二参汤对大鼠心肌缺血抗脂质过氧化损伤的保护作用

王亚平，周丽雅（.德惠市中医院，吉林德惠；.长春中医药大学，吉林长春307）

二参汤对大鼠心肌缺血抗脂质过氧化损伤的保护作用

王亚平1，周丽雅2
（1.德惠市中医院，吉林德惠；2.长春中医药大学，吉林长春130117）

目的利用垂体后叶素腹腔注射制造大鼠心肌缺血模型，观察二参汤对大鼠心肌缺血的保护作用。方法将60只Wistar大鼠分为正常对照组、模型组、二参汤低、中、高剂量组、肠溶阿斯匹林组，观察二参汤对各组大鼠心电图、血清及心肌组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）活力的影响。结果二参汤可以对抗垂体后叶素腹腔注射造成大鼠心肌缺血损伤的心电图ST段异常升高数减少，血清及心肌组织MDA、NO、NOS的含量明显下降，SOD活力显著升高。结论二参汤对大鼠心肌缺血有保护作用，其机制可能与抗脂质过氧化反映有关。

二参汤；心肌缺血；抗脂质过氧化；大鼠

本实验通过中药二参汤对大鼠心肌缺血抗脂质过氧化损伤的保护作用的研究，观察二参汤对各组大鼠心电图、血清及心肌组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）活力的影响，以验证二参汤对大鼠心肌缺血的保护作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物与药物Wistar大白鼠60只，体重250～300 g，8～10周龄，雄性，购自长春开发区实验动物中心。二参汤（黄芪、党参、丹参、川芎、降香、麦冬、五味子、木香、薤白、三七、水蛭、甘草），本院制剂。垂体后叶素、ATP酶测试盒、MDA、SOD、NO、NOS测试盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.2 实验方法将大鼠随机分为6组，每组10只：正常对照组，用10mL／kg蒸馏水灌胃；模型组，用10 mL／kg蒸馏水灌胃；二参汤低、中、高剂量组，用浓度分别为50，200，400 g／L的二参汤10mL／kg灌胃；肠溶阿斯匹林组，用浓度为3.33 g／L的肠溶阿斯匹林10mL／kg灌胃。连续灌胃14 d后，除正常对照组外，其余5组大鼠用垂体后叶素20 U／kg腹腔注射造成心肌缺血模型。各组在给与垂体后叶素前后均描记心电图。24 h后全部大鼠用20%乌拉坦10 mL／kg腹腔注射麻醉，进行指标测定。

1.3 指标测定（1）麻醉后，将大鼠仰卧位固定，四肢皮下插入针状电极及胸前电极，每只大鼠先做心电图。各组动物均记录正常Ⅱ导联，测定用垂体后叶素ST段异常偏移总毫伏数（∑ST）、每组出现ST段异常的动物数及ST偏移的平均值，作为判断心肌缺血程度和药物疗效的指标。（2）造模成功后，剖腹，自腹主动脉无菌取血，在4℃下3 000 r／min离心10 min，分离血清置于－70℃冰箱待测。（3）模型成功后，大鼠于腹主动脉取血后立即冰面上快速取心肌组织，平行于冠状沟均匀地将心室部分横断成5份，取其2份放入2 mL预冷4℃的生理盐水中，用玻璃匀浆器制备心肌组织匀浆镜下观察到细胞磨破，取10%匀浆上清加生理盐水，按1∶9制成10%匀浆液，3 500 r／min离心15min，取上清液，－70℃冻存作相关检测。（4）大鼠处死后，取其余心肌组织进行病理学检查。

1.4 统计学分析所有数据经SPSS 11.0软件包处理，数据以均数±标准差（±s）表示，所得数据作方差齐性试验后作配对t检验。

2 实验结果

2.1 二参汤对心肌缺血大鼠的心电图ST段偏移的影响见表1。

表1 二参汤对心肌缺血大鼠Ⅱ导联ST偏移的影响（¯x ±s，n＝10）

2.2 二参汤对心肌缺血大鼠血清SOD、MDA、NO、NOS的影响见表2。

2.3 二参汤对心肌缺血大鼠心肌组织SOD、MDA、NO、NOS的影响见表3。

表2 二参汤对心肌缺血大鼠血清的影响（¯x±s，n＝10）

表3 二参汤对心肌缺血大鼠心肌组织的影响（¯x±s，n＝10）

3 讨论

垂体后叶素诱发的心肌缺血动物模型广泛应用于筛选抗心肌缺血药物的研究。垂体后叶素能收缩冠状动脉，引起心肌缺血，同时能收缩全身小血管，使心肌耗氧增加，心电图表现为ST－T改变和心律失常等。同时心肌缺血导致细胞损伤时，心肌可释放或反射性引起肾上腺素释放大量儿茶酚胺，其释放与梗死严重性及过程相关，进一步加重心肌缺血损伤。

MDA是氧自由基引发的生物膜不饱和脂肪酸过氧化反应的代谢产物，对组织有损伤作用［1］。而MDA为脂质过氧化物的代谢产物，其含量在一定程度上反映组织细胞损伤的程度。超氧化物歧化酶（SOD）作为一种抗氧化酶，有助于清除氧自由基，阻断脂质过氧化连锁反应，但在清除自由基的过程中SOD活性却显著下降。因此，通过自由基的生成和清除两方面的检测，可以推断出缺血的损害程度。一氧化氮（NO）作为一种重要的神经介质、分子信使和细胞功能调节因子，广泛参与了体内血管功能调节、神经传递、炎症免疫反应等机体众多生理活动和病理过程［2］。NOS作为NO合成的限速酶，是调节NO含量的最重要环节。NO过多可直接影响铁蛋白的功能、能量代谢，并对基因产生毒性作用，抑制DNA和蛋白质的合成，从而表现出强烈的细胞毒性作用，与缺血损伤的发生、发展密切相关。

从本实验看，二参汤低、中、高剂量组均可显著升高心肌缺血大鼠血中SOD含量，降低MDA含量，表明二参汤可通过提高机体抗氧化能力，抑制脂质过氧化产物形成，达到保护心脏缺血再灌注损伤的作用。二参汤组大鼠血清及心肌组织NO、NOS含量均明显低于正常对照组。证明本药可有效的阻止大鼠心肌缺血后血清及心肌组织NO、NOS含量的升高，该方可能通过其抗氧自由基作用，改善线粒体功能而改善心肌组织的能量代谢，使蛋白激酶活性升高，从而使NOS磷酸化，活性降低，使NO的合成减少，起到保护心肌组织的作用。

［1］Schmidley JW.Free radical incentral nervous system，Ischemia Stroke.1990，21（7）：10-86.

［2］AlessandriB，Bullock R.Glutamate and its receptors in the path ophusiology of brain and spinal cord injuries，Progr Brain Res.1998，116：303.

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