪含量的增加，哲罗鱼（Hucho taimen）稚鱼体脂肪含量上升 （徐奇友等，2007）；Bromley（1980）和 Kaushik 等（1989）发现，饲料脂肪水平可提高大菱鲆（Scophthalmus maximus L.）和虹鳟（Salmo gairdneri R.）的体脂肪含量；石首鱼（Sciaenops ocellaturs）（Daniels，1986）、 金头鲷（Sparus aurata L.）（Santinha 等，1999）和真鲷（Pagrus major）（Ogata 和 Sheaner，2000）幼鱼的相关研究结果也与本试验相似。段彪等 （2007）对齐口裂腹鱼（Schizothorax prenanti）的研究结果表明，当饲料脂肪含量升高时，试验鱼鱼体粗蛋白质含量呈先升高后下降的趋势，而粗脂肪含量则有先下降后升高的趋势。Martins等（2007）则报道了随着饲料脂肪含量的增加，庸鲽鱼体粗蛋白质含量无明显变化，而粗脂肪含量显著升高。本试验中仔稚鱼处于快速生长和发育的时期，对饲料脂肪需求量较高，因此其体成分受饲料脂肪水平的影响较大。

3.3 饲料脂肪水平对罗非鱼仔稚鱼消化酶活性的影响 消化酶是消化腺和消化系统分泌的具有消化作用的酶类。在消化酶中，根据消化对象的不同大致可划分为蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等几种（杨惠萍等，1998）。

饲料或活饵中的脂肪也会对消化酶分泌起到刺激作用，金头鲷仔鱼饲喂EPA和DHA强化轮虫时，中性脂肪酶活性明显增强 （Izquierdo和Aramtzamendi，2000）。当提高饲料中的沙丁鱼油含量时，结鱼（Tor khudree）仔稚鱼的脂肪酶含量增加（Muzaffar-Bazaz 和 Keshavanath，1993）；高攀等（2009）报道，草鱼肠道和肝胰脏的脂肪酶活性在饲料蛋白质含量相同的情况下，随着脂肪含量的升高，呈显著上升的趋势；草鱼饲料中添加肉碱可显著提高肠道中脂肪酶的活性（田娟等，2009）。本试验结果表明，随饲料脂肪水平的升高，蛋白酶和淀粉酶活性呈下降趋势，而脂肪酶活性则不断升高，脂肪酶的变化趋势与Muzaffar-Bazaz和Kaeshavanath（1993）的研究结果相似。

4 小结

本试验结果表明，奥尼罗非鱼仔稚鱼饲料中脂肪含量为10.98%时，可获得最大生长。

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